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41.
库尔勒香梨基因组DNA提取及RAPD体系建立 总被引:22,自引:1,他引:21
通过比较试验,使用SDS-氯仿-异戊醇法,添加BME及Vc,简便、快速地从库尔勒香梨成熟叶中提取大分子量DNA,有效地去除了梨属植物组织中所含的多酚类、单宁、色素及多糖类物质,该DNA能很好地被酶切并用于RAPD分析。 相似文献
42.
43.
中国美利奴羊不同时期卵巢组织cDNA消减文库(SSH)的构建及序列分析 总被引:2,自引:0,他引:2
季节性发情是制约我国绵羊(Ovis aries)产业发展的重要因素之一。母羊卵巢是重要的生殖器官,卵巢组织中周期性特异表达的基因很有可能直接或间接影响母羊的季节性发情。为探讨绵羊季节性发情的分子遗传机制,本研究采用抑制性消减杂交技术构建了发情期发情和未发情中国美利奴羊卵巢组织差异表达的消减cDNA文库。随机取样386个阳性克隆,经PCR鉴定获得有效克隆306个,测序后获得126条非冗余序列;用BLAST在线序列软件与GenBank、GenBank EST等数据库进行同源性序列比较,发现其中有21个未知序列,可能是和中国美利奴羊季节性产羔性状相关的新基因。从文库中选择差异表达的视黄酸受体应答1基因(RARRES1)、胸腺素β4基因(TMSB4X)、翻译延长因子基因(EEF1A1)、前胸腺素α基因(PTMA)以及12号和89号基因,在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、卵巢、输卵管、下丘脑和垂体中对上述6种基因进行组织表达谱分析。结果发现,TMSB4X、PTMA、EEF1A1和12号基因在上述组织中均有表达,而RARRES1和89号基因仅在中国美利奴羊卵巢组织中高表达。为了进一步验证研究结果,对RARRES1、TMSB4X、EEF1A1、PTMA、12号和89号基因进行实时定量PCR检测,结果显示,上述基因在发情中国美利奴羊卵巢组织中的表达量显著高于未发情绵羊。本研究筛选出调控中国美利奴羊季节性繁殖相关的候选基因,为进一步研究卵巢功能与绵羊季节性繁殖相互作用的分子机制提供了基础资料。 相似文献
44.
45.
旨在研究雌激素受体(ER)与鸡-鹌鹑属间杂交早期胚胎发育、性别分化的关系。人工授精获得鸡(♂)-鹌鹑(♀)杂交种蛋,按照鸡的孵化标准同批入孵,连续采集早期活胚(2.75、3.00、3.25、3.50、3.75、4.00、4.25、4.50、4.75、5.00d),采用RT—PCR法,用Wpkci和β-actin引物进行多重PCR,鉴定早期胚胎性别;之后选取各时间点雌、雄胚胎各4枚,以β-actin为内标,测定ER mRNA相对表达丰度。雌、雄胚胎ER mRNA的发育性变化趋势基本一致,2.75~3.00d表达水平均较高;3.25d雄性表达水平显著降低(P〈0.05),雌性则极显著降低(P〈0.01);3.50d雌、雄表达水平又回复至较高水平;3.75d二者均极显著降低(P〈0.01),此后一直维持在较低水平。不同日龄间比较,2.75~3.50d雌性ER表达高于雄性,差异极显著(P〈0.01)。杂交胚胎性分化时间大致开始于胚胎发育的第2.75~3.50d,性分化期ER的异常表达可能与胚胎死亡、杂种不育有关,这一结论有待于进一步研究发育同期鸡、鹌鹑胚胎ER的表达及其功能后证实。 相似文献
46.
47.
为了解蛋鸡产蛋过程中相关激素和受体基因的变化规律,试验采用放射免疫技术(RIA)和荧光定量PCR技术对蛋壳形成过程中血清孕酮(P4)、雌二醇(E2)2种激素含量的动态变化和孕酮受体(PR)、雌激素受体(ERα)在输卵管子宫部的表达进行测定。结果表明:蛋进入子宫前1小时孕酮含量最高,与其他时间点相比差异极显著(P0.01),蛋进入子宫部后孕酮含量逐渐下降,直到产蛋后1小时孕酮含量开始上升;雌二醇含量在蛋进入输卵管子宫部15小时最高,蛋排出时最低,产蛋后1小时开始升高;蛋壳形成过程中PGRmRNA的变化趋势是下降-上升-下降,蛋进入输卵管子宫部15小时PGR表达量较蛋排出时有极显著提高(P0.01),之后PGR表达量开始下降;在蛋壳形成过程中ERα表达量呈先上升后下降的趋势,在蛋进入输卵管子宫部45分钟时ERα表达量最高,与蛋排出时、产蛋后1小时相比差异极显著(P0.01)。 相似文献
48.
不同类型绵羊胴体重的通径分析 总被引:2,自引:0,他引:2
分别选用代表循环,呼吸和消化三个生理系统的内脏器官,对它们与胴体重之间进行了通径分析,结果表明:肝重,肺重,大肠净重与胴体重均能达到一定显著水平的相关,心重,小肠长度虽与胴体重间有一定相关,但未能达到显著水平。 相似文献
49.
50.