小反刍兽疫灭活抗原RT-PCR检测方法的建立及其相关序列分析     

赵文华  杨仕标  朱建波  肖雷  李华春  张念祖 《动物医学进展》2008,29(11)

以灭活的检测用抗原为材料,抽提灭活小反刍兽疫病毒的基因组RNA作为模板,根据参考文献及GenBank下载的序列,设计3对位于F基因的引物(2对为套式引物),进行RT-PCR扩增及扩增片段的T载体克隆、序列分析。结果显示,所设计引物单独或套式RT-PCR对模板均有预期大小的片段扩增;扩增片段经核苷酸序列测定和分析,表明所扩增片段为小反刍兽疫病毒的F基因片段。且所设计引物对同属牛瘟病毒、犬瘟热病毒无扩增,证明所用引物为小反刍兽疫病毒特异性引物,此3对引物可用于小反刍兽疫与牛瘟等同属病毒的鉴别诊断。  相似文献   

小反刍兽疫病毒竞争ELISA检测试剂盒生产工艺研究     

刘晓慧  杨云庆  叶玲玲  祝贺  吕建强  赵文华  颜红  尹尚莲  花群义  杨仕标  张光培  周晓黎  董俊  艾军 《中国畜牧兽医》2014,41(9):31-34

为研究小反刍兽疫病毒（PPRV）竞争ELISA试剂盒的生产工艺,本试验利用昆虫细胞表达的PPRV核蛋白及其单克隆抗体,建立一种特异性高、敏感性强的PPRV竞争ELISA检测方法,并对该方法的各个步骤进行优化,确定该方法的最适条件,从而确定竞争ELISA的操作程序。并用该方法与OIE推荐的PPRV rC-ELISA抗体检测试剂盒同时检测来自西藏、内蒙古共977份临床羊、牛血清样本,结果显示特异性、敏感性、符合率分别达99.89%、93.82%、99.38%。本研究建立的PPRV竞争ELISA方法为该病毒检测试剂盒的研制奠定技术基础,为小反刍兽疫的防控提供科学依据。  相似文献   

黄芩苷对脂多糖诱导后仔猪的血管紧密连接蛋白表达量和MLCK-MLC的影响     

赵文华  庄锋  熊春红  刘宇  付书林  邱银生 《中国畜牧兽医》2019,46(11):3190-3197

本研究利用脂多糖（LPS）诱导建立仔猪免疫损伤模型，研究黄芩苷对LPS诱导的仔猪血管紧密连接蛋白表达量和MLCK-MLC信号通路变化的影响，并探讨其保护机制。试验选取42头健康仔猪，分为空白对照组（A组）、LPS模型组（B组）、LPS+丙酮酸乙酯处理组（C组）、LPS+氟尼辛葡甲胺处理组（D）和LPS+黄芩苷处理组（剂量分别为25、50和100 mg/kg，E、F、G组）。饲喂7 d后，攻毒前0.5 h进行药物处理，处理组及模型组腹腔注射LPS，空白对照组注射等量生理盐水，LPS诱导6 h后再次给药。试验1 d后，采集主动脉血管样品2份，通过免疫组化及免疫荧光观察血管中紧密连接蛋白（闭锁小带蛋白-1（ZO-1）、密封蛋白-1（Claudin-1）和闭合蛋白（Occludin））的表达变化；Western blotting法测定血管MLCK-MLC信号通路相关蛋白（肌球蛋白轻链激酶（MLCK）、肌球蛋白轻链2（MLC2）和磷酸化肌球蛋白轻链2（p-MLC2））的表达量。结果表明，LPS诱导后，仔猪血管中ZO-1、Claudin-1和Occludin蛋白表达量均极显著降低（P<0.01），黄芩苷处理能明显提高仔猪血管紧密连接蛋白的表达量。LPS模型组MLCK和p-MLC2蛋白表达量均极显著升高（P<0.01），黄芩苷能显著下调MLCK和p-MLC2表达量（P<0.05），各组间MLC2表达量差异不显著（P>0.05）。综上所述，LPS能引起仔猪的血管损伤，激活MLCK-MLC信号通路，影响紧密连接蛋白表达量及功能，黄芩苷对LPS诱导的仔猪血管紧密连接损伤具有保护作用。本试验结果为黄芩苷用于治疗猪的炎性血管损伤提供了科学依据。  相似文献   

新形势下做好林业重点工程档案工作的探讨     

杜欣  赵文华  李立 《辽宁林业科技》2004,(5):32-35

章阐述了做好林业重点工程档案工作的重要意义，论述了林业重点工程档案工作的特点和现状，并结合档案工作业务实际，提出具体的建议：做好档案基础工作，确保工程档案准确、规范、齐全、完整；提高认识，做好工程声像档案的积累和保存工作；采用现代化技术手段，提高工程档案管理水平；探索档案利用服务新途径，做好林业重点工程政策宣传工作；做好工程档案信息开发，及时提供有价值的档案编研成果；抓好工程档案管理人员队伍建设，提高管理人员素质。  相似文献   

林业企业脱危的非经济性思考     

赵文华 《内蒙古林业》1991,(4)

面对林业企业可采资源危机与经济危困局面,一些林业工作者都在纷纷献计献策。本文试图从非经济性方面提出解决这一问题的对策。一、培养吃山养山,惜木如金的思想  相似文献   

一例PPRV阳性羊鼻拭子样本N、P、M、F、H基因的序列测定和遗传进化分析     

赵文华  李富祥  尹伟  杨仕标 《现代畜牧兽医》2020,(12):8-13

  相似文献   

山羊痘和小反刍兽疫病毒双重实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立     

赵文华  杨仕标  高华峰 《动物医学进展》2013,34(10)

为实现对山羊痘病毒(GTPV)和小反刍兽疫病毒(PPRV)的同步快速检测,基于GTPV的ITR基因及PPRV的M基因,分别设计合成两套特异性引物及探针;探针分别用5'-FAM-TAMRA-3’及5'-JOE-Eclipse-3'标记物进行标记以实现同步检测.结果显示,所建立的ITR-M二联探针荧光定量RT-PCR方法可同时特异性检测GTPV和PPRV产生特异性荧光信号,而对禽痘病毒、犬瘟热病毒等相关病毒无荧光信号可检出.以GTPV-ITR和PPRV-M的pMD-18T载体质粒为标准品,构建了双重标准曲线,ITR M探针的检测敏感度可分别达103拷贝/μL及101.2拷贝/μL cDNA.本研究初步建立了可同步快速检测GT-PV和PPRV的二联实时荧光定量RT-PCR法.  相似文献   

未来国产农机的"热点"     

赵文华  黄宝坤 《农机使用与维修》2008,(2):101

当前,企业要占有更多的市场份额,就必须了解国内外的市场经营观念和用户需求现状,把用户的需求体现在产品的性能之中.  相似文献   

鹅副粘病毒F基因的克隆测序及核苷酸序列分析   总被引：18，自引：1，他引：17  

赵文华  朱建波  姚龙涛  宋建领  信爱国  何水林  张念祖 《中国兽医学报》2002,22(6):544-546

以鹅副粘病毒 (GPV) SF0 2株的基因组 RNA为模板 ,通过 RT- PCR的方法扩增出 F基因片段 ,然后将其克隆至 T载体中。经 PCR鉴定后 ,对阳性克隆进行测序。测序后拼接得出 F基因的全序列。与 Gen Bank下载的 9株参考毒株比较 F基因编码区全核苷酸序列 ,发现所测 GPV- SF0 2毒株与参考毒株 L Z- NDV核苷酸序列同源性为 96 %,与F48E9同源性为 92 .5 %,与 L a Sota为 88%。  相似文献   

云南省奶牛常见寄生虫病及其防制     

杨建发  信爱国  杨仕标  王金萍  赵文华  白文顺 《中国奶牛》2012,(7):34-37

云南省奶牛单产量较低,寄生虫病是导致奶牛单产低的主要原因之一。本文根据2008年以来云南省开展的奶牛寄生虫病调研结果,总结分析了几种常见和对奶牛危害严重的寄生虫病,并提出在监测的基础上实施驱虫,制定综合安全有效的防制措施。  相似文献