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制备抗促乳素(prolactin,PRL)的单克隆抗体。应用PRL纯品免疫BALB/c小鼠,被免疫小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA筛选阳性克隆,将阳性克隆多次有限稀释得到抗PRL阳性单克隆细胞株,杂交瘤细胞上清分离法和诱生腹水法制备单克隆抗体,测其效价。共建立5株持续分泌抗体的杂交瘤细胞,分别命名为AA5B1、AB6C8、BB3C1、CA6E4、CE2H6。杂交瘤细胞株冻存4个月后复苏培养,形态良好,生长旺盛。培养液上清及腹水效价的OD值略有升高,说明杂交瘤细胞株稳定。5株杂交瘤细胞染色体众数均为99～105,并可见到中部和亚中部着丝点的骨髓瘤细胞标志染色体,说明5株杂交瘤细胞确为SP2/0骨髓瘤细胞与被免疫小鼠的脾细胞融合而产生的。 相似文献
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为了进一步扩大良种波尔山羊的推广,提高胚胎移植效率,该文就饲养在不同牧场间的供体和受体实现鲜胚移植进行了系统研究,得到了以下结果:①洪体运输1h、2～3 h、＞4h、0h(对照)收集胚胎,分别得到可用胚胎数为15.8枚±4.3枚、13.0枚±5.7枚、13.8枚±6.6枚和14.2枚±6.3枚,不同运输时间回收可用胚胎数之间无显著性差异(P＞0.05).回收可用胚胎移植后,受体妊娠率分别为71.6％、67.6％、76.7％和80.7％,胚胎成羔率分别为74.1％、67.2％、69.9％和71.5％,供体不同运输时间回收胚胎移植妊娠率和胚胎成羔率无显著差异(P＞0.05).②胚胎在20℃,36.5℃和38.5℃运输2h后移植,受体妊娠率分别为42.0％、64.5％和66.7％,胚胎成羔率分别为41.7％、63.6％和66.7％.20℃运输胚胎受体妊娠率和胚胎成羔率显著低于36.5℃和38.5℃下运输胚胎(P＜0.01);胚胎在36.5℃分别运输0.5 h、1h、2h后移植,受体妊娠率分别为72.5 ％68.7％和64.9％,胚胎成羔率分别为69.1％、67.8％和63.0％,受体妊娠率和胚胎成羔率之间无显著性差异(P＞0.05).③受体在手术前2～4h通过卡车运输到另一畜牧场,运输时间分别为0.5 h、1h、≥2h,胚胎移植后受体妊娠率分别为61.2％、49.6％和42.0％.随着受体运输时间的延长,受体妊娠率呈下降趋势,运输时间超过2h的妊娠率显著低于运输0.5 h的妊娠率(P＜0.05).胚胎成羔率分别为60.9％、45.6％和32.0％,随着受体运输时间的延长,胚胎成羔率显著下降(P＜0.05或P＜0.01).从以上研究得出以下结论:山羊供体和受体饲养在不同饲养场,欲进行鲜胚移植,选择供体运输是最好的方法,其次为胚胎运输后移植.受体运输对胚胎移植效果(即受体妊娠率及胚胎成羔率)均有不利影响,不宜在生产中采用. 相似文献
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猪胎儿神经干细胞的分离培养和分化 总被引：1，自引：0，他引：1
本研究旨在从猪胎儿脑组织中分离培养神经干细胞,观察神经干细胞生长特性和体外增殖、分化特点.利用神经干细胞培养体系,从胎龄30 d的猪胎儿脑组织中分离培养神经干细胞并诱导神经干细胞贴壁分化,采用RT-PCR技术检测干细胞和分化细胞表面标志或相关基因.结果成功分离培养出神经干细胞,神经干细胞具有分化潜能.神经干细胞中Nestin表达强阳性,β-actin、DCX、Hesl、Oct4、Desmin、CD-90、Nanog和Sox2表达阳性;体外诱导的神经干细胞可以分化为星形胶质细胞(表达GFAP)、少突胶质细胞(表达GalC)和神经元细胞(表达NF、NSE和MAP2).结果提示,从猪胎儿脑组织分离神经干细胞具有可行性和有效性,神经干细胞具有自我更新、增殖和分化潜能. 相似文献
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小鼠输卵管上皮细胞的原代培养及纯化方法研究 总被引：2，自引：0，他引：2
建立小鼠输卵管上皮细胞原代培养及纯化方法.小鼠输卵管上皮细胞原代培养采用组织块培养法和酶消化法.酶消化法于37℃分为4个处理组进行.处理1以2.5 g/L胰酶+0.4 g/L EDTA消化5、10、20 min;处理2以0.5 g/L胰酶+0.08 g/L EDTA消化35、50、75 min;处理3以0.3 g/L的Ⅰ型胶原酶消化60、90、240 min;处理4以2.5 g/L胰酶+0.4 g/L EDTA和0.3 g/L Ⅰ型胶原酶(1∶2)消化60 min,150 min.原代细胞纯化采用差速贴壁和反复差速贴壁法.传代采用胰酶两步消化法进一步纯化输卵管上皮细胞.组织块法原代培养成纤维细胞生长优势明显,传代纯化细胞效果不佳.用酶消化法原代培养时,处理1效果不理想;处理2采用3个消化时间时均取得比较理想的结果;处理3消化240 min时结果较好;处理4消化150 min效果较好.原代细胞纯化,反复差速贴壁得到的上皮细胞较纯,进一步传代纯化细胞取得了理想的结果.小鼠输卵管上皮细胞原代培养采用酶消化法结合反复差速贴壁分离纯化细胞,传代采用两步消化法,可以成功地进行小鼠输卵管上皮细胞的分离纯化培养. 相似文献
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实用型炔诺酮阴道栓诱导陕南白山羊同期发情 总被引：1，自引：0，他引：1
在 5 ,8 ,1 0三个不同月份 ,用含 1 8-甲基 -炔诺酮 5 0 mg的实用型阴道海绵栓处理 6 31只陕南白山羊进行同期发情 ,撤栓时注射 FSH,阴道栓处理时间分为短期处理(9,1 0 ,1 1 ,1 2 d)和长期处理 (1 5 ,1 6 ,1 7d)。结果表明 ,短期和长期处理之间 ,以及不同月份之间 ,受试羊发情开始距撤栓的平均间隔时间和同期发情有效率差异不显著 (P>0 .0 5 )。结论认为 ,用实用型炔诺酮阴道栓进行陕南白山羊同期发情处理时 ,可选用短期处理法 ;只要避开高热及严寒 ,其它季节均可进行同期发情处理。 相似文献
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1.比较了在卵母细胞成熟液中添加相同浓度(10ng/ml)的表皮生长因子(EGF),胰岛素样生长因子(IGF),EGF IGF后,不同生长因子对卵母细胞体外发育率的影响。结果表明,在成熟培养液中添加EGF后,其卵母细胞的成熟率(70.9%)与对照组(67.3%)相比有所提高,但差异不显著;在成熟培养液中分别添加IGF、EGF IGF,其卵母细胞的成熟率分别为80.0%,82.4%,显著高于对照组卵母细胞的成熟率(67.3%)。2.比较了不同季节采集的卵母细胞在体外成熟的情况。结果发现,12月份到来年的1月份,采集的卵母细胞,其体外成熟率最高,为81.0%;11月份采集的卵母细胞,其体外成熟率次之,为74.1%;3—5月份和9—10月份采集的卵母细胞,其体外成熟率为66.0%、69.6%;6—7月初采集的卵母细胞,其体外成熟率最差,为54.7%。3.比较了OM液pH值对卵母细胞体外成熟的影响。当OM培养液的pH值为7.2和6.8￣7.0时,卵母细胞成熟率的为66.2%和61.0%,显著高于pH≥7.5时的成熟率(50.9%,P<0.05)。 相似文献
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以小尾寒羊、同羊、内蒙细毛羊作受体,根据季节设计不同的同期发情处理方法,繁殖季节设计三个组,(Ⅰ)栓 PG组,(Ⅱ)栓组,(Ⅲ)PG组。非繁殖季节设计四个组(Ⅰ)栓 PG组,(Ⅱ)栓 PMSG组,(Ⅲ)栓组,(Ⅳ)PG PMSG组。结果表明:(1)在繁殖季节,同一处理品种间同期发情率及受体利用率之间差异不显著。但非繁殖季节,同羊和内蒙细毛羊同期发情率和受体利用率很低。选用小尾寒羊作受体比较理想。(2)单独使用阴道海绵栓或与其它激素配合诱导母羊发情效果优于用PG组或PG PMSG组,在非繁殖季节使用孕激素诱导母羊发情可以得到比较高的同期发情率。(3)季节对受体羊同期发情效果和受体利用率有明显影响。特别是对发情季节表现明显的品种。(4)繁殖季节和非繁殖季节母羊撤栓后集中发情时间大约相差12h。 相似文献
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采用国内不同厂家生产的促卵泡刺激素(FSH)和加拿大进口的FSH,进行了无角道塞特母羊超排 处理,对不同给药方式、首次超排与重复超排、经产羊与青年羊、春季超排与秋季超排、自然发情与诱导发情及未知 发情周期的超排效果进行了对比研究,同时研究了母羊卵巢黄体退化、有无卵泡及推迟发情对超排效果的影响。结 果表明,加拿大进口FSH的超排效果最好,国产FSH以宁波+中科院激素组合的超排效果较好;重复超排对超排 效果无显著影响;经产羊的超排效果优于青年羊;自然发情母羊的超排效果优于诱导发情母羊和未知发情周期母 羊;黄体退化母羊回收可用胚的数量明显较低;卵巢上有无卵泡对超排效果无影响;推迟发情母羊的超排效果明显 低于正常发情母羊。 相似文献