梅花鹿鹿茸软骨细胞的培养及X型胶原的克隆和序列分析   总被引：6，自引：0，他引：6  

冯海华  邓旭明  岳占碰  宋宇  李乾学  韩学敏  范君文  姜峰 《中国农学通报》2006,22(11):22-22

X型胶原是肥大软骨细胞的标志物，据GenBank 中收录的人、鼠、牛、猪X型胶原基因的序列，进行同源性分析，在同源性高的相对保守区域设计了1对特异性引物。建立梅花鹿鹿茸软骨细胞的分离培养方法，培养鹿茸软骨细胞。提取细胞的总RNA，以总RNA为模板，用RT-PCR方法克隆了梅花鹿的X型胶原基因序列为877的片段，此片段全部位于编码区，与已报道的牛的X型胶原基因的序列比较，同源性达到96%。共有35个碱基发生变异。DNAStar 软件分析表明，二者推导的氨基酸序列同源性为95.5%。  相似文献   

不同培养代数鹿茸生长中心细胞对IGF1刺激 的反应     

梅妹  邓旭明  岳占碰  赵丽红  李春义  冯海华 《勤云标准版测试》2008,(4)

【研究目的】探讨胰岛素样生长因子（IGF1）对生长60d的梅花鹿鹿茸体外培养不同代数鹿茸生长中心细胞的影响。【方法】分离、培养生长60d的梅花鹿鹿茸生长中心细胞,将培养第2代、5代、8代细胞经含有不同浓度的IGF1（0,1,3和10nM）作用,在培养24h后用3H-胸腺嘧啶核苷掺入测定法检测每分钟衰变数（DPM）值。【结果】全部IGF1处理组都显著高于对照组（p〈0.01）。不同浓度IGFⅠ处理组的平均值和最高值都是离体培养2代的细胞的DPM最高（分别为31918和39818DPM/mg蛋白）,培养5代的细胞（分别为5455和6815DPM/mg蛋白）已大大地下降;到了第8代的（分别为4030和4838DPM/mg蛋白）又有进一步的下降。【结论】IGF1能够促进鹿茸生长中心细胞分裂增殖,生长60d鹿茸的生长中心细胞在离体培养,不同培养时期的鹿茸生长中心细胞对IGFⅠ刺激的敏感度不同。  相似文献   

吉林省动物病原性大肠杆菌的耐药性监测试验   总被引：5，自引：1，他引：5  

马红霞  邓旭明  李乾学  于守平  阎继业 《吉林农业大学学报》2001,23(4):85-88,96

从吉林省5个地区分离出动物病原性大肠杆菌132株，采用药敏纸片法对22种抗生素进行了耐药性监测试验。结果表明；受检菌株全部对1种或多种抗生素耐药，无一全部敏感株。对13－15种抗生素耐药的菌株数较多。其中对氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、氯霉素、庆大霉素、卡那霉素、呋喃妥因同时耐药的菌株已达半数。采用平皿二倍稀释法测定随机挑选的40株大肠杆菌对6种抗生素最低抑菌浓度的结果为耐药水平很高。因而，采取有效的方法抑制大肠杆菌对多种抗生素的耐药已是当务之急。  相似文献   

侧柏叶颗粒剂对产气荚膜梭菌Ⅳ型菌毛系统功能的抑制作用及其机制     

吴玉臣  朱先鹏  李有志  侯云峰  聂婧  尚小雷  邓旭明  高丰  吕强华 《中国兽医学报》2023,(10):2056-2061

为研究侧柏叶颗粒剂(Platycladi cacumen granules, PCG)对产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,C.perfringens)Ⅳ型菌毛系统(typeⅣpili, TFP)功能的抑制作用及其机制，首先，在体外进行滑动运动和生物被膜测定2种表型试验，验证PCG对TFP功能的抑制作用；随后，通过细胞黏附试验测定PCG对产气荚膜梭菌黏附至人克隆结肠腺癌细胞(Caco-2)的影响；最后，通过qRT-PCR测定PCG对TFP基因转录的影响，并结合透射电镜(TEM)观察PCG对TFP形态的影响。结果显示，PCG在质量浓度为1.3 g/L时，显著抑制产气荚膜梭菌的滑动运动和生物被膜形成；显著抑制产气荚膜梭菌黏附至Caco-2细胞，在有效浓度范围内对Caco-2细胞无明显检测毒性；qRT-PCR和TEM结果表明，PCG通过降低产气荚膜梭菌的TFP相关基因virR、virS、pilA、pilD、pilT、pilC和pilM的转录水平，破坏TFP菌毛形态，抑制TFP介导的功能。  相似文献