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91.
鼠防御素基因Crp4在大肠杆菌中的表达及活性检测 总被引:1,自引:0,他引:1
通过基因工程技术,以鼠防御素基因Crp4为研究对象,从鼠回肠末端克隆了鼠防御素Crp4基因的成熟编码序列(约为102 bp),将其与另外2个鼠防御素基因的氨基酸序列进行比对,发现同源性分别高达97.8%和97.1%。将该序列克隆到原核表达载体pET-28a中,构建了重组质粒pET-Crp4,转化DE3感受态并用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE和Wersiernblot结果表明,该基因在pET-28a中成功表达。体外抑菌试验证实,重组Crp4蛋白对金黄色葡萄球菌、李斯特菌、大肠杆菌等具有一定的抑菌活性。 相似文献
92.
贵州南五味子多糖对鸡细胞免疫和体液免疫的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
选用600只15日龄海兰褐雏鸡,随机分为5个处理,每个处理3个重复,每个重复40只鸡,皮下注射贵州南五味子多糖10、20mg/kg、黄芪多糖20mg/kg、环磷酰胺40mg/kg及生理盐水。空白对照组,连续给药3d后免疫新城疫疫苗,分别于免疫后7、14、21、28和35d时,各处理组随机抽取8只鸡检测各项免疫指标,探讨不同处理组对雏鸡免疫功能的影响。本试验结果表明,皮下注射10~20mg/kg贵州南五味子多糖可显著促进鸡外周血T淋巴细胞增殖,IL-2的产生(P<0.01);可使CD4+/CD8+淋巴细胞比值明显升高(P<0.01);可使鸡体内抗ND抗体滴度明显升高(P<0.01);可使法氏囊、胸腺的脏器指数均明显升高(P<0.01)。 相似文献
94.
为了测定胡椒碱对金黄色葡萄球菌USA300α溶血素(α-Hemolysin, Hla)溶血活性的抑制作用并初步阐明其机制,为胡椒碱治疗金黄色葡萄球菌感染提供依据,试验选择Hla为靶标,通过溶血活性试验测定不同浓度胡椒碱对金黄色葡萄球菌USA300共培养物上清液溶血活性的影响,通过最低抑菌浓度(MIC)试验及生长曲线试验考察胡椒碱对金黄色葡萄球菌生长的影响,通过免疫印迹分析试验初步阐明胡椒碱抑制金黄色葡萄球菌USA300溶血活性的机制,通过乳酸脱氢酶(LDH)试验考察胡椒碱对共培养物上清液介导的细胞损伤的抑制作用。结果表明:胡椒碱可显著降低金黄色葡萄球菌Hla的表达,抑制金黄色葡萄球菌USA300培养物上清液的溶血活性,不同浓度胡椒碱均不影响金黄色葡萄球菌USA300生长,且可保护A549细胞免于培养物上清液介导的细胞损伤。说明胡椒碱能够通过抑制Hla的表达而缓解培养物上清液介导的A549细胞损伤,可用于治疗金黄色葡萄球菌感染。 相似文献
95.
为了解菊苣酸对蓖麻毒素活性的抑制作用,通过硫酸铵沉淀法和亲和层析技术,纯化得到活性良好、蛋白纯度较高的蓖麻毒素活性蛋白。将菊苣酸与蓖麻毒素共孵育,通过LDH检测发现,菊苣酸可以显著抑制蓖麻毒素活性,在药物质量浓度为64 mg·L~(-1)时,LDH释放率为38%。通过动物实验,发现菊苣酸能够降低蓖麻毒素中毒引起的小鼠死亡,死亡率为50%。研究结果表明,菊苣酸通过抑制蓖麻毒素活性,降低细胞LDH释放率,降低小鼠死亡率。表明菊苣酸是一种治疗蓖麻毒素中毒的潜在天然化合物。 相似文献
96.
选取传统中药提取单体化合物α-倒捻子素和8-甲氧基补骨脂素,通过2种药物敏感性实验方法MABA(Microdilution Alamar Blue Assay)分析与试管法分别测定了两种化合物对结核分枝杆菌H37Rv(ATCC27294)和H37Ra(ATCC25177)的体外抗菌活性,同时还测定了9种阳性抗结核药物对这两种结核菌的最低抑菌浓度(MIC),比较2种方法的检测结果。结果表明:α-倒捻子素对结核分枝杆菌H37Rv(ATCC27294)和H37Ra(ATCC25177)的最低抑菌浓度均为6.25μg/mL,而8-甲氧基补骨脂素对结核分枝杆菌H37Rv(ATCC27294)和H37Ra(ATCC25177)的最低抑菌浓度均为128μg/mL。Alamar B1ue法与试管法相比较,完全符合率是90%(9/11),具有较好的一致性。本研究结果表明Mamar B1ue法是一种快速、简便测定药物对结核分枝杆菌MIC的方法。本研究为α-倒捻子素和8-甲氧基补骨脂素的进一步开发利用和抗分枝杆菌机制研究打下了基础。 相似文献
97.
为了考察异土木香内酯对金黄色葡萄球菌的抗菌活性,并研究其对金葡菌α-溶血素表达的影响。应用肉汤微量稀释法测定异土木香内酯对金葡菌标准株的最低抑菌浓度,采用溶血试验、Western-blot分析和荧光定量PCR分析测定异土木香内酯对金葡菌α-溶血素表达的影响。结果表明,异土木香内酯在2, 048 μg/ml仍然不能抑制金葡菌的生长,然而低浓度(1-8 μg/ml)的异土木香内酯能够剂量依赖性地降低金葡菌α-溶血素的表达。该研究提示异土木香内酯可作为以毒力因子为靶标的抗感染药物开发的先导结构。 相似文献
98.
苦味西葫芦粗提物抗炎作用的实验研究 总被引:3,自引:0,他引:3
研究苦味西葫芦粗提物的抗炎作用。采用醋酸诱导小鼠腹腔毛细血管通透性增加、角叉菜胶诱导大鼠足跖肿胀及棉球诱导大鼠肉芽肿模型研究苦味西葫芦粗提物的抗炎作用。ip苦味西葫芦粗提物(小鼠4 g/kg,大鼠2.8 g/kg)可显著抑制小鼠腹腔毛细血管通透性增强及大鼠棉球肉芽肿(P<0.05)、ip苦味西葫芦粗提物(大鼠1.4 g/kg及2.8 g/kg)均能显著抑制角叉菜胶诱导大鼠足跖肿胀(P<0.05)。苦味西葫芦粗提物具有抗急、慢性炎症作用。 相似文献
99.
根据巴氏杆菌链霉素耐药基因 Str A序列 ,设计合成 1对引物 ,以临床分离的禽源巴氏杆菌链霉素耐药菌株质粒DNA为模板 ,通过 PCR技术 ,扩增出禽源巴氏杆菌的 Str A基因片段。将长约 80 4 bp的 Str A目的基因克隆到 p GEM-T载体上 ,通过核苷酸序列测定 ,结果表明 ,克隆的 Str A基因长约 80 4 bp,与文献报道 (NC- 0 0 1774 )的同源性为99.8% ,只有 1个碱基不同 (6 9位 T→ C) ,但所编码的氨基酸没有改变。将 Str A基因按正确的阅读框架定向克隆到原核表达载体 p ET- 2 8c( )中 ,重组质粒酶切鉴定正确后 ,将构建好的原核表达质粒 p ET- 2 8c( ) - Str A转化到受体菌BL- 2 1(DE3)中 ,经 IPTG诱导后 ,进行 SDS- PAGE电泳 ,经检测 ,Str A外源基因的表达产物占菌体总蛋白的 12 %。蛋白表达形式为包涵体表达 相似文献
100.