抗凋亡融合蛋白PTD-Bcl-xL原核表达载体的构建及表达纯化     

王晓晔  石博妹  王英群  李珣  刘徳玉  李铭  李芳芳  胡传活 《华北农学报》2016,(1):1-7

人工抗凋亡蛋白PTD-Bcl-x L能保护多种因素引起的细胞异常凋亡,为了获得高纯度Bcl-x L与PTD(Protein transduction domains)的融合蛋白,首先采用TRIzol法提取SD大鼠肝脏总RNA,将RNA反转录为c DNA,设计引物以c DNA为模板,PCR扩增Bcl-x L基因,构建p UM19-T-Bcl-x L质粒,并对质粒双酶切鉴定和测序鉴定;其次设计包含PTD序列的Bcl-x L引物,以测序正确的p UM19-T-Bcl-x L质粒为模板,PCR扩增PTD-Bcl-x L序列,将扩增序列克隆入p ET28a载体,构建PTD-Bcl-x L蛋白的原核表达质粒p ET28a-PTD-Bcl-x L,并对p ET28a-PTD-Bcl-x L载体双酶切鉴定和测序鉴定;将p ET28a-PTD-Bcl-x L重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,并对IPTG诱导融合蛋白表达的浓度和诱导时间进行了优化;SDS-PAGE分析表达蛋白的可溶性情况,在变性条件下用Ni-NTA琼脂纯化融合蛋白;最后用SDS-PAGE、Western Blot及质谱对融合蛋白进行鉴定。结果表明:双酶切p UM19-T-Bcl-x L质粒出现约774 bp大小条带,p UM19-T-Bcl-x L质粒测序结果与NCBI数据库比对序列一致,表明成功构建p UM19-T-Bcl-x L质粒;双酶切p ET28a-PTD-Bcl-x L质粒出现约744 bp大小条带,p ET28a-PTD-Bcl-x L质粒测序结果与预期序列一致,表明成功构建了p ET28a-PTD-Bcl-x L原核表达载体;在IPTG诱导下p ET28a-Bcl-x L重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出36 k Da大小蛋白,最优IPTG诱导浓度为0.1 mmol/L,最佳IPTG诱导时间为6 h;SDS-PAGE电泳显示融合蛋白主要出现在菌液超声后的沉淀里,以包涵体形式表达,经Ni-NTA琼脂纯化获得了高纯度的融合蛋白;Western Blot和质谱鉴定证明IPTG诱导表达蛋白和纯化的融合蛋白为PTD-Bcl-x L蛋白。纯化得到了PTD-Bc L-x L融合蛋白,推进了PTD-Bcl-x L蛋白在猪、牛等家畜精液冷冻保存的应用进程。  相似文献   

新会柑普茶的活性成分及其保健功效的研究进展     

黄维  胡秀  廖金梅  黎攀  陈玉春  刘少群  孙彬妹  郑鹏 《茶业通报》2021,43(4)

  相似文献   

中山市坦洲镇特色水果生产现状与发展对策   总被引：1，自引：1，他引：0  

张金妹  梁容森  李扇妹 《现代农业科技》2013,(17):147-149

阐述了中山市坦洲镇特色水果的生产现状,概述了该镇主要水果种类发展情况,并提出了发展对策,以期促进该镇水果产业的长足发展。  相似文献   

日粮中添加富利宝和谷氨酸对猪肥育与屠宰性能及肉品质的影响          下载免费PDF全文

杨翠  罗鲜青  黄丽霞  何仁春  周俊华  梁琪妹  李绍波  周志扬  王启芝  杨家晃 《家畜生态学报》2016,37(2):28-33

研究旨在探讨日粮添加富利宝和谷氨酸对大约克×长白二元杂种猪肥育与屠宰性能及肉品质的影响。选取体重约51kg的"大×长"二元杂12头,随机分2组,每组设3个重复,每个重复2头,对照组喂常规(对照)日粮,试验组日粮是在对照日粮的基础上添加0.1%富利宝和0.6%L-谷氨酸。试验期共62d,试验结束后,从每个重复中选取1头体重相似的试验猪进行屠宰和肉品测定。结果表明:两组试验猪的肥育性能无显著差异(P0.05);但试验组猪背膘厚显著高于对照组(P0.05),相反,对照组眼肌面积、肉色和系水力显著高于试验组(P0.05);试验组猪眼肌的谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、苏氨酸、脯氨酸、缬氨酸和精氨酸含量显著高于对照组(P0.05),其总氨基酸和总鲜味氨基酸含量也分别较对照组提高了5.85%(P0.05)和6.87%(P0.05);此外,眼肌的肌内脂肪也由对照组的5.11±0.24%提高到8.86±0.52%(P0.05)。由此可见:日粮添加富利宝和谷氨酸虽然未能提高"大×长"二元杂种猪的肥育和屠宰性能,但可显著提高肌肉总氨基酸、总鲜味氨基酸和肌内脂肪的含量,从而改善其肉质。  相似文献   

水稻作物化肥减施增效技术评价指标体系构建     

尼雪妹  罗良国  李宁辉  王娜娜  潘亚茹  杨森 《农业环境与发展》2018,(4)

为解决我国水稻作物化肥减施增效技术评价指标体系建立滞后的问题,在深刻理解水稻作物化肥减施增效技术应用终极目标,遵循科学性与实用性、完整性与简明性、系统性与层次性、动态性与稳定性、可行性与可比性和现实性与导向性原则之上,采用文献综述与专家咨询方法构建针对水稻作物评价指标体系,并运用专家组合多重相关法进行主观赋权研究。系统构建了水稻作物化肥减施增效技术综合评价指标体系,其中包括5个一级指标、17个二级指标和43个三级指标,并基于专家组合的多重相关主观赋权方法分别对3个层次指标进行赋权,确立了每个指标的主观权重。本指标体系的构建可以推动水稻作物化肥减施增效技术的研发更具目标性和指向性;基于专家组合多重相关法的应用集中了专家的整体意见,克服了传统主观赋权法存在个别专家差异性引起偏差的弊端,可为科学开展各作物化肥减施增效技术综合评价提供借鉴参考。  相似文献   

茄子GA响应因子SmGAI的克隆与分析     

杜黎明  包崇来  胡天华  朱琴妹  胡海娇  毛伟海 《中国蔬菜》2009,1(16):26-30

采用RT-PCR和RACE技术从茄子地方品种杭州红茄中扩增克隆了GA响应因子相关基因片段,命名为SmGAI,其cDNA序列为1 176 bp,含有972 bp的阅读框,编码323个氨基酸;基因编码的氨基酸序列与番茄单性结实调控基因SlDELLA同源性为76.8 %,高度相似。  相似文献   

杂交水稻甬优17特性及高产栽培技术     

雷柏妹 《种子科技》2017,(8)

甬优17是浙江省宁波市科学研究所、宁波市种子有限公司用自选甬粳4A与甬恢12配组育成的三系籼粳杂交稻品种,在福建省周宁县做中稻种植,表现为株叶形态好、株型适中、群体整齐、穗粒数多、后期转色好、高产、稳产、米质较优、适应性广、抗逆性强等特点。总结了其山区高产栽培技术。  相似文献   

盐旱胁迫下侧柏幼苗的生理响应及水杨酸的调控作用   总被引：1，自引：0，他引：1  

偶春  胡欣  姚侠妹  徐莹莹  王伟  王群群 《干旱区资源与环境》2019,33(8):186-193

以侧柏(Platycladus orientalis)幼苗为材料,采用根灌外施水杨酸的方式,探讨盐(200mM NaCl)旱(15%PEG6000)胁迫下侧柏幼苗的生长、叶绿素、活性氧代谢和渗透调节物质含量的响应变化以及水杨酸(0.5mM SA)对其的调控。结果显示:NaCl、PEG6000和NaCl+PEG6000三种胁迫处理抑制了侧柏幼苗的生长、叶绿素、抗氧化物酶(SOD和POD)活性和谷胱甘肽(GSH)含量,过氧化氢(H_2O_2)、丙二醛(MDA)、脯氨酸和可溶性糖含量显著增加,可溶性蛋白则降低,且均表现为复合胁迫介于单一胁迫之间,除GSH外,影响程度均为NaCl>NaCl+PEG>PEG;外施低浓度0.5mM水杨酸可提高侧柏幼苗的生长、叶绿素含量、抗氧化酶活性和GSH含量、渗透调节物质含量,并降低了H_2O_2和MDA积累。研究发现,盐旱复合胁迫对侧柏幼苗生理特性的影响并不是单一胁迫的简单叠加,与单一干旱胁迫相比,盐旱复合胁迫在一定程度上能够缓解干旱胁迫对侧柏幼苗生长的影响;一定浓度水杨酸同样能够有效缓解盐旱单一或复合胁迫对侧柏幼苗造成的生理伤害,提高其抗性。  相似文献   

广州市畜牧业废水排放与治理现状分析   总被引：16，自引：0，他引：16  

郑武  谢晓丽  陈仁忠  黎珠妹  潘东花  胡殿安  何述尧 《农业环境与发展》1998,15(2):17-20

通过对广州市畜牧业废水排放总量、污染物排放强度、污染负荷和废水治理现状进行分析与评价,提出了防治畜牧业废水污染的对策和建议。  相似文献   

非淀粉多糖酶饲喂广西三黄鸡效果研究     

卢丽枝  梁琪妹  黄丽霞  夏中生  罗鲜青  周俊华  何仁春 《中国饲料》2022,1(21):72-78

选取180羽35日龄健康的广西三黄鸡作为研究对象,随机分为A、B、C 3个组,每组6个重复,每个重复10羽鸡,公母各半。A组饲喂玉米-稻谷-豆粕-棕榈粕型基础饲粮为对照组,B组加0.01%木聚糖酶,C组在基础饲粮中添加0.01%木聚糖酶和0.01%β-甘露聚糖酶。试验期间对各试验组鸡生产性能、养分利用率及盲肠微生物等进行分析与测定。结果表明：（1）基础饲粮中添加木聚糖酶或复合酶可以有效降低广西三黄鸡料重比,分别降低5.08%、5.35%(P <0.05);提高广西三黄鸡的日均增重,分别提高4.70%、8.66%(P> 0.05)。（2）基础饲粮中添加木聚糖酶或复合酶对饲粮粗蛋白质、粗灰分、钙、磷、粗纤维、无氮浸出物等表观消化率没有显著性影响（P> 0.05）,但可以显著提高三黄鸡对饲粮的能量利用率和干物质消化率（P <0.05）。（3）基础饲粮中添加木聚糖酶或复合酶对广西三黄鸡屠宰性能及消化道食糜黏度无显著性影响（P> 0.05）,但有降低食糜黏度的趋势。（4）基础饲粮中添加木聚糖酶和复合酶对广西三黄鸡谷丙转氨酶、白蛋白、总蛋白、尿素氮、葡萄糖、总胆固醇、...  相似文献