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以伴刀豆蛋白 A(Con A)活化的牛外周血单个核细胞(PBM)作应答细胞,对四甲基偶氮唑盐(MTT)比色分析法检测牛白细胞介素-2(IL-2)的各项参数作了系统探讨,首次建立了检测牛 IL-2的 MTT 比色分析法。结果表明,活化应答细胞时的细胞密度以2.5~5×10~6个/ml、Con A 浓度以12.5μg/ml、活化时间以48~72小时为宜;MTT 比色分析的最适条件为:应答细胞密度1~2×10~5个/孔,α-甲基-D-甘露糖苷(α-mM)终浓度为12.5mg/ml,样品与应答细胞作用时间为36~48小时,MTT 用量为50μg/孔,MTT 作用时间为2.5小时,结果证明,本方法可检出少至390个活应答细胞、0.03个单位(U)的重组人 IL-2(rhIL-2)和2~(-5)稀释的含牛 IL-2培养上清.本方法避免了传统~3H-胸腺嘧啶核苷(TdR)掺入法的诸多不便,是一种方便、敏感、可靠和安全的牛IL-2检测法. 相似文献
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用白细胞介素-2(IL-2)体外诱导培养小鼠脾细胞制得的淋巴因子活化的杀伤(LAK)细胞对SP2/0、NS-1骨髓瘤细胞、P815肥大细胞瘤细胞及BW5147胸腺瘤细胞都具有杀伤作用,其杀伤率分别为35%、40%、45%和32%。证明IL-2可通过诱导LAK细胞而发挥抗肿瘤作用。IL-2和M5-y_(90)布鲁氏菌疫苗联合免疫鼠与疫苗单独免疫鼠相比,前者的抗布鲁氏菌抗体效价比后者高58~128%;前者的白细胞总数显著高于后者(31~83%);前者的细胞在淋巴细胞中的比例也比后者高10%。证明IL-2是一种潜在的免疫佐剂。 相似文献
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素质教育是一种理念 ,也是一种实践 ,而且在本质上是实践的。它在现代化建设的实践中产生 ,指导教育改革实践又接受实践的检验 ,在实践中发展。因此 ,对学校来说 ,应从实践的高度确立素质教育的基本架构 ,从实践方面探索素质教育和人才培养的途径 ,用实践标准检验素质教育的效果。 相似文献
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电网的潮流计算是分析电网性能的重要手段,用手算法对辐射形电网进行潮流计算对于众多不太复杂的高、中、低电网都具有现实意义。 相似文献
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2 (SARS-CoV-2) S蛋白与宿主表面受体ACE2结合后,S蛋白中的Furin裂解位点RRAR被宿主细胞内的弗林蛋白酶(Furin)识别,并将S蛋白切割为S1/S2亚基。为研究Furin对SARS-CoV-2S蛋白的切割活性、对病毒的感染性及其形成细胞-细胞膜融合(合胞体)的影响,本研究采用套式PCR分别扩增S蛋白Furin裂解位点突变(将裂解位点由RRAR分别突变为RRRR、SRAS和AAAA)的编码基因片段,并分别克隆至pCAGGS载体中,构建重组质粒pRRRR-Flag、 pSRAS-Flag、 pAAAA-Flag,均经酶切和测序鉴定正确后构建pEGFP-RRRR、pEGFP-SRAS、pEGFP-AAAA质粒并经测序鉴定。采用慢病毒包装系统包装慢病毒后感染Huh7细胞,48 h后采用杀稻瘟菌素筛选共表达ACE2和TMPRSS2的Huh7细胞系Huh7-A+T;利用CRISPR-Cas9方法构建Furin敲除(Furin-KO)细胞系,并均经western blot鉴定。结果显示,上述两种细胞均正确构建。将与Flag融合表达的RRAR、 RRR... 相似文献