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猪肺炎支原体是引起猪地方性喘气病的病原。人们预测猪肺炎支原体p102基因是猪肺炎支原体潜在的黏附因子。在p102基因中有七个密码子TGA,在猪支原体中编码色氨酸,而在原核和真核细胞中TGA为终止密码子。因此,为了将p102基因在原核与真核系统中表达,需将TGA突变成TGG。从猪肺炎支原体Yin-1株扩增p102基因(全长2700bp),将其分为A(1bp-936bp)、B(937bp-1665bp)、C(1666bp-2700bp)-S-段分别克隆进pMD-18T载体上,通过定点PCR方法把A段四个和C两段三个编码Trp的密码子TGA突变为TGG,每突变成功一个密码子后都要连接到pMD-18T载体上送测序。最后将突变成功三段基因按A+B+C的顺序相连亚克隆到pMD-18T载体上,得到质粒pMD-18T—P102。测序结果用MegAlign软件与国际标准菌株232进行比较,P102基因中七个TGA已经成功突变成TGG。P102基因定点突变的成功为其在原核和真核系统中的表达奠定了良好的基础,亦对猪肺炎支原体疫苗研制具有重要意义。 相似文献
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随着我国城市园林艺术的不断发展推广,园林铺装工程项目也逐渐增多,而工程中的园林施工技术则一直为人们所关注,因为施工技术的好坏不但关系着园林的整体施工效果,还关系着园林植被生态系统的稳定,对后期的园林美观产生重要影响。因此,在园林工程施工中,对于铺装工程技术的合理规划设计,整体布置都能够充分反映园林风格,并能够代表一个城镇的绿化水平。在现代园林铺装工程施工中,技术手段多种多样,所构筑成的园林铺装形式也不尽相同。本文则从园林工程出发,简单探讨园林的铺装工程技术,以供参考。 相似文献
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高端服务业是综合科学、信息和技术为一体的服务业。近几年,大庆市坚持生产服务业和生活服务业共同发展,高端服务业增加值达到每年增长15%的水平。在对大庆市高端服务业进行调研的基础上,对其发展现状进行整体及分行业分析,并根据分析结果提出大庆市高端服务业未来发展的合理化建议。 相似文献
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为筛选抗褐变、适宜鲜切的苹果品种,以辽宁省果树科学研究所选育的7个中晚熟苹果品种(岳阳红、岳帅、望山红、秋富红、岳华、岳冠、岳苹)为试材,研究鲜切后冷藏期间果实品质、褐变指标及相关酶活性变化。结果表明,鲜切苹果的适宜冷藏期最长为12 d。各品种鲜切后冷藏期间失重率在3.80%~5.24%。除岳帅可溶性固形物(TSS)含量降低外,其余品种TSS含量均升高,升幅在13.3%~21.3%。可滴定酸(TA)含量总体上不断降低,岳冠TA含量降幅最小,为18.8%,岳帅降幅最大,为71.8%。冷藏结束时,岳苹褐变强度最大,为15.1%,岳冠最小,为8.87%。各品种冷藏期间总酚、类黄酮含量增加、过氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性不断升高,多酚氧化酶(PPO)活性呈单峰变化。果肉褐变强度与类黄酮含量和失重率极显著正相关,与总酚含量和PPO活性显著正相关,与TA含量极显著负相关。说明PPO是影响参试品种果实鲜切褐变的主导酶。岳帅、岳冠抗褐变能力强,适合鲜切及加工;岳华和岳阳红虽然冷藏期间果肉褐变强度增幅不大,但果肉底色深,冷藏后果肉颜色相对较深;秋富红、望山红、岳苹鲜切后冷藏期间褐变严重,不适合鲜切和加工。 相似文献
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猪肺炎支原体P52蛋白的原核表达及抗血清制备 总被引:1,自引:0,他引:1
为表达猪肺炎支原体(Mhp)P52蛋白及制备其血清,本实验利用PCR从Mhp J株扩增P52基因,克隆到表达载体pET-30a中,获得重组质粒pET-P52,经IPTG诱导,通过SDS-PAGE和western blot检测重组蛋白表达及其免疫学活性.以该重组蛋白为抗原免疫兔制备抗血清,采用间接ELISA检测抗血清效价,并利用抗血清通过间接免疫荧光检测P52基因在AD-293细胞中的表达情况.结果表明,PCR扩增目的基因为1 202 bp,SDS-PAGE检测重组蛋白大小约52 ku,其表达量占菌体总蛋白的28%.Western blot检测表明,目的蛋白能与Mhp阳性血清发生特异性反应,具有良好的免疫活性.间接免疫荧光检测到P52基因在AD-293细胞中表达.本研究为构建P52蛋白腺病毒载体疫苗奠定了基础. 相似文献
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现代高效农业的显著特点之一就是种子系列化、产业化、规范化和工程化.种子系列化,就是要求种子科研育种单位在一定的时间内选育出不同熟期和不同类型高科技含量的高产、优质、抗病、抗逆性强的系列品种,满足农业生产的需要;种子产业化,就是以科技为基础,以市场为导向,以效益为中心,建立作物种子区域化布局和专业化规模生产、加工、销售一体化体系;种子规范化,就是种子生产过程每个环节都要在种子管理部门行政管理参与下进行,包括种子管理部门的监督检查;种子工程化,就是在精量播种、田间管理、拔杂去劣、人工去雄、剥皮晾晒、人工挑杂、脱粒清选、药剂处理、包装入库等种子生产各个环节中,必须严格要求,因为这一系列工作对于保证种子的质量十分重要.目前世界玉米种子产业化总的发展趋势是按照市场经济和产业化发展规律,建立玉米良种产业化体系,实现玉米生产、科研、推广一体化,主要有以下几个方面发展趋势. 相似文献