单抗捕获ELISA法检测禽多杀性巴氏杆菌特异性IgM抗体     

钱建飞  徐步  陈溥言  蔡宝祥  毛洪先  邵国青  凌雯 《畜牧兽医学报》2000,31(1):63-70

本试验采用纯化的鸡ＩgＧ和环磷酰胺预处理后,再以亲和层析纯化的鸡ＩgＭ免疫ＢＡＬＢ/Ｃ小鼠,动用淋巴细胞杂瘤技术,以间接ＥＬＩＳＡ法筛选,获得了５侏能稳定地分泌抗 鸡ＩgＭ（u链）特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经ＥＬＩＳＡ交叉反应性试验和羊抗鸡ＩgＭ（u链）抗血清阻断试验,证明这５株单克隆抗体均是抗鸡ＩgＭ（u链）特异性的。应用该抗鸡ＩhＭ：（u链）单克隆抗体建立了检测鸡抗多杀性巴氏杆菌血清中特异性ＩgＭ抗  相似文献   

鸡腺胃型传染性支气管炎病毒金坛分离株核蛋白基因分析及与标准强毒株同源性比较   总被引：1，自引：0，他引：1  

凌雯  钱建飞  李银  张则斌  潘杰彦  陈溥言 《中国兽医学报》2002,22(2):111-113

根据已发表的鸡传染性支气管炎病毒 (infectious bronchitis virus,IBV) Beau株、M41株的核苷酸序列 ,设计并合成 1对引物。应用该引物 ,通过 RT- PCR扩增出 IBV金坛分离株 (JT株 )的核蛋白基因 (N基因 ) ,片段大小为 82 8bp,与设计相符。对 JT株的 N基因进行序列测定 ,并与标准毒株 KB85 2 3、CU - T2、Beau和 M41的 N基因进行同源性比较 ,结果表明 ,JT株与 KB85 2 3、CU- T2、Beau和 M41毒株的 N基因同源性分别为 87%、87%、86 %和 85 %,说明 JT株与标准毒株在 N基因上存在一定的差异。  相似文献   

马立克氏病病毒光敏生物素核酸探针的制备及应用     

钱建飞  蔡宝祥等 《中国畜禽传染病》1992,(3):50-52

从马立克氏病病毒（MDV）GA株BamHI基因文库中选取L片段，用光敏生物素标记该片段，制备了MDV光敏生物素核酸探针，其检测灵敏度pg水平，保存期至少4个月，对细胞培养物中病毒核酸的检测结果表明，探针只与血清Ⅰ型MDV DNA发生分子杂交，而不与血清Ⅱ型（SB－1和血清Ⅲ型（HVT（MDV DNA发生反应，分别以京－1株（血清Ⅰ型）和Fc126株（血清Ⅲ型）按种1日龄急诊鸡，于14日龄和30日龄采用斑点杂交法检测须提取的病毒DNA，结果京－1株均为阳性，Fc126株均为阴性，表明该探针可以用于MDV强毒株和HVT疫苗毒株的区别诊断，采用斑点发校法检测实验感染MDV GA株的鸡全部为阳性（16／16），检出率为100％，而用琼脂免疫扩散试验的检出率为87．5％（14／16）。结果表明，所制备的MDV光敏生物素核酸探针具有特异性强、灵敏度高、无放射性污染等优点，为MDV强毒株的临床检测及MDV分子生物学研究提供了一种重要手段。  相似文献   

马立克氏病病毒单克隆抗体研究 Ⅰ.马立克氏病病毒和火鸡疱疹病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立和鉴定     

钱建飞  陈溥言  蔡宝祥 《中国预防兽医学报》1992,(4)

采用马立克氏病病毒(MDV)和火鸡疱疹病毒(HVT)感染细胞匀浆抗原免疫 BALB/C 小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术获得了13件分泌 MDV 特异性单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株。其中9株 McAb 对三个血清型毒株均呈阳性反应;BC_3对血清Ⅰ、Ⅲ型毒株反应阳性:CE_(11)和 CB_3对血清Ⅰ型毒株呈阳性反应;EE_(12)对血清Ⅲ型发生反应.13株 McAb 既具有 ELISA 特性(最高效价1:100000),  相似文献   

鸡腺胃型传染性支气管炎病毒金坛分离株核蛋白基因的克隆和测序     

凌雯  钱建飞  张则斌  李银  唐余华  罗涵禄 《中国家禽》2001,23(8):56-57

应用逆转录多聚酶链反应技术，参照Boursnell等发表的鸡传染性支气管炎病毒核蛋白基因序列，自行设计并合成1对引物，应用该引物，从感染IBV金坛株的第五代SPF鸡胚尿囊液中扩增出片段大小为828bp的JT N基因，与设计相符，表明扩增片段为IBVJT株N基因。将扩增片段与pGEM-T Easy载体连接，经核酸序列测定，与Genebank中报道的IBV其它株N基因同源性较高。  相似文献   

法氏囊活性肽的研究进展   总被引：5，自引：0，他引：5  

侯艳红  钱建飞  郝勤宗  裘孝良 《中国家禽》2001,23(12):10-12,25

法氏囊活性肽（囊素）是目前法氏囊组织提取物中唯一一种化学组成已被确定的活性因子，近十年来，对囊素的研究工作取得了很大进展。本文对囊素的生物学活性、组织定位、作用机制及其应用前景进行了综述。  相似文献   

芪蓝抗毒饮预防鸡传染性法氏囊病和增强免疫作用的实验研究   总被引：11，自引：2，他引：9  

胡元亮  周新民  陈玉库  张宝康  刘家国  钱建飞  李银 《畜牧与兽医》2003,35(7):3-5

观察了芪蓝抗毒饮单用及其与鸡传染性法氏囊病毒 (IBDV)疫苗合用 ,对人工诱发鸡传染性法氏囊病 (IBD)雏鸡的死亡率、器官出血率、囊指数比、IBDV抗体效价和增重效果的影响。结果表明 ,芪蓝抗毒饮无论单用或与IBDV疫苗合用均有较好的预防IBD的效果和增强免疫作用 ,能明显减轻IBDV引起的法氏囊损伤 ,早给药的效果略优于晚给药  相似文献   

马立克氏病病毒光敏生物素核酸探针的制备及应用     

钱建飞  蔡宝祥  陈溥言 《中国预防兽医学报》1992,(3)

从马立克氏病病毒(MDV)GA株Bam HI基因文库中选取L片段,用光敏生物素标记该片段,制备了MDV光敏生物素核酸探针。其检测灵敏度达Pg水平,保存期至少4个月。对细胞培养物中病毒核酸的检测结果表明,探针只与血清Ⅰ型MDV DNA发生分子杂交,而不与血清Ⅱ型(SB-1)和血清Ⅲ型(HVT)MDV DNA发生反应。分别以京-1株(血清Ⅰ型)和Fc126株(血清Ⅲ型)接种1日龄雏鸡,于14日龄和30日龄采用斑点杂交法检测羽髓提取的病毒DNA,结果京-1株均为阳性,Fc126株均为阴性,表明该探针可以用于MDV强毒株和HVT疫苗毒株的区别诊断。采用斑点杂交法检测实验感染MDV GA株的鸡全部为阳性(16/16),检出率为100％;而用琼脂免疫扩散试验的检出率为87.5％(14/10)。试验表明,所制备的MDV光敏生物素核酸探针具有特异性强、灵敏度高、无放射性污染等优点。为MDV强毒株的临床检测及MDV分子生物学研究提供了一种重要手段。  相似文献   

火鸡疱疹病毒A抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立和鉴定   总被引：3，自引：0，他引：3  

钱建飞  陈浦言 《中国兽医杂志》1992,18(6):3-6

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