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21.
鸡传染性支气管炎病毒地方分离株S1、N和M基因的克隆与表达 总被引:1,自引:0,他引:1
摘要:将IBVSX16株的S1、N和M基因克隆入真核表达载体pVAX1,构建IBV真核表达载体pVAX1-16S1、pVAX1-16N和pVAX1-16M。体外转染BHK-21细胞,用间接ELISA检测到目的蛋白表达,用构建的3个表达载体免疫小鼠,从小鼠血清中检测到了抗IBV抗体,初步证实用IBVS1、N和M基因作为核酸疫苗免疫动物,可以激活机体免疫应答。 相似文献
22.
23.
表达犬瘟热病毒H基因的重组犬2型腺病毒的构建与鉴定 总被引:6,自引:0,他引:6
将犬瘟热病毒 ( canine distemper virus,CDV ) H基因表达盒克隆入转移质粒 p VAXΔE3,构建含 CDV H基因表达盒的转移质粒 p VAXΔ E3L PH,用 Nru 和 Sal 分别酶切转移质粒 p VAXΔ E3L PH和犬 2型腺病毒全基因组质粒p Poly2 - CAV- 2 ,将 CDV H基因表达盒定向克隆入 p Poly2 - CAV- 2质粒中 ,构建 E3区部分缺失的包含 CDV H基因表达盒的犬 2型腺病毒重组质粒 p CAV- 2 / CDVL PH。 Asc 和 Cla 对 p CAV- 2 / CDVL PH进行双酶切 ,释放 CAV- 2 /CDVL PH重组基因组 ,利用脂质体将 CAV- 2 / CDVL PH重组基因组与去除 Sal 和 Nru 片段的 CAV- 2基因组两端片段共转染 DK细胞 ,盲传和重复转染 3次 ,4 d后出现典型 CAV- 2病变 ,获得重组病毒 CAV- 2 / CDVL PH。用 CDV H基因特异性引物经 RT- PCR扩增重组病毒 DK细胞培养物 ,能够扩增出相应的核酸片段 ,表明 CAV- 2 / CDVL PH在DK细胞繁殖的过程中能够转录 CDVL P H的 m RNA,重组病毒免疫犬 ,可以诱导犬产生特异的抗 CAV- 2 HI抗体和抗 CDV中和抗体 相似文献
24.
鸡传染性支气管炎病毒地方流行株的分离与鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
从山西各地区疑似鸡传染性支气管炎(IB)的病料中,分离到5株鸡传染性支气管炎病毒(IBV)分离株,并对分离病毒进行了病毒形态观察、对鸡新城疫病毒(NDV)的干扰、鸡胚致病性试验、动物回归试验、血凝特性试验、病毒理化特性测定等生物特性鉴定及IBV N基因特异性片段的检测.电镜观察,可见直径为60~120 am,有囊膜及纤突呈冠状排列的病毒粒子;对NDV有明显的干扰作用;分离株的传代物均有明显的致鸡胚矮小化作用;动物回归感染死亡鸡肾脏病变明显,表现肾脏肿大、花斑肾现象,输尿管内充塞大量尿酸盐;无直接血凝性,经1%胰酶处理后可凝集鸡红细胞;分离株对乙醚和氯仿敏感;采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)对分离毒株进行扩增,结果均扩增出特异N基因核酸片段. 相似文献
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26.
犬瘟热病毒F1基因的原核表达与初步应用 总被引:1,自引:0,他引:1
将犬瘟热病毒(CDV)F1基因定向克隆入pET-28a( )载体.构建了原核表达质粒pET-28F1。pET-28F1转化宿主菌BL21(DE3)plysS.在IPTG的诱导下.可高效表达目的基因,表达量达菌体蛋白总量的23.52%。Western blot分析表明,所表达蛋白能与抗CDV阳性血清发生特异性的抗原-抗体反应。以E.coli表达的CDV F1蛋白为抗原.HRP标记的兔抗犬IgG为二抗.建立了检测抗CDV抗体的间接ELISA方法。试验表明.应用CDV F1蛋白作为抗原检测抗CDV抗体具有特异性高、抗原易纯化、成本低等特点。 相似文献
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为探索优化张掖市马铃薯施肥技术,提高栽培效益,减少农业面源污染,张掖市耕地质量建设管理站在2019—2020年试验研究了不同施肥组合模式对马铃薯产量及耕地质量的影响,通过施用有机肥料、土壤调理剂、绿肥还田、化肥以及不同组合模式和不同组合变化因子对土壤养分、土壤质量、马铃薯经济性状、产量等方面的影响。结果表明:有机肥+土壤调理剂+绿肥还田+常规施肥组合下马铃薯增产最高,土壤有机质、全氮、有效磷、速效钾、土壤容重、孔隙度都有不同程度改善,经济效益明显,土壤改良效果突出。 相似文献
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1梨黑星病1.1症状。梨黑星病主要为害果实、叶片、叶柄、新梢。果实发病初期生淡黄色、蝇头大小的圆形病斑,逐渐扩展到5~10mm,病部稍凹陷,病斑上出现黑绿色霉层,黑霉就是病菌的分生孢子层,病斑木栓化,坚硬龟裂,病疤附近的果肉变硬,并带苦味,如幼果期受害,常引起果实畸形。 相似文献
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