猪急性腹泻综合征病毒RT-PCR检测方法的建立及应用     

司广斌  陈志飞  梁文清  陈一波  贺东生 《中国动物检疫》2020,37(11):76-81

为建立一种鉴定猪急性腹泻综合征病毒（SADS-CoV）的RT-PCR方法,根据NCBI登录的SADS-CoV N基因保守区域序列,设计了3对引物（P1、P2和P3）,通过对SADS-CoV及其他6种病毒进行检测,筛选出最合适的引物,然后对退火温度、引物浓度、dNTPs浓度、rTaq DNA聚合酶浓度和循环次数等反应条件进行了优化。结果显示,P3引物对SADS-CoV特异性最好,与其他病毒无交叉反应。敏感性试验显示,该方法最低检测限可达9.55×102 copies/μL;重复性试验显示该方法重复性良好。运用建立的RT-PCR方法,对广东省的21份临床样品进行检测,结果检出SADS-CoV阳性样品4份,阳性样品的测序结果与其RT-PCR完全一致。结果表明,本研究成功建立了一种鉴定SADS-CoV的RT-PCR方法,且该方法具有检测快速、成本廉价、特异性强、敏感性高和重复性好的优点,可以用于SADS-CoV的临床诊断。  相似文献   

黄土丘陵区白羊草群落光谱特征对氮磷添加的响应     

罗杨  陈志飞  周俊杰  简春霞  赖帅彬  陈阳  王绍妍  靳媛  徐炳成 《草地学报》2021,29(6):1158-1165

为利用草地群落光谱参数来评价氮磷施肥效应,本研究以安塞纸坊沟流域内白羊草（Bothriochloa ischaemum）群落为研究对象,测定计算不同氮磷添加[N处理：0（N₀）,25（N₂₅）,50（N₅₀）和100（N₁₀₀） kg N·hm^-2·a^-1;P处理（以P₂O₅计）：0（P₀）,20（P₂₀）,40（P₄₀）和 80（P₈₀） kg P₂O₅·hm^-2·a^-1]的草地群落光谱特征,同步测定草地群落地上生物量和盖度并计算群落多样性指数。结果表明：施氮显著增大群落地上生物量和盖度,施磷显著增加盖度,氮磷添加对群落多样性无显著影响;氮磷添加后,光谱在“蓝谷”,“绿峰”和“红谷”处的反射率均显著降低;单施氮对红边参数无显著影响,单施磷显著增大红边斜率及面积;植被指数在施氮或施磷后均显著增大,且磷添加的增幅大于氮。总体研究表明,施氮和施磷对草地生物量和盖度的影响不同,施磷能有效提高白羊草群落盖度和群体光合能力,N₅₀P₄₀处理提升群落光合能力最强。  相似文献   

多重PCR鉴定三种颚口线虫方法的建立     

李树清  李雯雯  张鸿满  陈韶红  李健  陈志飞  王巧全  张永年  黄维义 《中国动物传染病学报》2014,(6):38-45

为了建立快速、灵敏、可靠的鉴别颚口线虫虫种的方法,根据GenBank中发表的棘颚口线虫、日本颚口线虫和杜氏颚口线虫ITS-2序列,设计了3对特异引物,建立了这3种颚口线虫的单一PCR和多重PCR检测方法,并分别对单一PCR和多重PCR方法的特异性和敏感性进行了鉴定。结果显示单一PCR和多重PCR均能特异扩增出棘颚口线虫、日本颚口线虫和杜氏颚口线虫,其片段大小分别为282、358、183 bp,单一PCR对棘颚口线虫、日本颚口线虫和杜氏颚口线虫虫体DNA最小检出量分别为0.2、0.01、0.01 ng/μL。对宫脂线虫、异尖线虫、棘口吸虫以及迭宫绦虫均不能进行扩增。用建立的多重PCR方法对菲律宾、印度尼西亚、黑龙江颚口线虫等12条颚口线虫DNA模板进行扩增,经鉴定菲律宾与印度尼西亚的颚口线虫为棘颚口线虫,黑龙江的颚口线虫为日本颚口线虫。鉴定结果与原虫体样本的形态鉴定和测序分析结果一致。研究显示建立的多重PCR方法具有很强的特异性和较高的敏感性,可用于棘颚口线虫、日本颚口线虫和杜氏颚口线虫虫种的鉴定和流行病学调查。  相似文献   

紫花苜蓿叶、茎产量及品质动态   总被引：1，自引：0，他引：1  

张晓娜  宋书红  陈志飞  张莹  杨云贵 《草业科学》2016,33(4):713-721

为获得最佳刈割期,分别在关中苜蓿、阿尔冈金、金皇后3个紫花苜蓿(Medicago sativa)品种的现蕾期、初花期、盛花期、结荚期和成熟期进行刈割,将其茎叶分离风干后,测定牧草产量、茎叶比、株高、分枝数及养分,为家畜提供优质的蛋白质饲料。结果表明,随苜蓿生长发育,其产量呈先升高后降低趋势,结荚期最高。现蕾期苜蓿茎叶比高于其它时期,成熟期苜蓿株高和分枝数高于其它时期。随着生育期的推后,各品种的粗蛋白、粗脂肪和相对饲用价值逐渐降低,粗纤维、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维逐渐升高。现蕾期苜蓿粗蛋白和相对饲用价值显著(P0.05)高于初花期、盛花期、结荚期和成熟期;其叶和茎的粗蛋白分别比后者提高了4.52%、8.28%、12.06%、14.70%和12.59%、9.38%、11.19%和28.81%,相对饲用价值分别比后者提高了6.55%、6.60%、29.07%、40.25%和3.84%、6.09%、4.88%、10.99%,粗纤维分别比后者降低了7.46%、6.85%、20.46%、23.00%和2.99%、1.81%、2.67%、3.67%。现蕾期为苜蓿最佳刈割期。  相似文献   

XMG-35真空熏蒸库     

徐朝哲  袁平  王桂江  陆凤良  陈志飞  王向东  魏凌云  周国梁  查利文  金翕 《植物检疫》2004,18(6):327-329

XMG-35熏蒸库具有常压熏蒸、熏蒸气体重复利用等功能.熏蒸库有良好的密封效果,20Kpa的压力下,24th后压力增加5%~15%.泵系统功能强大,5min可减压30%,35min可减压75%,并可以使至少70%的熏蒸剂得到重复利用.在减压熏蒸过程中,可控制库内温度,循环系统可保持熏蒸库内熏蒸剂均匀分布,并具有独特的装置,能用普通的热导式卤素分析仪准确地检测熏蒸库内熏蒸剂的浓度.  相似文献   

基于森林病虫害领域本体的概念相似度算法改进     

陈志飞  岳琪  陈广胜 《东北林业大学学报》2016,(9):112-115

传统的基于本体概念的相似度算法过于依赖层次结构,且忽略了许多影响概念间语义相似度的因素。针对这一问题,通过引入边权重关系、语义相关度影响因素,提出1种新的基于森林病虫害本体的语义相似度的计算方法。结果表明:改进后的相似度算法比传统算法更接近林业相关领域的专家经验值,证明了该方法的准确性及有效性,体现了林业领域本体概念间的复杂关系。  相似文献   

规模化猪场猪咬耳咬尾发生原因及防治措施          下载免费PDF全文

李玉杰  王庆伟  陈志飞 《中国猪业》2018,13(11):47-49

规模化猪场咬耳、咬尾普遍存在,其发生原因复杂,涉及因素众多,防治效果往往不尽人意,明显影响了猪场的生产指标和经济效益。结合笔者多年的现场管理经验,对猪咬耳、咬尾的发生原因和防治措施进行了分析和总结。  相似文献   

集装箱溴甲烷熏蒸散气速率的初步研究     

袁平  王桂江  陈仲兵  陈志飞  金翕 《植物检疫》2006,20(4):209-212

集装箱溴甲烷熏蒸散气速率的试验研究表明：集装箱熏蒸后残余溴甲烷的浓度和散气时间、货物的吸附、集装箱内货物的容量有关,与温度、天气状况以及不同规格集装箱关系不显著;通过自然散气8h和3周左右的航行时间就能到达残留低于5ppm（20mg/m3）的要求,但对于装载溴甲烷气体强吸附性的货物、用塑料袋包裹的货物或集装箱装载量过满的货物,应延长散气时间或采取机械协助通风来控制残余气体浓度.  相似文献   

减压条件下溴甲烷对松褐天牛熏蒸效果的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

徐朝哲  袁平  王桂江  周鄂飞  周国梁  陈志飞  顾敏  金翕  魏凌云 《植物检疫》2012,(3):10-13

利用XMG-35真空熏蒸库在11～21℃和减压条件下,选择不同压力和浓度梯度,对含有松褐天牛(Monochamus alternatus Hope)幼虫的黑松(Pinus thunbergii)木段进行4h的溴甲烷熏蒸处理,投药后循环20min,将库内气压立即回升至95kPa。结果表明,松褐天牛幼虫的杀灭效果和环境温度、压力、投药剂量有关,在其他条件相同的情况下,压力越低,对松褐天牛的杀灭效果越好;在相同条件下,保持30kPa状态20min再将气压缓慢回升至95kPa,对松褐天牛的杀灭效果介于常压熏蒸与减压后快速回压熏蒸之间。  相似文献   

鸡传染性法氏囊病毒抗原捕获ELISA检测方法的建立及应用     

陈志飞  杜军  汪振兴  张强  王巧全  严亚贤  孙建和  李树清 《上海交通大学学报(农业科学版)》2009,27(6):548-553

为快速检测鸡传染性法氏囊病毒,使用纯化的鸡抗IBDV多克隆抗体和鼠抗IBDV单克隆抗体,建立了抗原捕获ELISA检测鸡传染性法氏囊病毒的方法.使用建立的方法可以检测到1:160倍稀释的IBDV疫苗及阳性法氏囊组织中的病毒.检测禽流感、新城疫、鸡传染性支气管炎病毒及沙门氏菌、葡萄球菌、巴氏杆菌、大肠杆菌、肺炎球菌等结果均为阴性.检测IB-DV超强毒和疫苗毒人工感染鸡的法氏囊、脾、肝及临床样品78份,检出阳性24份,与RT-PCR检测结果相符率为96%(75/78).说明建立的方法敏感、特异,可用于法氏囊病的诊断和监测.  相似文献