地方品种固始鸭γ-干扰素基因的克隆与分子进化分析     

陈红英  崔保安  李新生  胡功政  赵丽  王东方 《华北农学报》2007,22(3):1-4

根据GenBank发表的鸭γ-干扰素cDNA基因序列,自行设计、合成1对引物,应用RT-PCR技术,无需用非特异性免疫原如ConA、PHA等刺激分离的脾淋巴细胞,直接提取总RNA,扩增固始鸭γ-干扰素基因(DuIFN-γ),并进行克隆和测序。测序结果表明,获得了DuIFN-γ全序列,其大小为515 bp,包含一个完整阅读框,编码164个氨基酸残基,推导的氨基酸有3个潜在的N-糖基化位点,有5个与二硫键形成有关的半胱氨酸。序列比较分析发现,克隆的固始鸭IFN-γ基因序列与GenBank中4条鸭IFN-γ基因序列中的3条序列(AF087134,AF100929,AJ012254)完全一致,而与另一条北京鸭核苷酸同源性为99.6%,有2个碱基发生非同义变异,氨基酸同源性为98.8%。固始鸭与人和其他种动物的IFN-γ基因序列分析和系统进化分析表明,IFN-γ基因存在种属的差异性,亲缘关系越近,同源性越高。DuIFN-γ基因的成功克隆为进一步研究固始鸭IFN-γ基因表达、生物学活性和应用奠定基础。  相似文献   

《免疫学》双语教学示范课程建设与体会          下载免费PDF全文

陈丽颖  张红英  胡慧  杨明凡  刘芳  陈红英  夏平安  金钺 《家畜生态学报》2015,36(9):90-93

近年来,高等院校大力推进双语教学模式是与国际高等教育接轨,培养具有国际化竞争力高素质人才的重要途径,双语教学课程建设已成为国内高校教学改革的一个热点。论文介绍了课程组在免疫学双语教学和课程建设工作中的经验和一些体会。  相似文献   

猪圆环病毒2型ORF2基因截断表达及ELISA抗体检测方法的初步建立     

郭官鹏  刘畅  陈龙彪  马世杰  高晓云  陈红英  崔保安 《兽医大学学报》2014,(7):1059-1064

为建立以重组PCV2Cap蛋白为包被抗原的间接ELISA检测方法,构建了猪圆环病毒2型（PCV2）ORF2基因原核表达质粒pET28a-ORF2。SDS-PAGE显示,在0.1mmol/L IPTG和37℃条件下诱导4h,重组Cap蛋白高效表达。Western blotting证实该蛋白能够被PCV2阳性血清特异性识别。以纯化的蛋白为抗原建立了检测PCV2抗体的间接ELISA方法。结果表明,抗原最适包被质量浓度为2mg/L;血清最佳稀释度为1∶100;酶标二抗最适浓度为1∶2 000,该方法的敏感性为86.96%,特异性为100%。用该方法对河南省152份猪血清样品进行检测,与间接免疫荧光（IFA）的符合率为85.53%（130/152）,与商品化的韩国金诺PCV2ELISA试剂盒的符合率为88.16%（134/152）。本试验成功建立了PCV2血清抗体间接ELISA方法,具有较高的敏感性和特异性,可用于大规模的血清学检测。  相似文献   

犬髌骨内侧脱位的诊断与防治     

付朋飞  王冬梅  郭晓庆  陈红英  黄淑成  仝宗喜 《黑龙江畜牧兽医》2014,(6):71-73

各种品种、年龄和性别的犬都可能发生髌骨内侧脱位,玩具犬或小型犬更易发生。髌骨内侧脱位的始发因素可能与先天性因素和外力作用有关。本病例中患病犬主要是由于髌骨受到外力作用,导致其脱离正常的生理位置,从而发生了髌骨内侧脱位。笔者采用滑车加深术,通过滑车加深而达到使髌骨稳定复位的目的,并取得了较好的效果。结合本病例笔者详述了犬髌骨内侧脱位的手术治疗方法、注意事项及体会,同时对该病的发病原因进行了初步探讨。  相似文献   

猪伪狂犬病病毒载体重组疫苗研究进展简     

王林青  郑兰兰  李坤  陈红英  李文增  李坤陶  崔保安 《中国预防兽医学报》2014,(2):160-164

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鸡白细胞介素-18对H9亚型禽流感灭活油乳苗的免疫增强作用     

郭晓庆  金钺  顾阳  潘鑫龙  乔涵  陈红英 《安徽农业科学》2014,(26):9048-9050

[目的]探索鸡白细胞介素-18（IL-18）在H9禽流感（AI）灭活油乳苗免疫中的免疫佐剂作用.[方法]从鸡脾淋巴细胞中克隆鸡IL-18基因,亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1（＋）中,构建真核表达质粒pIL-18.将重组真核表达质粒pIL-18、H9亚型AI灭活油乳苗及其二者联合分别免疫14日龄SPF鸡,检测其细胞免疫和体液免疫水平,评价鸡IL-18在H9亚型禽流感灭活油乳苗中的免疫增强作用.[结果]成功克隆了鸡IL-18全基因,大小为597 bp.质粒pIL-18和H9亚型AI灭活油乳苗联合免疫的SPF鸡所产生的HI抗体效价在接种第4周后明显高于H9亚型AI灭活油乳苗免疫组;其T淋巴细胞的增殖反应也强于H9亚型AI灭活油乳苗免疫组.[结论]质粒pIL-18能提高H9亚型禽流感灭活油乳苗诱发的免疫应答,为研究防制禽流感的新型疫苗提供了新思路.  相似文献   

油菜田施用“底肥王”对产量影响试验初报     

段年斌  余顺祥  鲁文林  王邦龙  陈红英 《安徽农学通报》2010,16(16):55-55,111

为了验证底肥王对油菜产量的影响,于2009年进行试验,结果表明,航天立兴底肥王对油菜出苗成株有积极影响。施用后在其它条件一致的情况下,对油菜植株的生物学特征方面正面性影响颇多,对干物质的积累、千粒重、产量有积极的作用,理论上能增产10.49%,值得推广。  相似文献   

一起皮肤型鸡痘的诊断与防治     

邵攀峰  陈红英  崔保安 《中国畜牧兽医》2009,36(7):203-204

2008年10月，河南省郑州市郊区某鸡场发生一起疑似鸡痘。将病鸡痘痂部位的皮肤和结节做成1∶10的悬液接种易感鸡，第6天后试验鸡表现精神萎靡，食欲减退，体重减轻，出现典型的皮肤痘疹；取病料接种鸡胚在鸡胚绒毛尿囊膜上出现豆粒大小的痘斑。结合发病情况、临床症状、剖检变化和实验室诊断，初步诊断为鸡痘。  相似文献   

猪伪狂犬病病毒河南分离株gE全基因的克隆与序列分析     

高晓云  顾阳  潘鑫龙  郭小参  崔保安  陈红英 《华北农学报》2015,(1)

为了确定河南部分地区按照正常免疫程序接种猪伪狂犬病病毒(PRV)基因缺失苗的猪场是否发生了PRV野毒感染,了解新流行株的主要毒力基因g E是否发生变异,利用PCR方法,对南阳、周口、巩义、济源、漯河、原阳等地采集的疑似PRV感染的病料进行检测。对PCR检测为阳性的病料接种猪睾丸细胞,传至6代,分离出9株PRV,克隆其g E全基因并进行序列分析。结果表明,9株PRV均能扩增出1 862 bp的g E基因,且彼此之间同源性为99.9%~100%,与其他PRV毒株同源性为97.5%~99.6%。9株分离株处于一大分支上,且均含有2个氨基酸插入,在448位和510位均发生氨基酸置换。结果表明,分离株均为PRV野毒株,且g E基因有不同程度的变化,与河南省伪狂犬病的重新流行有密切联系。  相似文献   

猪α干扰素原核表达载体的构建及表达   总被引：3，自引：0，他引：3  

刘占通  崔保安  舒畅  金喜新  陈红英  杨明凡  魏战勇 《河南农业大学学报》2006,40(4):398-401

以重组克隆质粒pGEM-T-IFN-αZ为模板,PCR扩增杂种猪α干扰素,将其插入原核表达载体pET-43.1a-c( )中,构建了猪α干扰素原核表达载体pET-IFN-α,实现了猪α干扰素在大肠杆菌BL21中的表达.SDS-PAGE电泳、Western-blotting检测均出现了特异性的条带.SDS-PAGE电泳分析表明,表达的融合蛋白以可溶性形式存在.经薄层扫描分析,表达产物约占菌体总蛋白的29.8%.  相似文献