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将山羊IFN-γ基因插入到合有口蹄疫病毒（FMDV）vp1基因的山羊痘病毒（GPV）转移载体PTK-vp1中,获得合有FMDV vp1基因和山羊IFN-γ基因的重组转移载体pTK-vp-IFNγ,以本实验室构建的表达β-半乳糖苷酶基因（LacZ）的山羊痘重组病毒rAY41-LacZ为亲本毒,与转移载体pTK-vp-IFNγ共同转染犊牛睾丸细胞进行同源重组,通过7轮反向蓝白斑筛选,产生重组山羊痘病毒rAY41-VP-IFNγ,通过PCR和间接免疫荧光实验证实获得了能够稳定表达FMDV vp1和山羊IFN-γ的重组山羊痘病毒。 相似文献
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以specific pathogen-free(SPF)鸡为研究对象，通过滴鼻点眼方式感染传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus,IBV）强毒株（CK/CH/LDL/140520）和IBV弱毒株（γCoV/ck/China/I0718/17）。分别在感染后12、36 h和3、7、14 d，采集法氏囊、脾脏、肾脏和气管，运用实时荧光定量PCR法，检测感染不同毒力IBV后，SPF鸡各脏器组织中免疫相关因子表达差异，初步探讨SPF鸡对不同毒力IBV免疫反应机制。结果表明，IBV弱毒株感染早期主要上调Toll样受体15(Toll-like receptors 15,TLR15)基因表达水平，提高白细胞介素（Interleukin,IL-1β）、IL-8基因表达量。法氏囊是介导启动获得性免疫反应的主要器官；脾脏是介导调控获得性免疫反应的主要器官，IBV强毒株在感染后期持续诱导提高TLR7、TLR15、TLR21基因和IL-6基因表达水平。可知，不同毒力IBV诱导SPF鸡炎症反应的免疫活化机制及介导调控获得性免疫反应的器官存在一定差异，为进一步揭示IBV强弱毒株... 相似文献