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鸭FST基因编码区克隆、序列分析及其在大肠杆菌中的表达 总被引：1，自引：1，他引：0
本研究旨在获取鸭卵泡抑素(FST)外源蛋白以及进一步深入了解其在肌肉发育和繁殖上的作用,采用RT-PCR方法从鸭卵巢中克隆鸭FST基因CDS序列,并将编码FST成熟蛋白的核酸片段连入原核表达载体pET-32a(+)中,转化大肠杆菌(Escherichiacoli)并采用IPTG进行诱导,诱导后的蛋白经SDS-PAGE分析后用蛋白免疫技术鉴定。序列分析表明,FST基因编码区序列为1 032 bp,编码343个氨基酸,其中信号肽由28个氨基酸组成,成熟蛋白具有4个保守结构域:N-domain、DomainⅠ、DomainⅡ和DomainⅢ,其中DomainⅠ与鼠DomainⅠ结构较相似,DomainⅡ和DomainⅢ差异很大。SDS-PAGE电泳结果显示表达出的融合蛋白为52 ku,免疫鉴定结果呈阳性。结果表明,FST基因在3个功能结构域上存在差异,推测DomainⅠ主要与其肌肉发育有关,而DomainⅡ、DomainⅢ与鸭繁殖关系密切。本研究成功获取了鸭卵泡抑素蛋白,为进一步研究卵泡抑素在鸭肌肉发育以及繁殖中的功能奠定了基础。 相似文献
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旨在揭示鹅成熟卵泡壁层中各个结构组分的形态特点与发育规律,为禽类成熟卵泡动态发育的分级提供新的视角与依据。本研究选用健康的高产期天府肉鹅母鹅5只,取其各个阶段(直径0～2、2～4、4～6、6～8、8～10 mm与F5～F1)的成熟卵泡进行固定。在0～10 mm中的每个阶段分别随机选取至少3个卵泡,其中每个卵泡(除0～2 mm阶段)均随机选取3个以上不同区域进行HE切片制作,而F5～F1阶段的每个卵泡则随机选取3个以上不同区域进行HE切片制作。每个切片随机取3个以上的区域进行图像采集,分别在每张图像上随机选取3个区域对其对应的卵泡壁层、颗粒层、膜层与结缔层的组织厚度进行测量、统计与分析,对其形态结构进行比较与观察。结果表明:1)在部分直径2 mm以下的卵泡中,还未形成完整的内膜层。2)直径2～10 mm的卵泡与F5卵泡在卵泡尺寸与卵泡壁层形态上并未表现出明显的差异。3)F4～F2阶段的卵泡中,其颗粒层细胞呈扁平状;而膜层与结缔层厚度显著增加(P0.05),卵泡壁层整体形态发生了较大的改变。4)F1阶段卵泡的颗粒层为疏松的立方状,且其卵泡壁的各个组分厚度也均出现了显著的变化(P0.05)。结果提示,从成熟卵泡壁层组织形态和结构分析,鹅卵泡的发育历程可划分为2 mm以下、2～10 mm、F5、F4～F2与F1卵泡5个不同的阶段,这些阶段均有其独特的形态、结构特点,且这样的特点很可能与其功能的差异密切相关。 相似文献
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鹅Perilipin基因部分片段的克隆、不同品种及填饲对组织mRNA表达水平的影响 总被引：3，自引：0，他引：3
本研究旨在克隆鹅围脂滴蛋白(Perilipin)基因,并探讨填饲对其在四川白鹅和朗德鹅肝脏中表达的影响,为从脂滴角度研究鹅肥肝分子机理提供依据。试验选取12只朗德鹅和12只四川白鹅为研究对象,通过RT-PCR方法扩增鹅Perilipin基因部分序列,采用实时定量技术研究了该基因在皮脂、腹脂、肝脏等10个组织中的表达情况,最后检测填饲后两品种鹅肝脏总脂质含量、甘油三酯(TG)水平、肝质量以及Perilipin基因表达变化。结果表明:获得的鹅Perilipin基因序列与原鸡的同源性最高,与哺乳动物的同源性也达到70%以上;从组织表达上看,该基因主要表达于腹脂和皮脂,而在其他组织几乎不表达;填饲引起鹅肝脏Perilipin mRNA表达丰度的极显著增加(P0.01),且与肝质量、肝内TG和总脂质呈显著正相关;此外,填饲导致其在朗德鹅肝脏中的表达丰度显著高于四川白鹅(P0.05)。结果提示:填饲会引起Perilipin mRNA在鹅肝脏中表达丰度的极显著增加(P0.01),且其增加幅度存在着品种间差异(P0.05)。 相似文献
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本文旨在探讨鹅肝细胞的分离与原代培养方法,并对分离的肝细胞三酰甘油(TG)合成功能进行检测.采用改进的Seglen二步法分离纯化来自10日龄仔鹅肝脏的肝细胞,并进行原代培养.在倒置显微镜下观察肝细胞形态变化,MTT比色法测定细胞活性,用脂肪酸培养肝细胞并检测其形态、活性和细胞内TG含量的变化.结果显示,分离出的肝细胞形态完整、贴壁良好、活性高,细胞活性曲线与理论“S”型细胞生长曲线基本符合.另外,脂肪酸能增加肝细胞体积、活性和TG含量.结果表明,本研究成功分离了鹅肝细胞并进行了原代培养,肝细胞生酯功能正常. 相似文献
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为研究Akirin2基因在鸭生物体中的功能,本试验通过RT-PCR扩增了鸭Akirin2基因,并采用荧光定量PCR方法检测了其在40日龄北京鸭不同组织中的表达差异.序列分析结果表明,鸭Akirin2基因CDS区全长594 bp,编码197个氨基酸,氨基酸水平上与鸡的相似性达99%,其氨基酸序列二级结构具有哺乳动物Akirinl和Akirin2氨基酸二级结构域的共同区域;荧光定量结果表明,鸭Akirin2在肌肉和免疫器官脾脏中都有表达.以上结果支持了鸟类Akirin2可能具有与哺乳动物中Akirin1和Akirin2共同功能的观点,为进一步研究Akirin2基因在鸟类肌肉发育中的作用奠定了基础. 相似文献
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为研究促性腺激素抑制激素(Gonadotropin-inhibitory hormone,GnIH)基因表达与鹅卵泡发育间的关系,对鹅GnIH基因的CDS区序列进行了克隆与分析,并采用荧光定量PCR检测了该基因在产蛋高峰期鹅的不同大小卵泡中的表达量.序列分析结果表明,所获得的鹅GnIH基因CDS区长471 bp,编码157个氨基酸,与已知的其它鸟类GnIH相似性达87％.鹅GnIH前体包括3个“LPLRF”,具有典型的“LPXRF-酰胺”基序.荧光定量结果表明,鹅GnIH在所有不同大小的卵泡中均有表达,其表达量在卵泡发育过程中呈现规律性变化,总趋势是先增高后降低,且在直径4～5 mm的卵泡中表达量最高.研究结果显示,鹅卵泡GnIH基因的表达与卵泡选择性发育有关,且该选择过程可能发生在直径为4～5mm的卵泡.这一研究可为探讨季节性繁殖禽类卵泡发育的调控机理奠定基础. 相似文献
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填饲对鹅肝脂质沉积及相关基因表达的影响 总被引：5，自引：1，他引：4
以四川白鹅和朗德鹅为材料,研究填饲对鹅肝脏脂质沉积及脂质分泌有关基因表达的影响。结果表明,填饲引起肝重率、肝脂含量和肝脂质TG含量显著增加;四川白鹅的肝重率与血浆5bVLDL和TG的含量呈正相关,而朗德鹅不存在这种关系,表明血浆VLDL浓度是肝脂沉积的指示剂;填饲诱导DGAT2mRNA表达量下降,LXRα和LPLmRNA表达量增加,推测LXRα对肝中TG积聚及血浆5bVLDL—TG分泌都有促进作用,LPL和DGAT2基因表达促进肝中脂质的水解或抑制肝VLDL—TG分泌。 相似文献
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四川白鹅趾瘤病是常见多发的脚底皮肤及周围组织的一种化脓性、增生性炎症，虽很少直接导致四川白鹅死亡，却严重影响鹅的活动、采食，以致生长缓慢，产蛋减少，并逐渐消瘦、停产而被淘汰。为了让养殖户对四川白鹅趾瘤病有深入的了解，从而降低该病造成的经济损失，笔者从临床症状、病理变化、发病原因、预防及治疗措施等方面对四川白鹅趾瘤病进行了阐述。 相似文献
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四川白鹅趾瘤病是常见多发的脚底皮肤及周围组织的一种化脓性、增生性炎症,虽很少直接导致四川白鹅死亡,却严重影响鹅的活动、采食,以致生长缓慢,产蛋减少,并逐渐消瘦、停产而被淘汰。为了让养殖户对四川白鹅趾瘤病有深入的了解,从而降低该病造成的经济损失,笔者从临床症状、病理变化、发病原因、预防及治疗措施等方面对四川白鹅趾瘤病进行了阐述。 相似文献
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鹅LXRα基因的克隆及填饲对其mRNA水平的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
为了研究填饲对LxRα mRNA表达水平的影响,本试验以四川白鹅和朗德鹅为试验对象,通过RT-PCR方法克隆了鹅肝脏X受体α(LXRα)基因部分序列,并采用SYBR-Green法研究了填饲对LXRα基因在肝脏和脂肪组织中转录水平的影响.结果获得了1005 bp的鹅LXRα部分序列,且与其它物种有较高的相似性,但存在8个氨基酸变异位点.LXRα基因在肝脏、腹脂和皮脂中都有表达,但在肝脏中的表达量最高.填饲引起鹅皮脂、腹脂和肝脏的LXRα mRNA表达丰度的显著增加.对照组中,LXRα在朗德鹅肝中的表达量高于四川白鹅(P<0.05),而在皮脂、腹脂中朗德鹅的表达量低于四川白鹅(P<0.05).填饲组,在肝和腹脂中LXRα的表达量四川白鹅显著高于朗德鹅(P<0.05),皮脂中表达量品种间差异不显著.填饲后LXRα mRNA表达丰度与皮脂、腹脂和肝脏的相对质量呈显著正相关,并且朗德鹅的相关性要强于四川白鹅.结论:填饲引起鹅肝脏和脂肪组织的LXRα mR-NA表达丰度的显著增加,填饲对LXRα mRNA表达的影响存在显著的品种差异. 相似文献