四川省波尔山羊胚胎移植操作规程的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

马保华  李键  张红  邓小东  和力新  周洪群  曹冶  李红 《西南农业学报》2005,18(2):205-207

根据四川省的生产条件,进行了波尔山羊胚胎移植操作规程的研究。从波尔山羊胚胎移植中准备工作及实施方案的制定开始,对供、受体羊选择与饲养管理,供体羊超排技术与胚胎回收、鉴定技术,受体羊同期发情与胚胎手术移植技术,以及供、受体羊术后管理等系列化操作规程进行了研究与确定。  相似文献   

奶山羊胚胎冷冻和移植试验          下载免费PDF全文

王光亚  马保华  钱菊芬 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》1988,(3):89-90

家畜胚胎冷冻保存的研究对于优良品种胚胎库的建立及品种推广有重要意义,同时冷冻胚胎便于在生产中应用。哺乳动物胚胎冷冻保存始于实验动物。50年代Ferdow等初次成功地使冷冻家兔受精卵发育成胎儿。Whittingham(1972)冷冻移植小鼠胚胎成功。同一时期Wilmut也成功地进行了小鼠胚胎冷冻试验,1973年又成功地进行了牛冷冻胚胎的移植。此后在绵羊(Willasen et al.1974)、山羊(Bilioan et al.1976) 和马(Ra ma moto,1982)等动物的胚胎冷冻移植相继成功。英、美和西德等国已建立奶牛胚胎移植公司,向国外输送冷冻胚胎。目前国内在奶牛、兔和绵羊方面均有成功的报道,但在奶山羊还未见报道。本试验旨在解决奶山羊胚胎冷冻和解冻的方法问题,为建立我国优良奶山羊品种西农萨能奶山羊胚胎库创造条件。  相似文献   

彗星试验检测体外培养山羊卵母细胞的老化程度   总被引：1，自引：0，他引：1  

赵晓鹏  马斌斌  孟永芳  谷建锋  魏强  赵晓娥  马保华 《农业生物技术学报》2012,20(12):1433-1440

为提高体外成熟山羊卵母细胞利用率,减少因卵母细胞老化而造成的质量下降,本研究通过彗星试验对体外成熟培养山羊(Capra hircus)卵母细胞的DNA受损程度进行研究。结果表明,随着成熟培养时间的延长,尤其是培养时间超过24h以后,卵母细胞的极体逐渐退化,其DNA损伤程度明显增加,卵母细胞凋亡和老化的现象越来越严重。在体外成熟培养24h之内,检测到极体的卵母细胞的比例随着培养时间的延长而显著增加(20h,(45.74±2.67)%;22h,(66.11±1.12)%),卵母细胞平均彗尾长度均小于100μm,其中有极体卵母细胞彗尾长度在0～50μm之间的比例(20h,(77.27±2.27)%;22h,(40.12±1.55)%)小于无极体卵母细胞(20h,(83.86±1.34)%;22h,(51.39±8.45)%)。体外成熟培养24h时,有极体的卵母细胞比例达到最高值(80.19±2.07)%,有极体和无极体卵母细胞的平均彗尾长度基本相同((96.08±4.52)μmvs(95.25±9.28)μm),有极体卵母细胞的彗尾分布主要以50～100μm((45.71±0.50)%)和100～150μm((35.45±2.92)%)区段为主,而无极体卵母细胞主要分布在0～50μm((30.92±4.02)%)和50～100μm((33.02±3.23)%)两个区段。当培养时间超过26h以后,有极体的卵母细胞比例显著下降(26h,(72.01±2.88)%;28h,(59.77±3.59)%);无论是有极体或无极体的卵母细胞,其平均彗尾长度都继续增加,彗尾长度分布在150μm以上的卵母细胞比例迅速增加。培养至30h时,有极体的卵母细胞比例下降至(46.34±2.07)%,其平均彗尾长度为(180.11±10.33)μm,彗尾长度分布在150μm以上的比例为(58.33±4.81)%;无极体卵母细胞平均彗尾长度为(270±17.72)μm,彗尾长度分布在150μm以上的比例为(80.95±2.38)%,均高于有极体卵母细胞。本研究结果表明,山羊卵母细胞在体外成熟后会逐渐老化,尤其是在成熟培养时间超过24h后,老化卵母细胞比例显著增加。本研究可使我们对卵母细胞老化的机理有了更进一步的了解和认识,有助于通过减少卵母细胞老化来提高卵母细胞的质量。  相似文献   

胚胎移植供受体山羊发情控制及配比问题的研究   总被引：9，自引：0，他引：9  

马保华  王光亚 《动物医学进展》1999,20(3):35-38

用含１８甲基炔诺酮６０ ｍ ｇ 的阴道海绵栓预处理１１３ 只供体羊 １４～１５ ｄ后注射 Ｆ Ｓ Ｈ 进行超排,３６ ｈ 或４８ ｈ 后撤栓。１９９ 只受体羊用含炔诺酮５０ ｍ ｇ 的阴道栓处理,撤栓时注射或不注射 Ｆ Ｓ Ｈ 进行同期发情。结果表明,供、受体羊发情开始距撤栓的平均间隔时间分别为（３３．９±９９） ｈ 和（４４．３±１６．１） ｈ（ Ｐ＜ ０．０５）,供、受体羊发情持续期长短相似（ Ｐ＞ ０．０５）。撤栓时注射 Ｆ Ｓ Ｈ ２５ Ｉ Ｕ 或 ３３ Ｉ Ｕ 的受体羊,卵巢上形成功能黄体的比率分别为６４．０％ 和 ６０．７％ ,显著高于不注射 Ｆ Ｓ Ｈ的受体羊（４２．２％ , Ｐ＜ ０．０５）。结论认为,用本研究采用的超排及同期发情程序,受体撤栓时间应与供体相同或早于供体羊１２ ｈ;受体羊撤栓时应注射 Ｆ Ｓ Ｈ ２５ Ｉ Ｕ;根据供体羊回收可用胚胎数及同期发情后可用受体数量,供、受体羊的适宜比例为１∶６～１∶８。  相似文献   

培养液充气标准气氧气比例及充气时间对小鼠胚胎密闭培养效果的影响     

谷建锋  魏强  赵晓娥  马保华 《农业生物技术学报》2013,21(7)

胚胎密闭培养是空间胚胎发育研究的基本条件,在胚胎密闭培养中,培养液适宜的氧含量对早期胚胎发育至关重要.本研究采用两种氧气比例不同的标准气和两个充气时长,对胚胎培养液进行标准气充气,研究标准气的氧气比例和培养液充气时间对密闭培养小鼠(Mus musculus)2-细胞胚胎体外发育的影响.胚胎密闭培养前,使用由5％O2,5％CO2,90％N2或7.5％O2,5％CO2,87.5％N2组成的高纯标准气对胚胎培养液分别充气120或150 min,以不充气密闭培养和常规微滴培养为对照组.在培养开始后24和48 h检测胚胎过氧化物；培养96和72 h时检测胚胎缺氧诱导因子-1 α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α);培养72和96 h时统计囊胚发育率和孵化率,并进行囊胚细胞计数.结果显示,利用氧气比例为7.5％的标准气对胚胎培养液充气120 min组和充气150 min组的胚胎在培养24 h时能够检测出过氧化物累积；5％O2标准气充气120min,5％O2标准气充气150 min和7.5％O2标准气充气120 min组胚胎,在培养96 h时可检测到HIF-1α阳性,而不充气密闭培养组在培养48 h时即可检测到HIF-1α阳性；5％O2标准气充气120或150 min,7.5％O2标准气充气120或150 min时,密闭培养胚胎均能获得较理想的囊胚发育率和孵化率.培养72 h时,5％O2标准气充气120 min组的囊胚发育率(92.63±0.89)％高于其他3个充气密闭培养组,但无统计学差异(P＞0.05),不充气密闭培养组囊胚发育率(57.04±10.04)％显著低于各充气密闭培养组(P＜0.05),微滴培养组囊胚发育率(98.67±1.33)％显著高于7.5％O2的标准气充气120 min组((87.15±2.35)％,P＜o.05).培养96 h时,各充气密闭培养组及微滴培养组囊胚发育率和囊胚孵化率无显著差异(P＞0.05),但均显著高于不充气密闭培养组(P＜0.05).各充气密闭培养组胚胎体外培养72h后,囊胚细胞数差异不显著(P＞0.05).培养96 h时,5％O2标准气充气120 min组密闭培养胚胎的囊胚细胞数(114.12±3.66)显著高于其他充气密闭培养组和不充气密闭培养组(P＜0.05),与微滴组(110.56±5.24)无统计学差异(P＞0.05).研究结果表明,使用由5％O2,5％ CO2和90％N2组成的标准气对胚胎培养液持续充气120～150min时,可较好地支持密闭培养小鼠2-细胞胚胎发育至囊胚阶段,并完成囊胚的孵化.本研究确定了小鼠2-细胞胚胎密闭培养适宜的标准气O2比例和充气时间,完善了胚胎密闭培养体系,为建立适宜于小鼠早期胚胎空间发育研究的密闭培养体系积累基础资料.  相似文献   

小鼠卵母细胞去核方法的改进     

贾洪响  马斌斌  魏强  赵晓娥  孟永芳  谷建锋  马保华 《农业生物技术学报》2014,22(9)

为摸索一种简单有效的小鼠(Mus musculus)卵母细胞去核方法,本研究对压电脉冲装置(Piezo)辅助显微操作条件下的小鼠中期Ⅱ(metaphaseⅡ,MⅡ)卵母细胞去核方法进行了改进,比较了改进的去核方法和常规去核方法,在无蔗糖或含蔗糖去核操作液中的去核效果及核移植重构胚的后续发育能力;用改进的去核法在无蔗糖的去核操作液中对卵母细胞进行去核,比较卵母细胞去核操作液及核移植操作液中添加不同浓度胎牛血清(FBS)时核移植重构胚的后续发育能力。结果显示,MⅡ期卵母细胞在无蔗糖和含3%蔗糖的去核操作液中通过调整显微镜物镜距离显示MⅡ期纺锤体区域的方法进行显核,显核率分别为98.4%(184/187)和98.7%(153/155)(P0.05)。在无蔗糖或含蔗糖的去核操作液中,用改进的去核法,即去核针穿过透明带后,紧贴MⅡ期纺锤体区域的质膜,施加负压将MⅡ期纺锤体区域吸住并将其直接拉出卵母细胞,去核率分别为84.6%和88.2%;用常规去核法在这2种去核操作液中去核,去核率分别为83.1%和88.6%,各组之间差异均不显著(P0.05);用改进的去核法比常规去核法吸出的胞质少。用改进的去核方法在无蔗糖的去核操作液中去核后,构建的核移植重构胚发育到8-细胞、桑椹胚和囊胚的比率最高,桑椹胚发育率(16.3%)和囊胚发育率(5.8%)显著高于用该法在含蔗糖的去核操作液中去核组(5.1%和0)。用常规去核法在无蔗糖操作液及含蔗糖操作液中去核后,核移植重构胚的桑椹胚发育率分别为3.3%和1.2%(P0.05),且均未获得囊胚发育。去核操作液和核移植操作液中添加20%FBS时,重构胚囊胚发育率显著高于添加10%FBS组(10.9%对4.9%)(P0.05),表明用改进的去核方法在添加20%胎牛血清(FBS)的操作液中进行去核及核移植操作是可行的,而且对重构胚后续发育的支持能力较好。本研究为进一步提高小鼠体细胞核移植效率做出了有益的探索。  相似文献   

禽流感大流行的威胁     

鄢志强  张辉华  马保华  吕平 《畜牧兽医科技信息》2005,(4):14

在上世纪1918、1957、1968年分别发生了三次流感大流行，虽然这三次流感流行的剧烈程度和原发年龄群不同，但每一次的流行都是由一种新的、禽源A型流感病毒引起。1957年和1968年流行的新型流感病毒都含有以前的人流感病毒和禽流感病毒的成份。流感病毒基因组由八个RNA片段构成，对这两次流感大流行的回顾可以确定，在禽流感病毒和人流感病毒间进行了重组，这很可能是由于两种不同的流感病毒共同感染同一宿主导致的。  相似文献   

不同月份产羔母羊泌乳期生殖激素与生长激素监测     

赵晓娥  张静  高臻  孙念琴  徐明辉  李延华  马保华 《畜牧与兽医》2021,(2):56-60

为了解不同月份生产的奶山羊泌乳期生殖激素与生长激素(GH)变化规律,随机抽取1、3、5和8月份分娩的奶山羊各10只,于分娩后0 d、7 d、1~8个月(每月的第15天)时采集母羊静脉血,分离血清,采用ELISA试剂盒检测母羊外周血中催乳素(PRL)、卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌激素(E₂)、孕酮(P₄)和GH水平变化。结果显示:不同月份产羔母羊泌乳期间外周血中同一激素的动态变化趋势一致;在整个泌乳期间,1、3、5、8月份产羔母羊PRL、FSH、LH、P₄、E₂、GH含量的动态变化范围分别为446.17~221.72 ng·L^-1、9.49~3.82 U·L^-1、351.17~218.16 pg·mL^-1、4086.83~3568.15 pmol·L^-1,33.74~22.30 ng·L^-1、30.36~11.57μg·L^-1;不同月份产羔母羊外周血中GH水平在相同泌乳期均无显著差异(P>0.05),FSH水平在0 d有显著差异(P<0.05),P₄水平在8个月时有显著差异(P<0.05),PRL水平在泌乳的0 d和2、3、8个月时有显著差异(P<0.05),LH水平在泌乳的0 d、2个月时有显著差异(P<0.05),E₂水平在泌乳0 d、3个月和8个月时有显著差异(P<0.05)。结果表明:奶山羊产羔月份的不同对泌乳期间的激素水平有一定的影响,但动态变化趋势一致。  相似文献   

肉羊密集繁殖体系的设计与应用效果预测研究     

王永军  田秀娥  陈玉林  马保华 《家畜生态》2007,(1)

为了稳步推进宁夏农垦企业集团百万肉羊产业化生产,根据宁夏农垦地理生态条件、肉羊品种资源和饲料资源情况、母羊的繁殖性能特点以及规模化羊场的管理能力、设备条件和技术水平等具体情况,按照从实际出发、因地制宜的基本原则,选择两年三胎密集繁殖体系作为宁夏农垦规模化羊场最适宜的繁殖方式;同时,从生产节律的确定、生产单元的组建、配种方式的选择、配种和产羔计划的制定等4个方面对两年三胎密集繁殖体系的具体实施方案进行了系统研究。  相似文献   

供受体羊发情同期化程度对胚胎移植效果的影响   总被引：3，自引：0，他引：3  

和力新  马保华  张红  邓小东  曹冶  李红  周洪群  李键 《四川畜牧兽医》2004,31(6):23-24

将2008枚鲜胚移植给1146只受体羊,移植单胚和双胚的受体总妊娠率为63.1r3/1146,移植胚胎成羔率为52.861/2008。结果表明供、受体发情同步差在 1～ 0.5d、0d和-0.5～-1d时,移植单胚的受体妊娠率和胚胎成羔率没有明显的差异P>0.05;移植双胚的受体差异显著P<0.05,同步差为0d时的胚胎移植效果最好。移植双胚的受体中,奶山羊受体与供体同步差为-0.5～-1d和0d时,胚胎成羔率显著高于同步差为 1～ 0.5d的受体P<0.05;成都麻羊与供体同步差在 1～ 0.5d、0d和-0.5～-1d时,其胚胎成羔率均有显著差异P<0.05;南江黄羊和大耳羊做受体时,供、受体同步差在 1～ 0.5d、0d和-0.5～-1d时进行胚胎移植,胚胎成羔率无统计学差异。  相似文献