抗原捕获ELISA对猪瘟的诊断效果   总被引：4，自引：0，他引：4  

高华峰 单于乃纯姚俊  解天珍 《中国兽医科技》2003,33(7):48-50

应用抗原捕获ELISA方法分别对现行猪瘟疫苗毒及接种疫苗后产生定型热的兔脾、不同地区可疑猪瘟组织样品进行检测。结果表明，ELISA方法对猪瘟强毒组织样品的检测效果良好，但对弱毒的检测并不敏感，因而可用于野毒感染鉴别。  相似文献   

鸡慢性呼吸道病的综合防制   总被引：2，自引：0，他引：2  

宋建领  杨斌  王金萍  丛佩清  张永仙  邱纯 《云南畜牧兽医》2002,(2):9-10

鸡毒霉形体感染常称为鸡慢性呼吸道病,是鸡的一种常见多发性传染病.该病在规模化鸡场中的分布广泛,危害很大,各种日龄鸡只都可感染发病,使鸡群的淘汰率上升,产蛋率下降,发育受阻.感染鸡群常常出现免疫抑制,容易继发或伴发其他疾病[1].  相似文献   

禽流感病毒M1蛋白表(拟)位定位及免疫检测分析     

宋建领  张富强  李华春  杨仕标  王金萍 《中国预防兽医学报》2012,34(9):732-735

为对禽流感病毒(AIV)M1蛋白表(拟)位进行分析,本研究采用针对AIV M1蛋白的型特异性单克隆抗体(MAb),淘选M13噬菌体展示的7肽随机肽库,进行M1蛋白表(拟)位分析。筛选获得共有序列MDRxL或HPR,定位于M1蛋白93～99位(93MDRAVKL99)和222～230位(222HPNSSAGLR230)氨基酸区域。采用ELISA、竞争性ELISA分析不同噬菌体拟位与抗M1的MAb免疫反应性,表明含有MDRxL或HPR基序的噬菌体拟位能够与MAb发生特异性结合,并且其结合能够被天然病毒抗原抑制或阻断,表明拟位多肽真实模拟病毒蛋白上与MAb结合的抗原决定簇或表位,提示M1蛋白93～99位(93MDRAVKL99)和222～230位(222HPNSSAGLR230)氨基酸区域构成AIV型特异性表位。  相似文献   

流行性出血病病毒(EHDV)血清7型毒株在中国的首次分离与鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

杨振兴  孟锦昕  肖雷  朱建波  廖德芳  高林  李占鸿  杨恒  李华春 《畜牧兽医学报》2019,(3):602-610

流行性出血病(EHD)是由流行性出血病病毒(EHDV)感染反刍动物引起的一种虫媒病毒病,为了解中国云南EHDV的感染情况和病毒遗传特征,笔者课题组在云南省师宗县以EHDV血清学和核酸阴性的牛、羊为哨兵动物,拟对流行于云南省的EHDV进行分离与鉴定。将采集于哨兵动物的EHDV核酸阳性血液接种BHK-21细胞进行病毒分离;通过血清中和试验与病毒Seg-2、Seg-3 ORF区的序列分析,确定病毒的血清型与遗传特征;采用C-ELISA和qRT-PCR方法对EHDV感染动物血液中的抗体水平与病毒核酸进行监测。结果如下:从2013年8月采集自云南师宗县哨兵牛的血样中分离出一株EHDV(毒株号YNSZ/V269/2013),血清中和试验结果表明分离的病毒为血清型7型(EHDV-7);Seg-2、Seg-3序列分析表明分离的病毒属EHDV-7 Eastern型,与日本毒株和澳大利亚EHDV-7型毒株具有最近的亲缘关系。哨兵动物病毒核酸转阳后,血清抗体迅速上升,3周后达最高点并能在该水平持续较长时间,而病毒核酸含量却迅速下降,7周后已经检测不到。本研究首次报道了EHDV-7型毒株在中国的分离、毒株序列特征以及在动物上的感染特性。研究结果可为进一步开展中国EHDV-7型病毒的全基因组测序、流行病学调查、诊断方法的建立和致病性等相关研究提供基础。  相似文献   

猪瘟病毒云南毒株E2基因片段序列测定及分析   总被引：9，自引：0，他引：9  

尹革芬  朱建波  姚俊  高华峰  信爱国  张念祖 《中国预防兽医学报》2001,23(3):167-169

用RT－nPCR方法，选择猪瘟病毒2000年云南部分地方流行毒株E2基因主要保护性抗原决定簇编码区片段进行扩增和cDNA序列分析，并与中国标准强毒石门株进行比较。结果显示，云南地方毒株之间核苷酸及氨基酸序列同源性均大于90％；但与中国标准强毒石门株差异较大，其核苷酸及氨基酸同源性均小于80％。  相似文献   

小反刍兽疫病毒H基因在杆状病毒中的表达     

高华峰  信爱国  高林  杨仕标 《中国动物传染病学报》2012,(1):43-46

从小反刍兽疫病毒全长cDNA中对血凝素蛋白H基因进行特异扩增,回收PCR产物分别连接于T载体酶切及测序分析后,将其亚克隆至真核表达转移载体pFastBacHT,经重组筛选获得杆状病毒重组质粒。重组质粒转染sf9细胞后连续传3～4代,分别收获细胞上清及沉淀用于SDS-PAGE及Western blot对重组H蛋白的检测,用抗His蛋白单抗在细胞中检测到H标签蛋白,单抗在细胞及上清中检测到大小为46 ku的融合蛋白。  相似文献   

云南边境O型口蹄疫监测及病毒VP1基因序列分析     

胡媛媛  张文东  宋建领  赵焕云  吕粤  岳亮  张应国  李作生  范泉水  张富强 《畜牧与兽医》2008,40(4):1-6

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的主要侵袭偶蹄动物的一种急性热性高度接触性传染病。口蹄疫病毒为微RNA病毒科口蹄疫病毒属成员,存在7个不同血清型,病毒VP1蛋白抗原性差异是病毒血清型划分依据,而其编码基因(1D)核苷酸序列差异是同型病毒拓扑型(Topotype)或基因型鉴别依据。采用O/A/C/Asia-1多重RT-PCR技术,对2006年自云南边境地区采集的120份动物组织样品,进行口蹄疫病原监测,检出O型口蹄疫病毒阳性样品15份。对阳性样品中病毒VP1基因全序列进行扩增、纯化后,克隆至pMD18-T载体测序,并与已知代表性毒株进行比对及系统发育分析。结果发现:云南边境O型口蹄疫病毒阳性样品VP1基因核苷酸序列同源性介于77.3%~98.7%,可划分为3个不同的拓扑型或基因型:中东-南亚型(ME-SA)或泛亚型(PAN-Asia)、古典中国型(Cathay)、东南亚型(SEA)。部分样品VP1蛋白表位43位、154位关键性氨基酸位点存在变异。  相似文献   

小反刍兽疫灭活抗原RT-PCR检测方法的建立及其相关序列分析     

赵文华  杨仕标  朱建波  肖雷  李华春  张念祖 《动物医学进展》2008,29(11)

以灭活的检测用抗原为材料,抽提灭活小反刍兽疫病毒的基因组RNA作为模板,根据参考文献及GenBank下载的序列,设计3对位于F基因的引物(2对为套式引物),进行RT-PCR扩增及扩增片段的T载体克隆、序列分析。结果显示,所设计引物单独或套式RT-PCR对模板均有预期大小的片段扩增;扩增片段经核苷酸序列测定和分析,表明所扩增片段为小反刍兽疫病毒的F基因片段。且所设计引物对同属牛瘟病毒、犬瘟热病毒无扩增,证明所用引物为小反刍兽疫病毒特异性引物,此3对引物可用于小反刍兽疫与牛瘟等同属病毒的鉴别诊断。  相似文献   

云南边境地区流行性出血热病毒血清学监测及血清型鉴定     

寇美玲  杨振兴  李乐  朱建波  高林  苗海生 《中国畜牧兽医》2019,(10)

为了解近几年云南边境地区牛、羊流行性出血热病毒(EHDV)的感染和流行情况,本研究从2014年起连续3年在与老挝、越南接壤的江城县设置EHDV监测点,每年选择投放EHDV抗体阴性的10头牛和5只山羊作为哨兵动物进行跟踪监测。每年5～10月份对哨兵动物采血,每周1次,11、12月每月采集一次,进行EHDV抗体、抗原监测和病毒分离。针对致细胞病变的样品,采用EHDV群特异性S7基因片段引物进行RT-PCR方法检测,同时利用EHDV-1、-5、-6、-7、-10标准阳性血清对分离到的病毒进行中和试验鉴定。结果显示,2014-2016年江城县牛EHDV抗体阳性率分别为41.9%、58.6%和75.4%;3年期间共监测到15头EHDV抗体阳性黄牛,并从中分离到20个可致细胞病变样品,经RT-PCR确认为EHDV,遗传进化分析发现有11个毒株与1997和2003年日本分离的EHDV毒株亲缘关系较近,9个毒株与1977和1981年澳大利亚分离的EHDV毒株亲缘关系较近,5个毒株与2015年广西分离株的亲缘关系较近;3年期间在山羊体内未检测出抗体,未发现抗原阳性动物;经中和试验血清型鉴定,确定20株毒株包括EHDV-5、-6、-7、-10型4种血清型,感染时间均在5～9月之间。本研究发现,江城县长期存在多种血清型EHDV同时流行,2014-2016年EHDV抗体阳性率逐年增加,亟需加强对EHDV感染情况及活动规律的持续研究,提高流行性出血热的防控效率。  相似文献   

断奶仔猪多系统衰竭综合征     

高华峰  浦仕飞 《云南畜牧兽医》2005,(2):6-7

断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)是一个新出现的疾病,该病主要由圆环病毒科的猪PCV2病毒引起,发病日龄为25～120d,其中60～80日龄发病率最高。PMWS的最终确诊需满足以下三个条件:(1)存在PMWS相关临床症状;(2)出现特征性的显微病理损伤;(3)在满足以上两个条件时有圆环病毒2型(PCV2)存在。这三个标准对PMWS的诊断缺一不可,如仅仅检测到PCV2只表明存在PCV2感染而不能确定为PMWS。  相似文献