狂犬病病毒ERA株糖蛋白基因的克隆与序列分析     

高明华  张志琰  樊庆徳  杨晓刚  夏咸柱 《中国兽医杂志》2010,46(8)

根据GenBank中已发表的狂犬病病毒G基因序列,设计合成了1对特异性引物,对RV ERA株G基因进行了RT-PCR扩增。将PCR产物纯化后与pMD18-T连接得到重组质粒pMD-G,并进行核苷酸序列测定。结果该基因全长1 575bp,编码524个氨基酸。与GenBank中已发表的其他RV标准毒株(CVS,PV,SRV9,SAD-B19)相比,G基因核苷酸的同源性为89.1%～99.1%,推导的氨基酸序列的同源性为89.7%～99.3%。对推导的RV ERA株G蛋白氨基酸序列分析表明,该蛋白含有3个潜在的N-联糖基化位点。用DNAStar软件对RV ERA株与CVS、SRV9、PV、SAD-B19等G蛋白疏水性、Jame-son-Wolf抗原表位和表面极性分析表明,它们之间非常相似。  相似文献   

绵羊放线菌病2例     

高明华 《中国兽医杂志》1991,(5)

1986年春,在满州里市发现2例绵羊放线菌病,报告如下。临床检查:绵羊2只均为3岁半,营养状况一般,其中1只左侧颜面部明显隆起,在皮肤上有3个瘘管,不时向外排出脓汁,  相似文献   

绵羊肺炎支原体P110/LppT黏附素家族保守区的原核表达和免疫原性分析     

徐春光  郝永清  刘波  高明华  李艳 《中国兽医杂志》2023,(6):29-37

绵羊肺炎支原体(Mo) NM2010株的P120蛋白与猪肺炎支原体(Mhp)的黏附素P110高度同源，同属于P110/LppT黏附素N端结构域家族。为了筛选用于研制广谱绵羊支原体肺炎疫苗的保护性抗原，本试验利用生物信息学方法对Mo NM2010株P120蛋白的保守区段、结构、B细胞抗原表位进行预测分析，并对P120基因的N端和C端2个保守区基因片段进行克隆、表达、可溶性分析和抗原特性分析；2个表达产物分别对兔进行免疫试验，用ELISA方法检测免疫兔血清抗体效价和IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ细胞因子浓度。结果显示，P120蛋白N端有信号肽和1个跨膜螺旋，亚细胞定位在外膜，可能是一种外膜蛋白，P120蛋白N端和C端2个保守区段均有较多B细胞线性抗原表位，具有较好的抗原性；经序列测定证实，合成的P120-N和P120-C 2个基因片段的基因序列完全正确，长度分别为1 509 bp和741 bp,表达的重组蛋白分子质量分别为58.1 kDa和29.5 kDa; P120蛋白N端以可溶和包涵体2种形式存在，C端以包涵体形式存在，均具有良好的抗原性；新西兰大白兔经4次免疫后，重组蛋白...  相似文献