SjFer与GM-CSF共表达核酸疫苗对小鼠免疫保护效果的研究     

陈尔曼  黄复深邱元 郝知友 《农业生物技术学报》2007,15(4)

【摘要】：目的 探讨粒细胞集落刺激因子(GM-CSF)对日本血吸虫铁蛋白核酸疫苗抗攻击感染免疫保护力的影响。 方法 以pGEX-5x-3/SjFer为模板，PCR扩增SjFer，以小鼠总RNA为模板RT-PCR扩增GM-CSF。常规方法构建SjFer/pc、GM-CSF-SjFer/pc及GM-CSF/pc。85只雌性供试小鼠随机分为5组，即生理盐水、pcDNA3.0、GM-CSF/pc、SjFer/pc、GM-CSF-SjFer/pc组，每组小鼠17只。于0，2，4周注射纯化质粒50 ug/次到每只小鼠左后肢股四头肌。每次免疫前尾静脉采血收集血清，ELISA检测血清内特异性IgG水平。末次免疫后一周每组随机选5只小鼠无菌取脾，MTT法检测淋巴细胞增殖情况。末次免疫后两周每只经腹部感染(40±1)条尾蚴，45 天后宰杀小鼠，以观察减虫率和减卵率。结果 SjFer/pc和GM-CSF-SjFer/pc均可诱导小鼠血清内特异性IgG水平。SjFer/pc和GM-CSF-SjFer/pc诱导小鼠产生的减虫率分别为36.27 ％和39.22 ％，减卵率分别为36.10 ％和49.04 ％。结论 GM-CSF对SjFer/pc的免疫保护力有增强作用。  相似文献   

植物基因工程疫苗研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

黄复深  袁鑫  邱元 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2008,34(2):215-220

植物基因工程疫苗是现代疫苗学研究中的一个热点,它具有价廉、安全、有效、易于运输与保存等优点.综述了国内外植物基因工程疫苗在临床应用、表位疫苗学研究和表达体系方面的研究进展.  相似文献   

猪胸膜肺炎放线杆菌ftsW基因的克隆和分析     

陈尔曼  邓宗云  郭慧芝  黄复深  黄亚斌 《畜牧兽医科技信息》2018,(9)

目的:了解猪胸膜肺炎放线杆菌ftsw基因及其表达蛋白的结构、功能和进化趋势,为研究猪胸膜肺炎有效防治药物提供科学依据。方法:根据GenBank报道的有关序列,设计引物一对,用常规方法提取细菌基因组DNA,PCR扩增App ftsw基因并测序,所得序列在线进行生物信息学分析。结果:App的ftsw基因全长606bp,含一个开放阅读框(ORF),起始密码子为ATG,终止密子为TTT,编码201个氨基酸,为一跨膜蛋白,具肽聚糖糖基转移酶的功能。APP不同血清的Ftsw同源性达100%。结论:FtsW蛋白在APP各血清型的同源性甚高,FtsW可能成为广铺药物的靶点和新的疫苗候选分子。  相似文献   

GM-CSF与猪瘟病毒E2基因共表达载体的构建及其诱导的免疫应答   总被引：1，自引：1，他引：1  

邱元  黄复深  陈尔曼  郝知友  袁鑫 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2007,33(2):200-204

为探讨粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)对猪瘟病毒E2基因核酸疫苗小鼠免疫应答诱导的影响,将CSFVE2基因和GM-CSF片段插入真核表达载体pcDNA3.0内构建pcE2,pcE2-GF及pcGF核酸疫苗.动物试验时,50只雌性供试小鼠随机分为5组,即pcE2,pcE2-GF,pcDNA3.0,pcGF,生理盐水组,每组10只.0,2,4周于小鼠左后肢胫前肌进行肌注免疫,质粒量为每只每次50μg.每次免疫前和末次免疫后2周尾静脉采血收集血清,ELISA检测血清内特异性IgG水平.末次免疫后1周每组随机选3只无菌取脾,MTT法检测淋巴细胞增殖情况.结果表明,与对照组比较,pcE2和pcE2-GF第3次免疫2周后,免疫小鼠IgG抗体水平逐渐增高,淋巴细胞的转化率也明显增高,且pcE2-GF免疫组的IgG抗体水平和淋巴细胞的转化率高于pcE2免疫组.可见,细胞因子GM-CSF可有效提高猪瘟病毒E2基因核酸疫苗的免疫应答.  相似文献   

重组猪胸膜肺炎放线杆菌NLPI蛋白诱导小鼠抗攻击感染的免疫保护力研究     

杨婷婷  黄复深  张雨龙  张宇航  李宏 《农业生物技术学报》2018,(8)

猪传染性胸膜肺炎(porcine contagious pleuropneumonia,PCP)是猪(Sus scrofa)的一种呼吸道疾病,影响世界养猪业,其病原菌为猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP),现有疫苗由于保护效果不甚理想,因此有必要寻找新的疫苗候选分子。本研究检测了猪APP重组NLPI蛋白(recombinant NLPI,rNLPI)的免疫保护作用。根据Gen Bank中已报道的APP nlpi基因序列设计引物对,然后以APP的基因组为模板PCR扩增nlpi基因,测序后进行生物信息学分析,发现该基因(Gen Bank No.:MH027649)由900 bp组成,编码1个含299个氨基酸的蛋白质,为一外膜脂蛋白,此外膜蛋白在多种APP血清型之间具有很高同源性。将nlpi基因亚克隆至p ET32a(+)载体,转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3),用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达APP rNLPI,并经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDSPAGE)和蛋白质印迹(Western blot,WB)确认。结果表明,在34 k D处有特异性条带,可被相应的阳性血清识别。动物保护实验采用BALB/c小鼠(Mus musculus)进行,酶联免疫吸附法(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)用于测定免疫球蛋G(immunoglobulin G,IgG)抗体滴度。结果表明,弗氏不完全佐剂+50μg rNLPI、弗氏不完全佐剂+30μg rNLPI、弗氏不完全佐剂+10μg rNLPI、30μg rNLPI免疫后,可诱导小鼠分别产生40%、20%、10%和20%的存活率;佐剂组和生理盐水对照组存活率为0。幸存小鼠慢慢恢复健康,并正常采食。可见,rNLPI皮下免疫可诱导小鼠产生免疫应答和较高的抗攻击感染的免疫保护力。该研究结果为进一步筛选猪传染性胸膜肺炎分子疫苗积累了基础资料。  相似文献   

无公害养鸡技术     

黄复深 《湖南农业》2006,(2):18-18

无公害养殖有利于保障食品安全,适应国内外市场的需要。产地必须具备良好的生态环境,合理地使用兽药,因而可将终端产品中有害物质的残留降低到最低的限度,生产过程中必须科学合理地使用限定的兽药、饲料添加剂,禁止使用对人体和环境造成危害的化学物质。无公害养鸡必须注意以下几点。1.选择好种鸡选择生长性能好、耐粗饲、抗病力强、产蛋率高、蛋的品质好、肉质细嫩、味道鲜美可口的优良品种,包括本地品种和杂交品种,如三黄鸡等。商品代雏鸡应来自通过有关部门验收核发的父母代种鸡场或专业孵化厂,不携带鸡白痢、禽白血病和霉形体等传染性疾…  相似文献   

鱼类无公害养殖技术(上)     

陈尔曼  黄复深 《湖南农业》2006,(3):20-20

随着人们生活水平的提高,人们对鱼肉的要求除了讲究可口和营养外．对其安全质量指标更是非常关注．消费绿色无公害健康食品已成为一种趋势。但是有一些鱼产品不能达到绿色消费的要求．如有些鱼肉食用时有一股煤油味,这是因水体中酚类含量超标所造成。人食用过多可引起酚中毒,因此．倡导鱼类的无公害养殖也成为一种趋势。所谓无公害鱼产品是指有毒有害物质含量或残留量控制在安全要求允许范围内．不会对人体或环境造成伤害的鱼产品。那么如何进行鱼类的无公害养殖呢？  相似文献   

浏阳黑山羊胰吸虫病和血矛线虫病病理形态学研究     

黄复深  刘毅 《湖南农业大学学报(自然科学版)》1998,24(1):72-75

为探讨浏阳黑山羊胰阔盘吸虫病和捻转血矛线虫病的致病规律，进行了这两种寄生虫病的病理形态学研究。结果表明，浏阳黑山羊胰阔盘吸虫所致胰导管的病变分为３种类型：慢性增生性炎，腺体增生性炎以及由于虫体大量寄生时所致的胰导管壁的萎缩，捻转血矛线虫所致真胃的病变分为腺体增生性胃炎，腺体瘤样增生性胃炎和化脓性胃炎３种类型，这３种病变与寄生虫寄生的多少似无明显的对应关系。  相似文献   

多杀性巴氏杆菌细胞分裂相关基因的筛选     

吴丽梅  许文博  黄复深 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2021,47(3):332-337

为探讨多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)细胞分裂的分子机制,从GenBank下载不同宿主不同血清型Pm的全基因组,利用生物信息学在线分析方法筛选与Pm细胞分裂相关蛋白的编码基因,并鉴定含minC的操纵子.结果表明:发现33个与Pm细胞分裂相关蛋白的编码基因,其中14个为不同菌株的共有基因...  相似文献