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以猪瘟病毒5＇端非编码区为靶核酸序列设计引物和探针，建立了一步法荧光RT-PCR检测猪瘟病毒。荧光RT-PCR仅检测出猪瘟C株、T株，未能检测出牛病毒性腹泻病毒（BVDV）、猪呼吸系统冠状病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪细小病毒、伪狂犬病病毒、猪生殖与呼吸综合征病毒、PK-15细胞和牛睾丸原代细胞；对猪瘟病毒T株的扩增反应产物进行了测序分析，与预期序列相符。荧光RT-PCR的检测极限可达到1 TCID50／mL，整个试验流程只需2h。采用荧光RT-PCR和抗原捕获ELISA同时检测临床病料、猪副产品共207份样本，两种方法的检出率分别为17．4％和13．5％，两者符合率为95．7％（198／207）；荧光RT-PCR的检出率高于ELISA，两者差异显著。结果表明，建立的荧光RT-PCR可用于猪产品、临床病料中猪瘟病毒的快速检测。 相似文献
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为建立快速高通量检测实验动物质量相关布鲁菌、沙门菌、弓形虫3种病原体的方法,根据其序列设计引物及探针,探针经修饰后与荧光编码微球偶联,将偶联后的探针与PCR产物杂交反应,通过液相芯片检测仪(Luminex200)检测荧光信号,分析实验动物感染布鲁菌、沙门菌和弓形虫的情况。结果显示:初步建立了可同时检测布鲁菌、沙门菌和弓形虫的液相芯片检测方法,可特异地检测出3种目标病原的基因荧光信号,未检测出其他相关病原基因荧光信号;检测灵敏度达50拷贝/反应。本研究所建立的液相芯片检测方法可快速检测3种实验动物相关重要人兽共患病原体,对公共安全卫生保障、进出境实验动物检疫具有重要意义。 相似文献
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本研究旨在筛选低细胞毒性和低弓形虫毒性的有机溶剂。Vero细胞在96孔板培养12 h后，将培养基更换为200μL分别含0、0.1%、0.3%、0.5%、1%、3%、5%、10%（V/V）的二甲基亚砜（DMSO）、二甲基甲酰胺、乙醇和甲醇的完全培养基，同时设立空白对照孔，继续培养12和24 h后，采用噻唑蓝（MTT）法评价4种有机溶剂对Vero细胞增殖活力的影响，筛选出对宿主细胞毒性最小的有机溶剂并确定其安全浓度；弓形虫接种Vero细胞12 h后，弃上清后分别加入含有0、0.1%、0.3%、0.5%、1%、3%（V/V）的DMSO、二甲基甲酰胺、乙醇和甲醇的完全培养基120μL，接种36 h后判定各组溶剂对弓形虫增殖的影响，计数感染细胞数并计算相对感染率，筛选出对弓形虫增殖影响最小的有机溶剂及其安全浓度。结果显示，对于Vero细胞，DMSO、二甲基甲酰胺、甲醇和乙醇分别在其体积分数低于1%、0.1%、3%和1%时无明显毒性；对于弓形虫，DMSO、二甲基甲酰胺、甲醇和乙醇对弓形虫增殖的安全添加浓度分别为1%、0.1%、1%和0.1%。本研究表明，DMSO、甲醇对Vero细胞、弓形虫的毒性较小，可作为水溶性较差药物进行抗弓形虫筛选时优先选择的有机溶剂。 相似文献
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为识别并及时防范进境SPF鼠携带病原传入的风险,根据《一、二、三类动物疫病病种名录》《中华人民共和国进境动物检疫疫病名录》以及相关公告、国家标准和国际组织要求,通过风险识别确定汉坦病、淋巴细胞脉络丛脑膜炎、鼠痘、小鼠肝炎和仙台病毒病等5种疫病会带来一定风险。从病原学特征、疫病发生、易感动物、传播途径等方面进行5种疫病的定性评估,使用风险评估矩阵确定综合风险水平,认定这5种疫病传入风险较高,传入后果较为严重。因此,应对这5种疫病实施重点监测,同时采取相应的风险管理措施,重点包括加强出口国相关动物卫生证书审核,提高隔离场管理水平,增强SPF实验鼠卫生和健康管理意识。 相似文献
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