鹅源H9N2亚型禽流感病毒PB2和PB1基因序列分析     

付薇  覃芳芸  马琳  徐贤坤  黄胜斌  易春华  孙翔翔  何奇松  蒋家霞  熊毅 《动物医学进展》2011,32(5):49-53

采用RT-PCR方法对1株鹅源H9N2亚型禽流感病毒(GS/GX/01/07)RNA聚合酶基因PB2和PB1分别进行了扩增,将其克隆到pMD18-T载体后进行序列测定与分析.结果表明,该株病毒的PB2、PB1开放阅读框(ORF)分别由2 280和2 277个碱基组成,分别编码759和758个氨基酸.经同源性和系统进化树...  相似文献   

O型口蹄疫病毒VP1基因及其多表位基因的原核表达与纯化鉴定          下载免费PDF全文

何奇松  陈磊  颜健华  许瑞胜  易春华  韦达有  冯淑萍  黄胜斌  梁晟 《南方农业学报》2016,47(3):472-477

[目的]通过原核表达并纯化获得O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因及其多表位基因的重组蛋白,为建立O型FMDV抗体ELISA检测试剂盒及制备动物高免血清提供技术支持.[方法]以O型FMDV VP1全基因重组质粒pMD18-T-T-VP1及串联的ⅥP1多表位基因重组质粒pMD 18-T-O-VP1为模板,通过特异性引物扩增并回收目的基因,构建重组质粒pET-32a-VP1和pGEX-6p-1-VP1,然后转入大肠杆菌BL211 (DE3)中诱导表达,并以SDS-PAGE和Western blotting对融合蛋白进行分析鉴定.[结果]O型FMDV的VP1基因及其多表位基因在大肠杆菌BL21(DE3)中得到正确表达,表达的两种融合蛋白主要以包涵体形式存在,纯度较高,且均能与猪抗O型FMDV阳性血清发生特异性结合,具有良好的反应原性.[结论]表达获得的融合蛋白具有良好的反应原性,可作为包被抗原应用于O型FMDV抗体检测试剂盒研发.  相似文献   

广西部分规模种猪场猪伪狂犬病病毒gE抗体调查     

何奇松  ;胡巧云  ;冯淑萍  ;黄胜斌  ;熊毅  ;刘棋  ;陈田姣 《广西畜牧兽医》2014,(4):193-195

为了解广西部分种猪场猪伪狂犬病毒(PRV)的感染情况,2013年1月—2013年12月对18个不同规模种猪场送检的2 793份血清样品,采用法国LSI猪伪狂犬病毒gE基因抗体检测试剂盒进行检测,发现猪伪狂犬病gE抗体阳性138份,总阳性率为4.94%,其中四个猪场检出PRV野毒感染。研究表明,广西部分猪群中存在PRV感染,感染率不一,某些猪场感染率相对较高。  相似文献   

应用PCR技术对广西规模猪场母猪流产病料主要疫病混合感染的流行病学调查   总被引：3，自引：0，他引：3  

黄夏  覃芳芸  陈义祥  黄胜斌  胡丽萍  陈芳芳  赵国明 《养殖与饲料．饲料世界》2007,(11):23-25

应用PCR和RT-PCR技术,对2005-2006年送检的广西22个规模猪场的母猪流产病料176份进行猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合症病毒（PRRSV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪细小病毒（PPV）混合感染情况的调查。结果,176份病料中检出CSFV阳性样品21份,阳性率11.9%,PRRSV阳性样品37份,阳性率21.0%,PRV阳性样品14份,阳性率8.0%,PPV阳性样品35份,阳性率19.9%;其中有45份样品存在不同程度的混合感染,混合感染阳性率达25.6%。结果表明,我区规模猪场母猪流产病料CSFV、PRRSV、PRV和PPV的感染和混合感染情况比较严重,提示广西近年来母猪发生繁殖障碍性疾病的病因与CSFV、PRRSV、PRV和PPVSV的感染密切相关,是今后广西规模猪场重点防范的主要疫病。  相似文献   

两种奶牛结核病检测方法的比较     

徐贤坤  黄小武  蓝纪  黄胜斌  熊毅  刘棋  韦正吉  黄益泓 《畜牧与兽医》2010,42(2)

本研究中采用常规皮内变态反应(TST)对广西南宁、柳州共计2 818头黑白花奶牛进行牛结核病检测,采用抗原特异性IFN-γ试验方法对PPD检测结果为阳性、可疑的牛以及部分阴性牛进行复检。将抗原特异性IFN-γ试验与TST检测结果相比,其敏感性为53.33%,特异性为70.49%,符合率为67.11%。本研究证实单独使用PPD皮内变态反应方法在牛结核病的诊断方面存在非特异性强等缺点,易造成假阳性牛的误杀;用抗原特异性IFN-γ试验对TST试验阳性和可疑牛进行复检可以提高特异性,该方法在临床上有重要应用价值。  相似文献   

广西区马传染性贫血监测报告     

韩银华  胡丽萍  周庆安  何奇松  熊毅  莫胜兰  黄胜斌 《广西畜牧兽医》2021,37(2):70-70

2018年和2019年广西区动物疫病预防控制中心分别对广西南宁、贵港、防城港、柳州、河池、来宾、百色和桂林8个市进行马传染性贫血的抽样调查.重点监测养马场、马术队、马属俱乐部等的马匹及骡等马属动物.两年共采集马血清5050 份、骡血清842 份,经马传染性贫血琼脂凝胶免疫扩散试验检测均为阴性.结果表明,马传染性贫血在以...  相似文献   

广西鹅α干扰素基因的克隆与序列分析     

付薇  蒋家霞  孙翔翔  易春华  何奇松  马琳  徐贤坤  黄胜斌  熊毅 《广西农业科学》2010,41(12):1335-1338

根据GenBank上已发表的东北白鹅α干扰素（IFN-α）基因（AY524422）序列设计1对特异性引物,采用RT-PCR从经鹅副粘病毒（GPMV）刺激培养的鹅外周血淋巴细胞中克隆获得广西鹅IFN-α基因,将其连接pMD18-T载体、转化DH5α感受态细胞后进行序列分析.结果表明,广西鹅IFN-α基因完整的开放阅读框大小为576 bp,共编码192个氨基酸残基,其推导的氨基酸中有7个半胱氨酸残基和2个潜在的糖基化结合位点（NDT和NHT）.与GenBank上已公布的其他IFN-α基因进行同源性比较分析,发现广西鹅IFN-α基因与东北白鹅的同源性最高（核苷酸同源性为98.3%、氨基酸同源性为96.4%）,与鸡、牛、猪、鼠、犬、人等的同源性较低.说明IFN具有种属特异性,且亲缘关系越近同源性越高,这与物种之间的进化亲缘关系一致.  相似文献   

牛附红细胞体病的诊断与防制     

黄夏  覃芳芸  磨龙春  胡杰  陆文俊  黄胜斌  赵国明 《广西畜牧兽医》2003,19(2):89-91

牛附红细胞体病是附红细胞体寄生在牛红细胞表面、血浆和骨髓而引起的一种血液原虫病 ,该病可引起牛发热、贫血、黄疸、消化和呼吸障碍。我区某一牛场饲养 35头牛 ,于 2 0 0 2年7月初先后有 8头发病 ,死亡 2头。病牛表现精神沉郁 ,体温升高 ,稽留不退 ,眼结膜、口唇、肛门等处黏膜出现不同程度苍白、黄染。曾怀疑为牛出败 ,而用青、链霉素治疗 ,但治疗效果不明显。经临床症状、剖检变化和实验室检验等综合诊断 ,确诊为牛附红细胞体病。现报告如下。1　临床症状病畜消瘦 ,呼吸加速 ,四肢无力 ,喜卧 ,食欲不振 ,瘤胃蠕动音弱 ,腹泻或排干硬粪…  相似文献   

猪脑心肌炎病毒GXLC株的分离及其3D基因分子特征的分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

陈进喜  施开创  黄胜斌  陆文俊  屈素洁  郑敏  李军 《中国畜牧兽医》2011,38(1)

采集临床疑似脑心肌炎死亡仔猪的组织作为接种材料,接种于BHK-21细胞系,观察细胞病变(CPE),并用RT-PCR和间接荧光抗体试验(IFA)进行鉴定,证实分离到1株脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EMCV),命名为GXLC株。应用RT-PCR方法扩增GXLC株的3D基因,扩增产物克隆入pMD18-T载体后进行测序,对获得的3D基因序列进行分析。序列分析结果表明,GXLC株3D基因全长1380 nt,编码460个氨基酸,含有7个抗原表位。同源性分析结果表明,GXLC株与国内外其它EMCV分离株3D基因核苷酸序列的同源性在84.7%~99.7%之间,氨基酸序列的同源性在96.1%~99.6%之间。遗传进化分析结果表明,基于3D基因核苷酸序列绘制的系统进化树可将所有EMCV分离株分成2个群:Ⅰ群和Ⅱ群,Ⅰ群可再细分为Ⅰa亚群和Ⅰb亚群,其中猪源EMCV在Ⅰ群和Ⅱ群中均有分布,而鼠源EMCV分布在Ⅰ群,人源EMCV分布在Ⅱ群;GXLC株与其它中国分离株均属于Ⅰa亚群。  相似文献   

猪瘟病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立   总被引：2，自引：0，他引：2  

马琳  付薇  何奇松  徐贤坤  易春华  孙翔翔  蒋家霞  黄胜斌  熊毅 《广西农业科学》2010,41(11):1223-1225

根据GenBank中5′端非编码区的靶序列设计了用于TaqMan荧光定量PCR的1对引物及TaqMan探针,以猪瘟活疫苗病毒为模板,在常规PCR的基础上优化了TaqMan荧光定量PCR反应条件,建立了猪瘟病毒（CSFV）TaqMan荧光定量PCR检测方法。其敏感性和特异性试验结果表明,所建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法对CSFV具有很高的特异性,其检测灵敏度可达5.03×10-2μg/μL。说明TaqMan荧光定量PCR适用于CSFV的快速检测。  相似文献