应用HiTrap protein-A层析柱纯化新城疫病毒单克隆抗体   总被引：1，自引：0，他引：1  

姜宁朋  崔言顺  张秀美  黄艳艳  李建亮  王希军  胡北侠 《西南农业学报》2008,21(2):480-482

两株针对新城疫病毒HN基因的单抗1E5和C3一B7,均具有血凝抑制性（HI）,免疫球蛋白亚类分别为IgG2a和IgG1。用HiTrap protein—A层析柱对这两株单抗进行了亲和纯化。收集不同洗脱阶段的液体进行蛋白含量测定,结果表明,5mL的洗脱液洗脱后,第1～2mL洗脱液中单抗含量最高。用SDS—PAGE电泳对纯化产物进行纯度鉴定,结果表明单抗纯化后只有重链和轻链两条带。  相似文献   

规模化养殖场种鸭新城疫和A型流感病毒带毒监测研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

胡北侠  黄艳艳  路希山  徐栋  张秀美 《江苏农业科学》2008,(6)

自2007年7月至2008年4月,从规模化肉用种鸭场固定鸭群共采集360份气管和泄殖腔棉拭子,每份样品尿囊腔接种10日龄SPF鸡胚5枚,共有78份样品鸡胚尿囊液有血凝性.通过血凝抑制、Dot-ELISA和病毒中和试验对分离病毒鉴定结果表明,所有分离病毒均为新城疫病毒,没有A型流感病毒.监测结果显示,鸭群气管和泄殖腔样品病毒分离阳性率最高值均出现在2007年9月,分别为87.5%和100%,平均值分别为14.6%和21.7%.  相似文献   

转基因三倍体毛白杨抗盐试验研究          下载免费PDF全文

刘静  王长宪  王斌  刘杰  赵进红  黄艳艳  张虹 《林业科学研究》2008,21(3):379-385

试验设计4～11 g·kg-1 8个NaCl浓度梯度,对转PLD/AtNHXI基因抗盐碱三倍体毛白杨进行组培苗抗盐分化试验,设计2～10 g·kg-19个NaCl浓度梯度进行组培苗抗盐生根试验,设计3～12 g·kg-1 10个NaCl浓度梯度对1年生盆栽苗进行抗盐试验,结果表明:在NaCl浓度达8 g·kg-1时,转基因三倍体毛白杨分化培养37 d后,组培苗的叶色、分化芽数及新稍长度开始受到影响,随着NaCl浓度的增大将抑制组培苗分化生长,甚至枯萎死亡;在含NaCl 7 g·kg-1的生根培养基中,培养20 d后,虽然叶色没有受到盐太大的影响,但生根和新稍的生长都开始受到抑制,根系明显的减少;在含NaCl 7 g·kg-1的土壤条件下,盆栽苗培养32 d后,开始表现出盐害症状.  相似文献   

圆环病毒与动物疫病     

黄艳艳  胡北侠  张秀美  吴家强  任素芳  黄庆华  王文志 《上海畜牧兽医通讯》2005,(6):33-35

圆环病毒科的各病毒均为近些年来才被发现并引起高度关注的病毒.该科的病毒可引起动植物机体发生原发感染甚至死亡,但其最大的危害则在于广泛存在却常常被忽视的亚临床感染.圆环病毒亚临床感染可导致动植物机体免疫系统的损伤,从而使其易遭受其它病原的并发或继发感染,造成更大的损失.本文就圆环病毒及其引起的禽、畜及人类的疾病作一综述.  相似文献   

硫酸黏杆菌素的体外抑菌活性测定     

黄艳艳  颜世敢  胡北侠  吴加强  任素芳 《中国兽药杂志》2003,37(9):26-27

采用试管二倍稀释法测定了硫酸黏杆菌素对大肠杆菌和沙门氏菌的最低抑菌浓度，结果表明硫酸黏杆菌素对试验菌株有良好的生长抑制效果。  相似文献   

鸡三种天然免疫相关受体和配体荧光定量PCR检测方法的建立及应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

黄艳艳  高丹丹  许传田  朱曼玲  杨少华  黄庆华  张琳  张秀美  吴家强 《动物医学进展》2016,(4):12-17

为建立检测鸡天然免疫相关受体(Ch-MDA5、Ch-TLR3和Ch-TLR7)及其相应配体(MAVS、TRIF和MyD88)的荧光定量PCR方法并评价其应用效果,设计和筛选特异性PCR引物,制备各基因的质粒标准品,绘制荧光定量PCR的标准曲线,并对方法的灵敏度、重复性和特异性进行检验。结果表明,所建立的检测方法敏感度高、特异性强、检测线性范围广、重复性好。应用建立的方法检测新城疫油乳剂灭活苗免疫SPF鸡后上述基因表达的变化,发现免疫后6h各基因的表达水平达到峰值,表明疫苗免疫迅速有效地激活了机体的天然免疫应答。建立了与鸡抗病毒感染天然免疫相关的3种细胞受体和相应配体的定量检测方法,可应用于病毒致病机制、鸡用新型疫苗、免疫增强剂以及抗病毒药物的研究与开发。  相似文献   

圣蕾芬兰组培快繁技术研究     

王长宪  李成秀  黄艳艳  王厚新  张虹  刘静 《山东林业科技》2006,(5):14-16

应用组织培养和快繁技术对圣蕾芬兰开展了花药培养、无菌原球茎培育快繁研究。结果表明:激素水平2.4~D2.0mg/L,BA0.1mg/L对花药愈伤组织的分化有明显促进作用,其中2.4-D的作用要大于BA。影响球茎增长的最佳组合是花宝肥1号(3号) 6-BA2.0mg/L Ad2.0mg/L,对球茎增长量影响的大小依次为6-BA>Ad>花宝肥。方差分析结果表明:花宝肥和6-BA两因子对球茎增长量影响差异极显著。对分化芽数而言,影响分化芽数的最佳组合是花宝肥1号 6-BA2.0mg/L Ad1.5mg/L,分化芽数最多为4.12个;对分化芽数影响因素的大小依次为花宝肥>6-BA>Ad。对苗高增长量而言,影响苗高的最佳组合是花宝肥2号 6-BA2.5mg/L Ad2.0mg/L;对苗高增长量影响因素的大小依次为6-BA>花宝肥>Ad。  相似文献   

转AmGS基因红叶石楠的分子检测及抗寒性分析     

孙海伟  刘静  宋健  翁曼丽  罗磊  黄艳艳  张虹  牛庆霖  王斌  冯殿齐 《林业科学》2012,(7):30-38

对转AmGS基因(从沙冬青中克隆的肌醇半乳糖苷合成酶基因)的红叶石楠植株进行多项分子检测(PCR,Southern,RT-PCR),结果表明AmGS基因已经整合到转基因株系R6和R7的基因组DNA中,并检测到转录水平上的表达。随后,经对R6和R7两个转基因株系进行连续6代芽切扩繁继代株系的PCR检测,发现导入的AmGS基因传递到所有芽切扩繁后代植株中。植株抗寒能力试验结果表明,在相同低温处理条件下,转基因株系均比未转基因植株的存活率要高。相对电导率测定结果表明,随着处理温度的降低,2个转基因株系相对电导率升高的程度明显低于未转基因的对照植株。低温半致死温度(LT50)测定结果表明,2个转基因株系(R6和R7)的LT50明显低于未转基因的对照植株。上述结果说明导入的AmGS基因提高了转基因株系的抗寒性。  相似文献   

新城疫LaSota活疫苗对基因Ⅶ型分离株的免疫保护性试验     

胡北侠  杨少华  许传田  张琳  黄艳艳  张秀美 《广东畜牧兽医科技》2012,(3):34-35

从山东省发病鸡群分离鉴定了一株新城疫病毒(NDV),命名为SDLY01。经蚀斑纯化后进行毒力测定和序列分析表明分离株SDLY01属于基因Ⅶ型NDV强毒。20只7日龄SPF鸡免疫新城疫活疫苗LaSot a后14 d分别用NDV标准强毒F48E8和分离株SDLY01攻毒,同时设同日龄SPF鸡为对照组,未免疫任何疫苗。攻毒后观察10 d,免疫组在攻毒后食欲、精神均正常;对照组在攻毒后2～4d发病死亡,并表现ND典型的临床症状和病理变化。攻毒后第3、5、7、9 d对免疫组试验鸡取喉头、泄殖腔棉拭进行病毒分离,F48E8攻毒组病毒分离均为NDV阴性,SDLYO1攻毒组第5 d病毒分离NDV阳性,第3、7和9d病毒分离阴性。本研究结果表明LaSot a活疫苗对F48E8和SDLY01均能提供100%免疫保护,但不能完全抑制基因Ⅶ NDV分离株在体内的复制和排毒。  相似文献   

10株H9N2亚型禽流感病毒HA和NA基因的序列分析     

徐栋  张秀美  黄艳艳  胡北侠  李建亮  崔言顺 《畜牧兽医学报》2009,40(4)

为了从分子水平上掌握我国H9亚型禽流感的变异情况和流行规律,本研究汇集近年来从我国部分省市养殖场分离的10株禽流感H9N2亚型毒株,采用RT-PCR技术对其HA和NA基因进行扩增、克隆和测序,并对所得全序列进行同源性和遗传进化分析。结果显示,本试验分离到的10株病毒的HA和NA基因变异程度不大,变异概率大;在遗传进化树中均属于欧亚分支中的类CBJ194亚分支,与CBJ194的HA基因核苷酸同源性在88.8%~95.8%,NA基因核苷酸同源性在93.4%~97.6%,可能与CBJ194由同一毒株进化而来。由于基因突变使ACHB101毒株的HA基因出现了新的糖基化位点,ACHN102毒株的保守受体结合位点发生变异。NA基因推导氨基酸序列中第63、64、65位有T、EI、3个氨基酸的缺失,导致61位糖基化位点的丢失。唾液酸吸附位点上有明显的突变。HA和NA基因的变异可能与频繁的疫苗免疫选择压力有关。  相似文献