利用微滴数字PCR技术分析转基因大豆‘GE-J12’中外源基因的拷贝数     

赵新  刘双  刘娜  李瑞环  曹英芳  兰青阔  王永 《中国农业大学学报》2022,27(1):58-66

为鉴定抗除草剂转基因大豆新品种‘GE-J12’的外源基因插入拷贝数,以该转化体的外源插入目的基因G2-EPSPS和GAT的序列、3′转化体特异性序列为靶序列,设计PCR扩增引物和TaqMan探针,并对引物探针特异性进行鉴定,同时以大豆内标基因Lectin为参照,建立微滴数字PCR拷贝数检测体系。特异性试验结果显示,只有以抗除草剂转基因大豆‘GE-J12’基因组DNA为模板才有扩增信号。以单株转基因大豆‘GE-J12’基因组DNA为模板,进行外源目的基因G2-EPSPS和GAT、3′转化体特异性序列的微滴数字PCR检测,转基因大豆‘GE-J12’的外源目的基因G2-EPSPS和GAT在基因组上的插入拷贝数均值分别为0.99和1.01。同时3′转化体特异性序列的拷贝数均值为1.00,验证单株转基因大豆‘GE-J12’为纯合子,因此鉴定该单株转基因大豆‘GE-J12’的外源基因在大豆基因组上为单拷贝插入,同时与Southern blot方法进行比较,结果一致。  相似文献   

苦参碱抗PCV2诱导小鼠肺炎的作用及其机制研究     

孙娜  张司寰  岑龙座  曹志刚  张华  孙盼盼  孙耀贵  范阔海  尹伟  李宏全 《中国农业大学学报》2022,27(10):142-152

为探讨苦参碱在小鼠体内的抗炎作用及其机制,本研究利用猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)感染诱导小鼠肺炎模型,将32只昆明小鼠均分为空白对照组、PCV2组、苦参碱处理组(40 mg/kg)和利巴韦林阳性对照组(40 mg/kg)。除空白对照组外,其他各组小鼠每只腹腔注射0.5 mL PCV2,攻毒后的第5天开始腹腔注射对应药物,每天给药一次,连续给药5 d。在攻毒后的第11天,观察小鼠肺脏的病理组织学变化,qPCR检测PCV2 Cap基因,IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α基因的mRNA表达,Western blot检测相应炎症因子、TLR4/MyD88/NF-κB信号通路及NLRP3炎症小体关键蛋白的表达。结果表明:1)苦参碱可显著抑制PCV2感染诱发的肺间质增宽现象。2)苦参碱可显著降低肺脏PCV2病毒载量(P<0.05)及炎症因子IL-1β(P<0.05)、IL-6(P<0.000 1)、IL-8(P<0.000 1)和TNF-α(P<0.000 1)的mRNA和蛋白(P<0.000 1)的相对表达量。3)苦参碱可显著降低TLR4(P<0.000 1)、MyD88(P<0.000 1)、p-IκBα(P<0.000 1)、NF-κB p65(P<0.01)、NLRP3(P<0.000 1)、ASC(P<0.000 1)和Caspase-1(P<0.000 1)的蛋白表达量,升高IκBα(P<0.001)的蛋白表达量。综上,苦参碱可通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB 信号通路的活化以及 NLRP3 炎症小体的激活,来发挥抗PCV2诱导的小鼠肺炎作用,为进一步揭示苦参碱的抗病毒抗炎作用提供数据支撑,为苦参碱作为新兽药开发奠定基础。  相似文献   

云烟121健康与感黑胫病烟株根系及根际土壤丛枝菌根真菌差异研究          下载免费PDF全文

裴妍  任禛  李秋桦  陈秀  夏体渊  蒋明星  尹敏 《南方农业学报》2022,53(6):1502-1512

【目的】明确云烟121健康与患黑胫病烟株根系及根际土壤丛枝菌根真菌（Arbuscular mycorrhizal fungi,AMF）侵染特征的差异,为后续AMF在缓解烟株土传病害方面的应用打下理论基础。【方法】以云烟121健康和患黑胫病烟株根系及根际土壤为试验材料,采用显微形态观察法对2种烟株根系AMF侵染水平及根际...  相似文献   

水培条件下不同小麦基因型对氮磷肥敏感性差异的研究     

孙娜  曹禹  张胜军  侯丽丽  王彩荣 《安徽农业科学》2021,49(5):165-168

在不同氮(磷)浓度下,分析不同小麦基因型苗期的幼苗干重和根系干重,研究不同基因型小麦对氮磷反应的差异性.结果表明,在无氮(无磷)条件下,小麦基因型间幼苗干重和根系干重差异不显著;当氮浓度为0.05 mmol/L时,小麦基因型间幼苗干重差异不显著,根系干重差异达显著或极显著水平,当磷浓度为0.005 mmol/L时,小麦基因型间幼苗干重和根系干重均达显著或极显著水平;当氮和磷浓度分别达2.00和0.250 mmol/L时,小麦基因型间幼苗干重和根系干重差异显著或极显著.  相似文献   

温度及饵料对管角螺繁殖力的影响     

罗杰  王中铎  曹伏君 《安徽农业科学》2021,49(1):77-79

[目的]了解温度及饵料对管角螺繁殖力的影响.[方法]采用升温及投喂饵料的方法,在水泥池培育已达性成熟年龄的管角螺113 d后,进行繁殖力的比较.[结果]升温组(28～29℃)亲螺比常温组提前16 d交配产卵,每个雌螺平均产卵2.2次,平均产卵囊数30.7个,而常温组每个雌螺平均产卵1.3次,平均产卵囊数为24.4个,且升温组的每个雌螺获得仔螺平均数比常温组多19％,差异显著(P<0.05).饵料试验中,投喂贝类组与投喂小杂鱼组产卵时间无明显差异,贝类组每个雌螺平均产卵2.4次,而杂鱼组为1.8次;产卵雌螺中每个雌螺所产卵囊数贝类组比小杂鱼组多18.3％,且差异显著(P<0.05).贝类组、小杂鱼组每个孵囊孵出仔螺平均数差异不显著(P>0.05),而贝类组每个雌螺获得仔螺的平均数比小杂鱼组多19.3％(P<0.05).[结论]在管角螺亲螺强化培育过程中,升温及投喂适口饵料均能提高其繁殖能力.  相似文献   

客家传统食品黄元米果研究现状及发展建议     

曹耀  应康  邓丹雯 《安徽农业科学》2021,49(3):176-179,198

赣南是客家人最早聚居地之一,有丰富的客家传统食品,黄元米果是其中之一.赣南地区客家传统食品历史悠久、风味独特,具有市场开发前景.介绍了客家传统食品黄元米果的历史和制作工艺现状,论述了开发黄元米果的可行性,指出黄元米果开发过程中存在的问题,并对其健康持续的产业化发展提出了合理建议,旨在为黄元米果的生产研究提供新的思路.  相似文献   

基于HPLC-MS测定牛奶和奶粉中黄曲霉毒素方法的优化     

曹叶中  蔡文 《安徽农业科学》2021,49(2):201-203,210

[目的]建立液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS)同时检测牛奶和奶粉中的5种黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1的方法.[方法]样品用含0.5％乙酸乙腈为提取溶剂,通过硫酸镁和氯化钠促进水-乙腈分层,经正己烷除脂净化后用液质联用技术进行检测.[结果]各黄曲霉毒素线性范围为1.0～5.0 ng/mL,确定系数(R2)均大于0.9990;牛奶加标平均回收率为77.06％～101.28％,RSD为2.38％～7.22％;奶粉加标平均回收率为57.00％～99.86％,RSD为2.00％～8.37％.[结论]该方法可同时测定牛奶和奶粉中的5种黄曲霉毒素,具有操作方便、分析速度快、选择性强、定性准确等优点,可用作牛奶和奶粉中黄曲霉毒素的定量测定.  相似文献   

微生物菌剂拌土对玉米茎基腐病的预防和促生效果   总被引：2，自引：0，他引：2  

沙月霞  邢敏  李明洋  王晨曦  王佳娟  沈瑞清 《安徽农业科学》2021,49(4):141-144,154

为研发用于宁夏玉米茎基腐病预防的微生物菌剂.温室条件下检测了3株芽孢杆菌对玉米茎基腐病的预防和促生效果,研究了3株菌的相容性,田间试验验证了复合微生物菌剂拌土对宁夏玉米茎基腐病的预防与促生效果.温室试验结果表明枯草芽孢杆菌(Ba-cillus subtilis)HR15、萎缩芽孢杆菌(B.atrophaeus)HR37和贝莱斯芽孢杆菌(B.velezensis)HR55对宁夏玉米茎基腐病具有较明显的预防效果和促生长作用;相容性试验结果表明3株芽孢杆菌之间不存在相互抑制作用.田间试验结果证实微生物菌剂M1对宁夏玉米茎基腐病的预防效果达60％以上;微生物菌剂M2在乳熟期的预防效果为58.31％,蜡熟期达65.10％.2种复合微生物菌剂在乳熟期的防效与噁霉灵可湿性粉剂无显著差异,与微生物菌剂对照的防效之间有显著差异.微生物菌剂M1和M2明显促进玉米的出苗率和株高,对出苗率的促生效果与噁霉灵可湿性粉剂无显著差异.微生物菌剂M1和M2处理组的玉米产量高于噁霉灵可湿性粉剂与微生物菌剂对照处理组,有效增加有效穗数、千粒重、穗行数、行粒数、穗粒数,明显降低玉米秃尖长度.微生物菌剂M1和M2可以有效预防宁夏玉米茎基腐病,为粮食安全和玉米可持续发展提供技术支撑.  相似文献   

农产品加工与质量检测专业"三自主四结合"人才培养模式研究     

洪文龙  曹淼  李树炎  韦湘  陆智媛 《安徽农业科学》2021,49(13):272-273,276

随着社会的进步和农产品加工与质量检测专业的发展,行业对农产品综合型人才的需求增加,学有余力的学生也要求能学习更多的其他专业知识.该文提出了"三自主四结合"人才培养模式,并详细介绍了该培养模式的培养目标、培育模式、实践意义、推广价值等内容.最后,对实践的经验和不足之处进行了总结,以期为其他专业的综合型人才培养提供参考.  相似文献   

烤烟品种在宣威西南部中高海拔烟区的适应性研究     

钱进  张军刚  曹加园  陈彪  吕世保  王全贞  周玉思  王瑞宝  李逊  徐雪萍  潘义宏 《安徽农业科学》2021,49(19):24-28

[目的]为了筛选出适宜宣威西南部中高海拔烟区种植的优质烤烟品种.[方法]2020年在宣威板桥进行田间对比试验,研究了10个烤烟品种的大田生育时期、农艺性状、主要病害发生率、经济性状以及初烤烟叶的含梗率、化学成分等方面的差异性.[结果]云烟97、云烟105、中川208和云烟116烤烟品种在大田中的长势较好,大田生育期均在130 d左右;云烟116除赤星病发病率较高(4.95％)外,其他主要病害发生率均低于3.17％,较其他品种低;4个品种的经济价值较优,产值均大于68167.50元/hm2,生态适应性好;平均含梗率较低,均在30.54％以下,其中以云烟105最低,为27.68％.10个烤烟品种下、中、上部位烟叶的化学成分综合平均得分在0.41～0.53,烟叶化学协调性较差.其中,云烟87、云烟121、云烟123和中川208烟叶化学成分综合得分较高,均在0.48以上.[结论]云烟97、云烟105、中川208、云烟116适宜在该烟区种植,但应加强黑胫病、普通花叶病、赤星病和野火病的预防和防治,同时可以通过优化施肥措施,栽培技术和烘烤工艺的研究,提高烟叶品质和降低含梗率,提升烟叶等级结构和产值产量,驱动品种内在潜力,充分发挥品种生态和市场适应性方面的优势.  相似文献