生长抑素基因疫苗质粒pEGS/2SS的构建及表达   总被引：7，自引：0，他引：7  

曹少先  杨利国  张文伟  茆达干  何晓红 《中国兽医学报》2005,25(5):499-502

将pcS／2SS中的乙肝表面抗原（HBsAg）S基因及插入S基因中的生长抑素（somatostatin，ss）基因亚克隆到pUC19中，构建成pUSS／S质粒；PCR扩增pcS／SS中SS基因，调整阅读框，融合到pUSS／S质柱S基因后，构建成pUS／2SSG质粒；最后将S／2SSG融合基因克隆到pEGFPN1中EGFP基因的5’端，构建S／2SS-EGFP融合表达质粒pEGS／2SS。酶切、测序鉴定后脂质体包裹法将pEGS／2SS转染HeLa细胞，荧光显微镜下检测荧光，ELISA检测表达产物的SS免疫反应原性。酶切和测序鉴定表明，重组质粒pEGS／2SS构建成功。pEGS／2SS转染24h后的HeLa细胞检测到绿色荧光，72h检测到强烈荧光，表明融合基因在HeLa细胞获得高表达；ELISA证实融合蛋白具有SS的抗原抗体反应原性。质粒pEGS／2SS的成功构建及表达为生长抑素基因免疫的机理及安全性研究奠定了基础。  相似文献   

F18ac菌毛A亚单位基因的克隆与序列分析     

成大荣  徐建生  吕玲  曹军  唐波  孙怀昌 《中国预防兽医学报》2005,27(2):144-147

根据已经发表的F18ab菌毛A亚单位(FedA/ab)的基因(fedA/ab)[1],设计一对引物,利用PCR技术从表达F18ac菌毛的大肠杆菌2134P株[2]、8199株[3]、8813株[3]中分别扩增到一段序列,并克隆至pGEM-T载体,获得重组质粒T2134PA、T8199A、T8813A.琼脂糖凝胶电泳、序列测定及分析表明,该3个序列大小均为516bp,与fedA/ab(513bp)具有较高的同源性,分别为96.3%、96.5%、95.9%,推导的Fed/ac氨基酸序列与FedA/ab同源性分别为93.0%、93.6%、92.4%.数据表明该实验所克隆的序列均为F18ac菌毛A亚单位(FedA/ac)的基因(fedA/ac).  相似文献   

新城疫病毒F48E9感染CEF细胞特异性表达基因的筛选鉴定     

杨新艳  刘培欣  曹殿军  闫丽辉  孙建宏  单文鲁 《中国预防兽医学报》2005,27(4):260-263

分别以NDV F48E9和La Sota株感染鸡胚成纤维细胞,于感染后8 h提取NDV感染CEF细胞总RNA,通过mRNA差异显示技术筛选病毒感染诱导表达的特异性基因.主要方法是先以锚定引物经反转录后,然后以9～10 bp随机引物为上游引物,以锚定引物Oligod(T)18为下游引物,进行PCR扩增,PCR产物采用8%的尿素变性PAGE胶电泳进行分离鉴定.对于特征性差异带进行第二次PCR扩增,克隆后测定其核苷酸序列.结果我们发现数个差异条带,选取差异带在500 bp以内的条带,经测序后显示经NDV F48E9感染后,有一条差异条带特异性表达的基因所编码的蛋白与Receptor(TNFRSF)-interacting serine-threonine kinase 2有47 %同源,是一个新基因,其蛋白功能不明确,有可能和细胞的凋亡有关.  相似文献   

O型口蹄疫病毒VP1 T细胞与B细胞表位基因双拷贝串联表达产物的免疫应答   总被引：1，自引：0，他引：1  

庄娟  曹祥荣  陈波  饶忠  潘洁  徐泉兴  尤永进 《中国预防兽医学报》2005,27(6):494-497,503

以一株O型口蹄疫病毒(FMDV)外壳蛋白VP1基因为模板,合成与细胞免疫及体液免疫相关抗原表位肽基因:21-40肽(20AA)和141-160肽(20AA)基因序列,运用基因工程技术构建了含有串联结构21-40(20AA)～141-160(20AA)～21-40(20AA)～141-160(20AA)的2020-2020VP1融合基因表达载体r2020-2020,转化宿主菌BL21(DE3)RIL后诱导表达,表达产物经SDS-PAGE及Western Blot分析显示重组融合蛋白的分子量约为18Ku.动物实验表明,较小剂量的融合蛋白就能诱导豚鼠产生特异性T淋巴细胞增殖反应及抗FMDV中和抗体,证明该融合蛋白可同时激活细胞免疫及体液免疫反应,具有开发成为抗FMDV疫苗的应用价值.  相似文献   

Effects of gastrin on expression of cyclooxygenase and growth factors in rat gastric mucosa     

SUN Wei-hao  CAO Da-zhong  YU Qian  OU Xi-long  SHEN Hong  YU Ting  ZHU Feng  SUN Yun-liang  FU Xi-ling 《园艺学报》2005,21(2):271-275

AIM: To clarify the effects of gastrin on the expression of cyclooxygenase (COX) and several growth factors in rat gastric mucosa. METHODS: Male Sprague Dawley rats were fasted for 24 hours and subcutaneously injected with saline or gastrin 17 at doses of 1 μg/kg, 10 μg/kg and 100 μg/kg, respectively. The expression of COX-1, COX-2, heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor (HB-EGF) and hepatocyte growth factor (HGF) in the gastric mucosa were examined using Western blotting and immunohistochemical staining. Effects of a potent gastrin receptor antagonist YM022 on the expression of COX-1, COX-2, HB-EGF and HGF in gastric mucosa were also evaluated. RESULTS: Gastrin dose-dependently increased the expression of COX-2 and HB-EGF in rat gastric mucosa while the expression of COX-1 and HGF did not change significantly after treatment with gastrin. However, pretreatment with YM022 dose-dependently abolished the up-regulation of COX-2 and HB-EGF expression induced by gastrin. CONCLUSIONS: This study demonstrates that gastrin up-regulates COX-2 and HB-EGF expression in rat gastric mucosa, indicating that COX-2 and HB-EGF are involved in pathogenesis of the gastrin-related gastric mucosal hyperplasia and carcinoma of stomach.  相似文献   

包膜控释尿素对大棚番茄的增产与品质提高效应   总被引：4，自引：0，他引：4  

王鑫  刘建新  徐秋明  曹兵  杨建霞 《干旱地区农业研究》2005,23(6):137-140

对施用包膜控释尿素和普通尿素的大棚番茄进行了田间生产条件下产量与品质对比分析试验。结果表明:与普通尿素相比施用控释尿素有显著的增产效果。D 60控释处理(控释期60 d)产量最高,为68.85 t/hm2,比对照增产19.39 t/hm2,增产率为39.2%;比尿素增产10.10 t/hm2,增产率为17.2%;D 90(控释期90 d)比对照增产15.37 t/hm2,增产率为31.0%;比尿素增产6.08 t/hm2。增产率为10.3%;D 90与D 60两种控释尿素之间产量差异不显著。控释尿素具有增加单株果数、单果重的效果。D 90与D 60氮素当季利用率比普通尿素分别高65.5%和108.8%。硝酸盐含量,以D 90为最低,仅比对照高4.4%,比普通尿素低56%;D 60比对照高15%,比尿素处理低51.6%;尿素处理比对照高137.3%。V c和氨基酸含量,D 90为最高,分别比对照高1.00倍和2.46倍;比普通尿素处理高22%和100%;D 60与尿素两处理V c含量差异不显著,但氨基酸总量前者却比后者高48%。可溶性糖含量以D 60较高,普通尿素为最低。综合品质指标为:D 90>D 60>U。说明控释尿素具有显著地增产效应和提高蔬菜品质的突出效应,特别在提高蔬菜的安全品质方面贡献最大。综合各项,在番茄生产中以选用控释期为60 d的包膜控释尿素为最好。  相似文献   

苔藓植物生态学研究的数量分析方法   总被引：5，自引：0，他引：5  

张元明  郭水良  曹同  潘伯荣 《干旱区研究》2001,18(1):69-72,75

植被数量分析方法在苔藓植被中的应用起步较晚，仅有20多年的研究历史，但发展却十分迅速。这里介绍了目前苔藓植物生态学研究中应用较为普遍的数量分析方法，并探讨了各自的优缺点。  相似文献   

苏云金素在水中和植株上的衰减与残留     

林开春  操继跃 《中国生物防治》1995,11(3):97-100

用ＨＰＬＣ检测了苏云金素在鱼塘水和清水中的衰减速率。清水中该物质的半衰期长达４３３小时；在鱼塘水中苏云素的衰减呈双指数消除模型，开始消除半衰期为２．４３－１０．６８小时，终末消除半衰期为１２８．５７－１４２．０１小时。  相似文献   

应用赤眼蜂蛹人工饲养尼氏钝绥螨的研究初报     

张良武  曹爱华 《中国生物防治》1993,(1)

本文首次报导应用赤眼蜂蛹作为替代食料人工饲养尼氏钝绥螨。日食蛹量,幼螨为0.18头,产卵前期成螨达1.18头,而产卵期成螨则为0.95头左右。在25℃饲养条件下,每雌产卵达45粒,卵历期48小时,孵化率近92％,幼螨存活率88％,成螨雌性占55％,雌成螨寿命25天。用赤眼蜂蛹连代饲养的尼氏钝绥螨在桔园释放,对柑桔全爪螨具有明显的控制作用。  相似文献   

Pathological study of dilated cardiomyopathy     

CAO Wen-jun  LI Liang  LIU Guo-zhen  LIN Jie  HUANG Fang-jiong  YANG Pei-sun 《园艺学报》2001,17(8):755-758

AIM: To study the pathological features of the dilated cardiomyopathy and the mechanisms involved. METHODS: The left ventricular myocardium specimens were obtained from 8 patients with dilated cardiomyopathy by BATISTA. The morphological changes was examined macropathologically and histopathologically. RESULTS: The dilated cardiomyopathy from 8 patients can be classified into two types macropathology. One of them showed hypertrophy of left ventricular wall and the other showed fatty infiltration on myocardium of the left ventricular. In the first type, swelling of the endothelial cells as well as luminal stenosis even occlusive of small arteries and arterioles were observed in the study. Electronical microscopical examination showed that there were a lot of homogeneous secretory granules in the endothelial cells. CONCLUSION: These results suggested that the secretory granules might be from the damaged myocardial cells and entered into the adjacent endothelial cells. The pathological changes mentioned above could aggravate the ischemia of myocardium. At the same time, the vicious cycle make the pathological changes more serious. Further study should be made to confirm the nature of the secretory granules.  相似文献