尼帕病毒和亨得拉病毒核蛋白单克隆抗体的制备与鉴定   总被引：2，自引：0，他引：2  

肖昌  刘勇军  徐兴然  涂长春  张玉静 《中国兽医学报》2007,27(4):433-436,444

尼帕病毒（Nipahvirus，NiV）和亨得拉病毒（Hendravirus，HeV）是近年来出现的2种新的高致病性副粘病毒，在我国尚未发现。为防范2种病毒在我国的出现，本研究开展了前瞻性工作，成功研制了针对2种病毒核蛋白（N）的单克隆抗体，可用于病毒监测与诊断。首先利用大肠杆菌表达的2种病毒N蛋白免疫BALB／c小鼠，细胞融合后应用间接免疫荧光的方法对杂交瘤细胞克隆进行筛选，获得了5株N蛋白特异单抗。单抗腹水的抗体效价均超过2×10^5，培养上清抗体效价1：64～1：256。Western—blot和间接免疫荧光试验证明，5株单抗均特异针对N蛋白，其中1株（H4D11）只与HeVN蛋白反应，而不与NiVN蛋白反应，表明它具有鉴别2种病毒的能力。所研制的单抗对建立2种病毒的检测技术，用于动物监测，以防范2种新发传染病在我国流行具有重要意义。  相似文献   

抗Asia1型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及生物学特性鉴定     

李万  周国辉  杨增岐  涂亚斌  于力 《中国预防兽医学报》2007,29(6):448-452

用纯化的Asia1型口蹄疫病毒免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA和间接免疫荧光(IFA)筛选,有限稀释法克隆,获得了2株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3H6、5G3,其细胞培养上清效价分别为1:64和1:128,小鼠腹水效价分别为1×10~(-4)和8×10~(-3);ELISA和IFA结果显示,2株单抗仅与Asial型口蹄疫病毒反应,不与O型口蹄疫病毒反应,表明它们均为抗Asial型口蹄疫病毒的型特异性单克隆抗体。westem blot结果显示,2株单克隆抗体均不与全病毒抗原反应,表明它们所针对的抗原表位均为构象表位。相加ELISA试验表明,两株单抗识别不同的抗原表位。经硫氰酸盐洗脱法测定,3H6和5G3的相对亲和力指数分别为1.0 mol/L和1.5 mol/L。这2株单抗的获得为建立口蹄疫病毒检测方法提供了强有力的工具。  相似文献   

用荧光定量RT-PCR方法检测猪瘟病毒   总被引：4，自引：1，他引：4  

史子学  徐兴然  涂长春 《中国预防兽医学报》2007,29(6):467-470

为了建立能特异检测不同基因型猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV),同时又能区分其他瘟病毒的基因检测方法,本实验针对CSFV基因组5′端非编码区设计并合成了简并引物和TaqMan探针,在优化反应条件的基础上,成功地建立了特异检测CSFV的荧光定量RT-PCR检测方法。再以已知滴度的CSFV石门株血毒总RNA反转录产物建立标准品,该标准品可以用于定量临床样品中的CSFV滴度,所建立的荧光定量PCR方法可以灵敏地检测出10~(-0.82)个TCID_(50)病毒含量。最后用建立的方法对108份临床样品进行检测并同时进行病毒分离,荧光定量PCR方法检测出73份阳性样品且与病毒分离的符合率为100%,而常规RT-PCR只检测出54份阳性样品,表明本荧光定量RT-PCR法在检测猪瘟病料上具有潜在的应用价值。  相似文献   

O型和Asia1型口蹄疫病毒感染RT-PCR鉴别诊断方法的建立     

涂亚斌  周国辉  张亚科  王志国  张守红  王海伟  于力 《中国预防兽医学报》2007,29(7):561-564,568

根据GenBank中O型和Asia1型口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)的vp3、vp1和2A基因序列,并与其它血清型FMDV的对应基因序列进行比较,设计用于扩增O型和Asia1型FMDV vp1基因的特异性引物,建立O型和Asia1型FMDV RT-PCR鉴别诊断方法。本方法首先用通用型引物进行RT-PCR,确定是否为FMDV感染,然后用特异性引物鉴别O型或Asia1型FMDV的感染。用vp1基因序列分析进行符合性试验,验证了该方法所具有的特异性和敏感性。本方法可用于O型和Asia1型FMD的快速诊断及流行病学调查。  相似文献   

211省道金川县庆宁至河西段绿化设计理念初探     

涂佳 《四川林业科技》2013,34(5):42-46

211省道庆宁至河西段绿化景观设计以“美丽金川、百里画廊”为总体设计理念,其设计理念主要体现在公路的5个主题景观段落中,每个段落确定一个主题和要表达到的意境,按照“梨花春雪三月天,桃红柳绿似江南.一段一景皆有意,百里画廊入梦来.”的设计构思,把公路打造成集塞上江南、高原梨乡、地方文化特色和魅力为一体蕴含丰富景观的风景画卷,以达到丰富公路景观效果,提升公路的绿化档次的目的.本段公路绿化景观化设计为省级公路的绿化设计及建设开创了一个新的思路.  相似文献   

“巴仙银尖”的加工工艺及品质研究报告     

梁月荣  龚淑英 《茶叶》1999,25(4):202-204

探讨了利用云南大叶种茶树鲜叶生产名优绿茶－“巴仙银尖”的加工工艺，证明通过合理嫩有，适度摊放，高温杀青，中温慢烘的技术措施，能生产出名优绿茶。文中同时介绍了“巴仙银尖”茶的品质，化学特征。  相似文献   

Correlation of gene modification between histone H3 lysine 4 trimethylation and DNA methylation in IgA nephropathy patients     

QI Su-wen  TU Zhi-guang  DAI Yong  SUI Wei-guo 《园艺学报》2012,28(2):314-319

AIM: To investigate the correlation of gene modification between histone H3 lysine 4 (H3K4) trimethylation and DNA methylation in IgA nephropathy patients. METHODS: H3K4 trimethylation variations were analyzed in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from 40 IgAN patients and 40 healthy controls by the method of chromatin immunoprecipitation linked to microarrays (ChIP-chip). ChIP real-time PCR was used to validate the microarray results. Quantitative real-time PCR (qRT-PCR) was employed to analyze mRNA expression. DNA methylation in 4 selected positive genes was analyzed by the method of methylated DNA immunoprecipitation-quantitative PCR (MeDIP-qPCR). RESULTS: IgAN patients displayed higher H3K4 trimethylation level and lower DNA methylation level than those of the healthy controls. There were significant differences in DNA methylation and H3K4 trimethylation of 4 selected genes between IgAN patients and the healthy controls (P<0.05). CONCLUSION: Our studies indicate that significant alterations of H3K4 trimethylation and DNA methylation exist in IgAN patients. There is a correlation of gene modification between DNA mathylation and histone H3 lysine 4 trimethylation in IgAN patients.  相似文献   

A New Harmonic Current Detection Algorithm and Its Application in Active Power Filter     

RONG Fei  LUO An  TU Chun-ming 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2008,35(10)

  相似文献   

A Fast Clustering Algorithm for Binary Image in Video Sequence     

JIAO Bo  LI Guo-hui  TU Dan  WANG Yan-ming 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2008,35(8)

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Isolation and Analysis of Expansins from the Gossypium barbadense Cotton Elongating Fiber     

TU Li-li  DENG Feng-lin  TAN Jia-fu  LI Yang  ZHANG Xian-long 《棉花学报》2008,(Z1)

Gossypium barbadense L.is one of the most valuable cotton species due to its silkiness,luster,long staple,and high strength.Transferring the excellent fiber traits from G.barbadense as the secondary gene pool to the widely cultivated G.hirsutum via traditional and molecular-aided selection is an attractive aim of breeders.  相似文献