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[目的]构建玉米通用表达载体,以期为利用转基因手段提高玉米对非生物胁迫的耐受性奠定基础。[方法]通过对现有的pGreen0229植物表达载体进行改造,构建含有CaMv35S启动子驱动的抗草胺膦筛选基因bar、可用于连接目的基因的玉米表达载体PGM-35Sbar,并通过花粉管通道法转化吉444玉米自交系。[结果]PGM-35Sbar玉米通用载体构建成功,转化玉米植株后,得到抗性植株14棵,经PCR检测其中有12棵为阳性植株。[结论]该研究为快速构建含有特定目的基因的玉米表达载体奠定了基础。 相似文献
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DPC对棉花生长发育及棉田主要昆虫的影响 总被引:5,自引:2,他引:3
大田试验结果表明:与不施用DPC处理相比,施用DPC处理的棉花株高和蕾铃脱落率均有所下降,其成铃数和产量分别提高10.00% ~10.04% 和7.46% ~8.13% ;棉田盲蝽象、棉铃虫和玉米螟的累计虫量分别下降18.90% 、38.89% 和40% ~50% ,盲蝽象和棉铃虫对蕾铃的为害率分别下降15.01% 和39.74% ~66.55% ;棉田天敌累计数量上升13.49% 。大田普查结果与上述结果相似。 相似文献
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水稻历来都是育苗移栽种植.育苗移栽花工多、劳动艰辛、机械作业的难度大.近年来,我们进行了麦茬稻旱播试验,取得了良好的结果.1983年田间种植试验,有60%的供试品种亩产在800斤以上,有20%的品种亩产在900斤以上,有两个品种亩产超千斤.这说明水稻麦后旱播是有希望的.在供试品种中,重复试验次数最多、表现亦好的要算盐粳2号.因此,现将盐粳2号麦后早播试验结果整理报告如下. 相似文献
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利用微滴式数字PCR技术分析转基因玉米抗除草剂标记基因EPSP拷贝数 总被引:1,自引:0,他引:1
基于微滴式数字PCR(Droplet digital PCR,ddPCR)平台,以转基因玉米为例,建立了转基因作物(Genetically modified crops,GM crops)外源基因拷贝数分析方法,对待测样品进行了快速鉴定,并从T_0转基因玉米株系中鉴定出多个单拷贝单株。对该方法与实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)方法在分析结果的准确性方面进行了比较,从试验数据可以看出,2种检测方法的结果比较一致,单拷贝检测结果高度一致;但是ddPCR试验操作更加简便,试验结果可重复性强,试验数据更加准确可靠。研究表明,ddPCR方法是一种更加便捷、快速和准确的外源基因拷贝数分析新方法,基于其在准确性和灵敏度方面的显著优势,将会在转基因作物的外源基因拷贝数分析中得到广泛的应用。 相似文献
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高羊茅叶绿体表达载体构建及绿色荧光蛋白基因瞬时表达检测 总被引:1,自引:1,他引:1
【目的】验证高羊茅叶绿体表达载体在高羊茅叶绿体中的瞬时表达情况,为今后在高羊茅叶绿体中稳定表达该载体,获得耐旱高羊茅的叶绿体转基因株系奠定基础。【方法】首先从高羊茅草叶绿体基因组中克隆16S/trnI-trnA/23S片段,作为定点整合同源片段。然后将耐旱相关基因酵母海藻糖合酶基因tps1与水稻叶绿体16S rRNA基因的强启动子Prrn、烟草叶绿体基因psbA的终止子构建表达盒(Prrn-tps1-TpsbA-ter),连同草丁膦抗性基因bar表达盒、卡那霉素抗性基因nptII和绿色荧光蛋白基因gfp构建的融和基因表达盒一起克隆到定点整合同源片段之间,构建高羊茅叶绿体的稳定表达载体gTKGB。通过基因枪轰击法将gTKGB转化到高羊茅幼嫩叶片中,用激光共聚焦扫描显微镜对GFP的表达情况进行检测分析。【结果】克隆的高羊茅叶绿体基因16S-trnI-trnA-23S在NCBI登录号为:DQ490947-DQ490950。构建的叶绿体表达载体gTKGB转化高羊茅幼嫩叶片,在叶绿体中有很好的GFP表达。【结论】高羊茅叶绿体表达载体gTKGB可用于高羊茅叶绿体转化。 相似文献
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采用花粉管通道法将甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)转入玉米自交系京24,以提高玉米的耐盐性。在玉米植株T0代喷洒200mg/L草铵膦除草剂进行抗性试验,获得4株抗性苗。在T0代进行PCR初步检测得到3株转基因植株。在T2代通过Southern blotting以及Northern blotting检测,表明外源BADH基因已经整合并表达。对T2代株系和京24自交系(CK)在高盐胁迫下进行相对含水量、叶片电解质外泄率、甜菜碱含量、脯氨酸含量等生理指标的测定,结果表明转基因株系的生理指标明显好于对照,说明转入BADH基因能提高玉米的耐盐性。 相似文献
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