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【目的】通过易错PCR技术克隆一种新的Cry1Ab13基因,以利用Cry类Bt基因提高作物抗虫性,丰富基因资源。【方法】利用易错PCR技术对苏云金芽孢杆菌Cry1Ab13基因进行随机诱变,构建突变体文库,筛选获得突变株Cry1Ab13-1,将该基因构建原核重组表达载体后转化到大肠杆菌中进行异源表达,并利用表达的目的蛋白进行抗虫鉴定。【结果】序列分析表明,突变株Cry1Ab13-1基因序列全长2 036bp,与原始碱基序列的一致性为97.79%,有2个碱基发生突变,导致该基因编码的氨基酸序列中有2个氨基酸改变,分别是第130位由脯氨酸变成丝氨酸,第383位由丝氨酸变成苏氨酸;改变后的氨基酸序列与原始氨基酸序列一致性为96.97%。在线分析表明,该基因与已知过敏源的序列同源性低于35%,不存在致敏性。SDS-PAGE电泳分析表明,表达蛋白分子质量大小为79.5ku,与预期结果相符。抗虫鉴定表明,处理72h时表达的目的蛋白对小菜蛾(Plutella xyllostella)幼虫的致死率达87.88%,明显高于未突变基因对照组的幼虫死亡率;对亚洲玉米螟(Ostrinia nubilalis)幼虫的致死率达81.11%,而且存活的亚洲玉米螟幼虫的生长发育受到明显抑制。【结论】成功克隆了Cry1Ab13-1抗虫基因,且该基因对小菜蛾幼虫和亚洲玉米螟幼虫均具有高效的杀虫活性。 相似文献
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基于Ecotect猪舍光热环境的模拟仿真 总被引:1,自引:0,他引:1
为探究北方不同建筑材料和不同结构形式猪舍光热环境对建筑的要求,基于Ecotect模拟分析软件,对试验猪舍和某猪场猪舍进行光热环境的模拟仿真,对2种猪舍的朝向、全年的光环境和热环境进行了模拟分析。结果表明:2种猪舍建筑的最佳朝向为南偏西25°,两猪舍均满足建筑屋顶及墙体接收太阳辐照度要求;根据光环境模拟分析,两猪舍采光系数良好,均满足设计及使用要求,满足绿色建筑标准;根据热环境分析,2种不同建筑结构猪舍冬季单位建筑面积上围护结构的热负荷指标分别为68.4 W/m2和96.9 W/m2,夏季得热平均到单位面积上围护结构的热负荷指标分别为3.2 W/m2和4.2 W/m2,试验猪舍比对照猪舍围护结构在1月份日均总失热量少约33%,在6月份日均总得热量少约31%。试验猪舍达到冬暖夏凉的效果,满足北方猪只对建筑热工性能要求。此研究方法和结果可为农业建筑设计提供新的手段和工具。 相似文献
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<正>研究以双抗体夹心ELISA法检测420枚(只)从鸡胚9日龄至雏鸡5日龄的血液抗体Ig G变化趋势,结果发现血清抗体Ig G从0.27μg/m L递增至18.27μg/m L,并以雏鸡3日龄时血液中Ig G抗体含量最高。1材料与方法1.1鸡Ig G的提取与鉴定Ig G从蛋鸡血清中提取,按何昭阳等[1]报道的方 相似文献
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以云南黑籽南瓜和白籽南瓜为砧木,"津优35号"为接穗嫁接的黄瓜为试材,研究其在适温(CK:18~20℃)、亚适温(13~15℃)、低温(8~10℃)的根区温度条件下对嫁接黄瓜生长发育和光合指标的影响。结果表明:与CK相比,低温和亚适温对黄瓜的生长产生了明显的抑制作用,株高、茎粗、叶面积、叶片数、地上部干质量和全株干质量明显降低,而根冠比和地下部干质量却有所升高,其中低温条件下的抑制效果更为显著;低温和亚适温降低了嫁接黄瓜的SPAD值、净光合速率、蒸腾速率、胞间CO_2浓度和气孔导度;而且不同的嫁接苗之间也存在差异,"黑籽"南瓜砧木在低温逆境的表现上要优于"白籽"南瓜砧木。 相似文献
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大花君子兰是世界上重要的观赏植物,其花瓣颜色在花蕾不同发育时期具有显著差异。本研究通过对花蕾3个不同发育时期花瓣进行高通量转录组测序,进而探讨君子兰花瓣发育过程中与其花色相关的基因表达情况。结果表明,共获得167 078条转录本,平均长度为673 bp,有67 512条Unigenes在各数据中被注释。GO功能富集中有24 162条基因被注释,分为分子功能、细胞组分和生物过程3大类和50个亚类。KEGG代谢通路注释中,12 930条被成功注释,主要富集与花青素合成相关的通路,包括苯丙素生物合成途径、类黄酮生物合成途径、异黄酮生物合成途径、花青素生物合成途径和苯丙氨酸代谢生物合成途径。君子兰花蕾在3个发育时期时花青素合成途径中一些关键酶(如CHS, CHI, DFR)和调控基因(MYB和bHLH)的表达量出现了显著差异。 相似文献
70.
黑龙江省森林食品产业品牌竞争力层次模糊综合评价研究 总被引:3,自引:0,他引:3
对森林食品品牌竞争力的内涵及其特征进行了分析,在此基础上对影响黑龙江省森林食品品牌的因素进行具体分析与评价,根据模型分析得出:对黑龙江省的森林食品产业品牌竞争力影响处于主要地位的依次是技术创新能力、品牌产品质量、品牌传播能力、森林食品产业的运作能力。在此基础上提出提升黑龙江省品牌竞争力的具体对策与建议。 相似文献