基于草甘膦筛选的菘蓝转化体系的建立     

唐俊  张富生  廖志华 《江西农业学报》2011,23(3)

介绍了以菘蓝草甘膦筛选的遗传转化体系,以携带植物表达载体pASM12的根癌农杆菌LBA4404对四倍体菘蓝进行叶盘法转化,在选择培养基中加入8 mg/L的草甘膦进行筛选,获得草甘膦抗性的再生植株,对再生植株进行PCR检测和草甘膦抗性试验,结果表明:PCR检测表明子叶的转化频率达30%,下胚轴的转化频率达40%;对PCR阳性植株的草甘膦抗性试验表明,多数植株在不同程度上表现出对草甘膦的抗性。  相似文献   

九江市植保体系建设情况的调查     

邱慧芳  杜红霞  陈齐信  廖志华 《江西植保》2010,33(4):181-184

近年,九江植保体系建设逐步得到加强,植保公共服务和社会管理职能日益凸现,植保工作为防灾保丰收、减灾保稳定作出了较大贡献。但因历史、体制、经费等原因,九江植保体系还存在长效机制与管理体制的缺陷,学历、职称偏低、人员老化现象严重,经费不足、工资待遇低、工作条件差等问题。今后,植保体系完善和建设主要任务就是要解决这些问题,总体思路是巩固设区市一级、完善县一级、加强乡一级,建设乡一级的关键是人、财、物＂三权＂必须归县。  相似文献   

银杏HDR基因的克隆与功能分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

杨颖舫  杨春贤  冯国庆  成瑜  李郑娜  陈敏  廖志华 《安徽农业科学》2010,38(13):6663-6665,6705

[目的]获得银杏HDR基因的克隆并研究HDR基因的功能。[方法]采用RT-PCR技术获得银杏HDR的全长cDNA,命名为Gb-HDR（GenBank登录号：DQ364231）,该基因cDNA全长为1827bp,包含1425bp的开放阅读框,编码474个氨基酸残基的蛋白;并构建GbHDR的原核表达载体pTrcGbHDR,与原核表达载体pAC-BETA共转入大肠杆菌XL1-Blue,获得β-胡萝卜素工程菌。[结果]克隆获得实际长度为1441bp的GbHDR基因,该序列包含1425bp的HDR基因ORF,编码474个氨基酸残基的蛋白,其预测分子量为53.2kD,等电点预测为5.76。功能互补分析表明,GbHDR能推动工程菌XL1-Blue＋pTrcGbHDR＋pAC-BETA超量表达β-胡萝卜素,在颜色互补平板上呈现β-胡萝卜素特有的橘黄色,证实GbHDR具有典型的HDR基因功能。[结论]获得1株可高量积累β-胡萝卜素的大肠杆菌工程菌,为最终实现β-胡萝卜素代谢工程提供侯选基因和作用靶点。  相似文献   

非化学处理对玉米象成虫的控制作用初探     

王海  屠康  廖志华  罗合峰  静玮  顾寅 《粮食储藏》2007,36(5):15-18

通过试验初步研究半导体激光、紫外线以及与植物精油结合处理等非化学处理对玉米象成虫的控制作用;结果表明:低功率范围的半导体激光处理对玉米象的控制作用不佳;紫外线照射各处理组对玉米象均表现出一定的控制作用,其中254nm 20min处理组玉米象死亡率最高,并在第4d、5d与其它各组达到显著差异;物理、生物结合处理对玉米象成虫的控制作用较好,紫外(254nm 20min) 枫杨处理组最好,从第2d开始起表现出最有效的控制作用,且与其他各组差异显著,在第4d、第5d时死亡率达到了100%;非化学处理对玉米象有较好的处理作用,结合处理效果更佳,控制机理和具体参数有待于进一步研究.  相似文献   

UV-B胁迫下Ca 2+对颠茄生理特性与次生代谢产物的调控研究     

卢克欢  刘兴  杨怡  廖志华  吴能表 《作物学报》2018,44(10):1527-1538

有害中波紫外线(Ultraviolet B, UV-B; 280~320 nm)辐射影响植物的生长和发育, Ca ²⁺是植物生长发育所必须的大量元素之一, 外源Ca ²⁺不但可以提高植物抗胁迫能力, 还对次生代谢具有调控作用。以颠茄(Atropa belladonna L.)实生苗为材料, 在UV-B辐射(10 μW cm ^-2)背景下, 研究不同浓度外源Ca ²⁺、不同处理时间对颠茄生理特性、氮代谢、次生代谢产物含量以及托品烷类生物碱代谢途径中3个关键酶基因表达量的影响。结果表明, 随着UV-B辐射时间的延长(4 ~12 d), 对颠茄的光合作用、氮代谢以及生物碱的积累产生抑制作用, 加剧了膜脂氧化程度; 经外源Ca ²⁺处理, 叶片初始荧光(F_o)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量呈下降趋势, 叶片最大光化学效率(F_v/F_m)、光合色素(总叶绿素、类胡萝卜素)含量、抗氧化酶(SOD、POD、CAT)活性均呈上升趋势, 说明Ca ²⁺有利于缓解UV-B辐射的抑制, 加强对UV-B胁迫的抗性; 在Ca ²⁺处理下, 叶片中硝态氮含量显著降低, 游离氨基酸、可溶性蛋白含量和氮代谢关键酶(NR、GS、GDH)的活性显著提高, 叶片中莨菪碱含量和东莨菪碱含量显著提高; qRT-PCR分析显示, 在外源Ca ²⁺的诱导下, 托品烷类生物碱合成途径中3个关键酶基因(PMT、TR I、H6H)表达量均有不同程度上调趋势。本研究结果可为田间种植提供理论参考。  相似文献   

萝芙木阿玛碱生物合成基因对乙酰水杨酸的响应     

马丽利  秦白富  常凯  廖志华 《西南大学学报》2013,35(4)

利用实时荧光定量PCR检测经过ASA处理的萝芙木毛状根与对照组中阿玛碱合成途径相关基因的相对表达量,同时使用HPLC分别测定阿玛碱质量分数,并对其相互关系进行分析,研究发现:阿玛碱合成下游途径基因(STR,SGD)相对表达量的变化与阿玛碱质量分数变化一致,表明阿玛碱生物合成受到这些基因特别是STR的严谨调控;MEP途径受到ASA作用,相关基因表达量提高,但阿玛碱质量分数反而降低,有可能是因为ASA导致了阿玛碱的细胞外分泌所致.  相似文献   

紫肉甘薯花色苷含量的变化规律及其与主要经济性状的相关分析   总被引：7，自引：0，他引：7  

傅玉凡  陈敏  叶小利  张启堂  廖志华  杨春贤 《中国农业科学》2007,40(10):2185-2192

 【目的】研究紫肉甘薯块根花色苷含量在生育过程中和品种间的变化规律及其与主要经济性状的相关性。【方法】栽插后20、40、60、80、100、120及140 d调查13个紫肉甘薯品种的花色苷含量、最长蔓长，分枝数，结薯数，茎、叶、块根干物质含量，块根鲜重, 块根干重，茎鲜重、茎干重、叶鲜重、叶干重，茎叶鲜重、茎叶干重，分析整株鲜重、整株干重，茎、叶、块根干重占整株干重的百分比等20个经济性状以及花色苷含量变化与其余19个经济性状的变化和10个产量性状日增长量的相关性。【结果】（1）紫肉甘薯块根花色苷含量在生育过程中存在缓慢增加型、波动变化型和曲折上升型3种变化类型, 对最长蔓长、分枝数、块根鲜重、块根干重、光合产物的分配等经济性状的发育有不同的生物学响应。（2）品种间的花色苷含量在20 d以后逐渐产生显著差异，在40～100 d完成类型分化, 与品种的分枝数、块根鲜重、块根干重、光合产物在块根中的分配比例显著负相关，与块根干物质含量、最长蔓长、茎鲜重、茎干重、整株干重及光合产物在叶中的分配比例显著正相关。（3）花色苷日增长量与块根干重日增长量显著负相关，花色苷积累与块根膨大、干物质积累存在竞争关系，这种竞争关系在不同品种中得到不同解决。【结论】由于花色苷积累与干物质积累存在的竞争关系在不同品种中的协调不同，紫肉甘薯品种间的花色苷含量在生育过程中产生显著差异和分化，存在缓慢增加、波动变化和曲折上升3种变化类型。花色苷含量的这些变化与主要经济性状有不同的相关关系。  相似文献   

1种提取产紫杉醇内生真菌高质量核酸的方法     

阳义健  吴能表  杨春贤  陈敏  唐云明  谈锋  廖志华 《西南大学学报(自然科学版)》2006,28(1):33-36

介绍1种从产紫杉醇真菌中快速提取高质量DNA和RNA的方法。该方法由传统CTAB法改进而来,包括抽提液试剂浓度的提高、纯化步骤的改进和离心力的增加等,有效保证了细胞杂质的清除和核酸质量的提高。使用该方法能在24 h内提取高质量的核酸,为进一步开展产紫杉醇真菌的分子生物学研究奠定了基础。  相似文献   

颠茄H6H基因的克隆及高效植物表达载体的构建     

王贵君  郑月  陈敏  廖志华 《安徽农业科学》2011,39(17):10194-10196

[目的]克隆颠茄（Atropa belladonna）H6H基因并构建高效植物表达载体。[方法]采用RT—PCR方法从颠茄中克隆莨菪碱-6β羟化酶和1,4丁二胺-氮-甲基转移酶基因编码区,插入经改造后获得双元三价植物高效表达载体P2301-gus,构建植物表达载体p2301-H6H,并将该表达栽体导入根癌农杆菌LBA4404和发根农杆菌C58C1。[结果]获得了可直接用于遗传改良的颠茄工程茵p2301-H6H-LBA4404和p2301-H6H-C58C1。[结论]为利用植物基因工程技术提高颠茄中生物碱含量奠定了基础。  相似文献   

农杆菌介导银杏遗传转化体系的建立及Gb-DXR基因表达载体的构建（摘要）（英文）   总被引：2，自引：0，他引：2  

冯国庆  杨颖舫  李郑娜  成瑜  杨春贤  陈敏  廖志华 《农业科学与技术》2010,11(3):28-32,114

[目的]为提高农杆菌介导的银杏遗传转化效率提供参考。[方法]以成熟的银杏种子胚为外植体,在无激素MS培养基上预培养48 h后,采用3种农杆菌（C58C1、LBA4404和EHA105）介导将GUS基因导入银杏胚中,经过组织化学染色法检测到GUS瞬时表达活性,对影响GUS基因表达的因素进行初步分析;并构建了银杏内酯前体合成途径上1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶（DXR）的表达载体。[结果]该研究得到较合适的遗传转化方案,即用银杏胚作为外植体,用携带pCAMBIA1304＋的EHA105农杆菌进行侵染,共培养3 d,进行GUS染色,结果显示转化后GUS阳性率较高。[结论]该研究为进一步的银杏转基因研究工作奠定了基础。  相似文献