大黄鱼肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶的克隆、表达及性质     

刘海燕  杨汝晴  陈玉磊  张凌晶  孙乐常  刘光明  曹敏杰 《水产学报》2022,46(7):1154-1166

为探究大黄鱼肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶(MBSP)的性质,实验采用生物信息学方法对大黄鱼MBSP进行基因检索与筛选,通过分子克隆得到大黄鱼MBSP编码区全长cDNA并构建毕赤酵母表达系统得到重组蛋白质(Lc-rMBSP),分析Lc-rMBSP的酶学性质和二级结构并通过同源建模分析Lc-MBSP的三级结构。结果显示,大黄鱼肌原纤维蛋白中存在MBSP,在55°C下活性最高。大黄鱼基因组中注释为类胰蛋白酶的基因有16条,对这些基因与淡水鱼MBSP进行系统进化树分析和多序列比对,得到同源性较高的基因序列(Lc-MBSP)。Lc-MBSP编码区全长735 bp,共编码244个氨基酸残基。通过毕赤酵母重组表达,分离纯化得到分子量约28 ku的重组蛋白质Lc-rMBSP。表达蛋白的最适温度和pH分别为50°C和8.0。圆二色谱分析表明,温度对Lc-rMBSP二级结构具有较大的影响。Lc-rMBSP在较宽的温度范围内(40～60°C)对MHC具有较高的水解活性。Lc-rMBSP的最适底物为Boc-Leu-Lys-Arg-MCA,并且特异性切割羧基侧的精氨酸残基,而不分解赖氨酸残基。通过同源建模得到Lc...  相似文献   

油桃组织培养及再生材料的原生体制备研究     

韩沙沙  张凌媛  何桥  周明佳  季俊华  王佳  李晓林  梁国鲁  郭启高 《西南大学学报(自然科学版)》2015,37(5):023-030

以油桃茎段为试验材料进行组织培养,诱导不定芽的增殖和进行愈伤组织诱导,获得茎段、叶片、愈伤组织等大量无菌材料,给原生质体制备及后续细胞融合工作提供了可重复性的试验材料.初始培养的最适培养基为:MS+1.5mg/L BA+0.1mg/L IBA,诱导率达82.9%;诱导不定芽增殖的最适培养基配方为MS+1.5mg/L BA+0.2mg/L IBA;诱导愈伤组织的最佳培养基配方为MS+1.5mg/L 2.4-D+0.5mg/L NAA+0.3mg/L BA.原生质体制备以嫩叶为分离原生质体的最佳材料,而最佳的分离酶组合为纤维素酶1%+果胶酶2%,在此条件下,原生质体的产量和活性分别为9.2×107个/g和80.4%.  相似文献   

高压脉冲电场对玫瑰精油得率与化学成分的影响     

周亚军  薛长美  张苏苏  姚光明  张凌  王淑杰 《中国农业文摘-农业工程》2017,29(5):5-8

高压脉冲电场(Pulsed Electric Fields,PEF)辅助水蒸气蒸馏提取玫瑰精油。选取影响提取效率的3个主要参数即电场强度,脉冲数和蒸馏时间进行优化。为了证明该方法的可行性,在优化条件下得到的精油与传统水蒸气蒸馏获得的精油进行定性和定量分析比较。根据精油得率,可以得出最优参数为电场强度20k V/cm,脉冲数为8,蒸馏时间为2h。经高压脉冲电场处理后精油性质没有明显改变甚至质量有所提高。然而,精油中甲基丁香酚含量提高,对精油性质产生不良影响。  相似文献   

甬优9号水稻机插高产栽培技术     

章志兴  张伟春  张凌  吕飞良  汪顺法  朱小芳  鲍兰新  张宝良  方桂清  王旭华  鲍艳红  祝丽娟 《现代农业科技》2010,(1):65-65,68

水稻机插技术是一项系统工程技术,总结了甬优9号机插高产栽培技术,包括机插秧苗培育、机械插秧、大田管理等内容,以供机插水稻种植者参考。  相似文献   

犬源肺炎克雷伯菌的分离鉴定及对头孢菌素类药物的耐药性分析     

叶慧雯  陈鸣远  黄海钊  郑恩沛  张凌麒  周彬  张红 《黑龙江畜牧兽医》2023,(23):71-76+133-134

为了探究犬源肺炎克雷伯菌对头孢菌素类药物的耐药情况，试验对从海南省12个市县公园中采集的357份新鲜犬粪便拭子，采用分离培养初筛、形态学观察、药敏试验及PCR扩增16S rRNA、耐药基因检测及接合转移试验等方法对细菌特性进行研究。结果表明：共鉴定得到9株耐药性肺炎克雷伯菌，其中8株呈现多重耐药性，对氨苄西林、复方新诺明和头孢曲松的耐药率为88.9%,对庆大霉素、环丙沙星、头孢吡肟、左氧氟沙星、阿米卡星也呈不同程度的耐药(22.2%～55.6%);耐药基因bla_CTX-M、bla_TEM、bla_SHV、bla_CTX-M-14、bla_CTX-M-15的检出率分别为100%、66.7%、55.6%、33.3%、44.4%,未检出bla_CTX-M-2、bla_CTX-M-64和bla_CTX-M-123基因；分离菌株能通过接合途径发生耐药基因的水平传递。说明排泄于公园环境的犬粪便含有耐头孢菌素类药物的肺炎克雷伯菌，绝大多数菌...  相似文献