鸡传染性支气管炎病毒HN99株N基因在大肠杆菌中的表达及产物免疫活性检测          下载免费PDF全文

张淑霞  贺秀媛  崔保定 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2007,35(4):32-36

鸡传染性支气管炎病毒HN99株核蛋白(N)基因PCR产物经BamHⅠ、HindⅢ双酶切,克隆入大肠杆菌原核表达载体pMAL-p2X,构建重组表达质粒pMAL-p2X-N,转化大肠杆菌TB1并进行诱导表达。通过pMALTM融合蛋白纯化系统对表达产物进行非变性纯化,将纯化的N蛋白按常规方法免疫新西兰大白兔,制备兔抗鸡传染性支气管炎病毒N蛋白的多克隆抗体,并用ELISA法检测其生物活性。结果表明,表达的重组核蛋门纯化后出现2条带,相对分子质量分别约为92和82 ku,与Western blot出现的2条蛋白带一致;纯化的重组蛋白经裂解因子作用后,出现2条蛋白带,相对分子质量分别为45和35 ku,与预期结果相符合;制备的多克隆抗体可与不同鸡传染性支气管炎病毒株发生反应,与亲本毒株的反应性略高于与其他毒株的反应性。以上结果表明,原核表达的可溶性N蛋白具有高度的生物活性,有望作为新的基因工程抗原用于鸡传染性支气管炎病毒的群特异性诊断。  相似文献   

抗仔猪大肠埃希菌病高免卵黄抗体粉的研制   总被引：2，自引：1，他引：1  

刘海生  杨增岐  张淑霞  党如意  王波  张鹏  樊荣 《动物医学进展》2009,30(9):15-19

选用陕西部分地区规模化猪场分离的大肠埃希菌,通过营养琼脂增菌培养,制成油佐剂灭活疫苗免疫非免大肠埃希菌疫苗的健康蛋鸡,用微量凝集试验检测蛋鸡抗体水平,当抗体水平达8 log2以上时收取鸡蛋,分离卵黄用喷雾干燥机140 ℃进气、72 ℃出气,喷雾干燥成粉.选择未经过大肠埃希菌疫苗免疫母猪所产的新生健康仔猪50头分5组,按1、2、3、4 g/头每天饲喂进行预防试验.预防试验结果表明,2 g/头以上剂量饲喂制备的高免卵黄抗体粉能有效预防仔猪大肠埃希菌病.治疗试验结果表明,高免卵黄抗体粉对人工感染病例治愈率为90%,而应用庆大霉素的治愈率仅为50%.  相似文献   

朱鹮新城疫病毒陕西分离株F基因的克隆与序列分析     

郑亚红  张鹏  杨增岐  韩青松  张淑霞  党如意 《动物医学进展》2010,31(7):16-21

新城疫病毒(NDV)的F蛋白与病毒的致病性和免疫应答密切相关。为了了解朱鹮源NDV陕西分离株的变异情况及进化地位,采用RT-PCR方法对NDV陕西分离株F基因的主要功能区片段进行了扩增,并进行了序列测定及遗传进化树构建。序列分析表明,该分离株扩增片段的长度为535 bp,与预期扩增片段长度大小一致。其F基因裂解位点的氨基酸组成与NDV强毒株的特征性结构(112R-R-Q-K-R-F117)一致。系统进化树分析表明,该NDV分离毒株为基因Ⅶ型,与近年来报道的我国家禽流行的NDV基因型一致。  相似文献   

附红细胞体病病原学研究概况   总被引：11，自引：1，他引：11  

刘芳宁  杨增岐  张淑霞 《动物医学进展》2003,24(3):31-34

附红细胞体病是近几年来才引起医学和畜牧兽医工作者注意的一种人畜共患病。文章从附红细胞体的分类、种类、形态、染色特性、结构、在机体的分布及增殖方式、对理化因素的抵抗力、致病性、培养方法及实验室诊断方法等方面对其进行了综  相似文献   

新城疫病毒V4株L基因的克隆与序列分析   总被引：3，自引：0，他引：3  

刘芳宁闫丽辉  曹殿军刘培欣杨增岐  张淑霞 《中国兽医科技》2004,34(6):25-29

设计了2对引物V4L1、V4L2和V4L3、V4L4，用RT-PCR法对新城疫病毒(NDV)V4克隆株的L基因进行了分段克隆。用V4L1、V4L2扩增出约4．1kb的V4LA片段，用V4L3、V4L4扩增出约3．5kb的V4LB片段，分别对克隆出的2个片段进行序列测定，并用DNAsis软件比较分析后进行拼接，得到长约7．2kb、包含有NDVV4克隆株L基因全长的核苷酸序列。NDVV4克隆株L基因mRNA全长为6704bp，拥有1个6615bp的开放阅读框，推测其编码的氨基酸数为2204个。氨基酸同源性分析表明：V4克隆株与HB92 V4株L基因的同源性为99．0％，与LaSota、B1、B1T(美国Takaaki分离株)、Beaudette C、Clone30、F48E9、SF02和ZJ1株的同源性为94．1％～96．5％。  相似文献   

鸡腺胃型传染性支气管炎病毒的分离与初步鉴定     

张淑霞  杨增岐  贺秀媛  宝良  王建华  张艳珍  张锦俊 《动物医学进展》2006,27(12):79-81

从陕西省周至县某肉鸡场发生疑似腺胃型传染性支气管炎的鸡群中采集病料,经鸡胚接种分离到1株病毒。电镜观察病毒粒子呈圆形或椭圆形,大小80nm~130nm,具有囊膜和纤突,呈典型冠状病毒形态;该病毒无直接血凝性,经10g/L胰酶处理后血凝价平均高达8log2以上;新城疫病毒干扰试验表明,分离毒能抑制NDV在鸡胚中增殖;人工感染3个品种的1日龄雏鸡35只,其中尼克红鸡很快出现临床症状并死亡,死亡率90%。结合流行病学调查、临床症状及病理变化初步鉴定该分离毒为腺胃型传染性支气管炎病毒。  相似文献   

高黎贡山鸟类物种多样性纬度和海拔梯度分布格局     

杨学俊  沈秀英  郭龙洁  李迎春  谭坤  张淑霞  王荣兴  李娜 《四川林业科技》2023,(3):88-94

纬度和海拔是影响生物多样性分布格局最重要的环境梯度，同时关注纬度和海拔梯度的影响对区域生物多样性保护有实际指导意义，然而目前相关研究还较少。在生物热点地区高黎贡山选取不同纬度的姚家坪（25.94°N）、亚坪（27.14°N）和独龙江（27.90°N）三个地点，每个地点在2 000～2 400 m海拔范围采用样线法进行鸟类调查，利用物种丰富度和Jaccard相似性指数分析海拔梯度和纬度梯度上鸟类多样性的分布格局，并比较海拔梯度和纬度梯度对鸟类多样性的影响。结果表明：（1）在纬度梯度上，低纬度的姚家坪鸟类物种数最高，且三个地点之间鸟类物种Jaccard相似性指数均较低，低纬度的姚家坪和亚坪之间鸟类组成相似性略高；（2）在海拔梯度上，姚家坪、亚坪、独龙江鸟类物种数峰值分别出现在2 200 m海拔段、2 400 m海拔段、2 300 m海拔段，且每个地点的不同海拔段间，鸟类物种Jaccard相似性指数均较低；（3）研究区域100m海拔梯度上的Jaccard相似性指数与1°纬度梯度相近。研究结果表明，高黎贡山海拔和纬度空间梯度上鸟类群落的Jaccard相似性指数均较低，整个区域鸟类群落组成差异极...  相似文献   

早春日光温室结球莴苣高效栽培技术     

江志训  王殿纯  孙兆法  张淑霞 《蔬菜》2010,(11):11-12

<正>结球莴苣叶片脆嫩爽口,具有特殊的清香味,并有药用价值,一直以来是欧美、日本等地的主要蔬菜之一,近年来也深受我国消费者的喜爱,在我国沿海一带的开放大城市发展较快。由于其幼苗期对温度的适应性强,人们开始在12月上旬左右播种育苗,大约30d后定植于日光温室中,50～60d即可收获,作为春节的供应菜,可获得较高收益。  相似文献   

苗用型大白菜采种株菌核病的发生与防治     

张淑霞  杨晓云  张清霞  司朝光  宋永骏 《农业科技通讯》2023,(4):217-219

苗用型大白菜采种株春季在塑料大棚生长期间易发生菌核病，病情严重时会使植株死亡而无法采收到种子，给其生产研究和品种选育带来重大损失。本文作者从春季苗用型大白菜采种株菌核病的发病症状、发病规律、致病的病原菌特征特性及发病流行规律进行了总结，提出了针对菌核病的防控技术，以利于生产实践。  相似文献