葡萄赤霉素受体基因VvGID1A 的分离、亚细胞定位及表达分析     

王西成  吴伟民  房经贵  钱亚明  王晨  宋长年  赵密珍 《园艺学报》2013,40(5):839-844

 以‘藤稔’葡萄（Vitis vinifera × V. labrusca‘Fujiminori’）的花序、茎尖、叶片以及果实为 试材,应用RT-PCR 结合RACE 技术克隆得到GID1A 同源基因全长cDNA 序列,命名为VvGID1A（基因 登录号：JQ669511）,全长1 681 bp,含有1 个1 035 bp 的开放阅读框,编码344 个氨基酸,该氨基酸序 列还包含两个激素敏感酯酶家族保守的结构域HGG 和GXSXG。系统进化分析表明,VvGID1A 与蒺藜苜 蓿、棉花和拟南芥之间的一致性分别为70.25%、70.08%和68.21%。荧光定量RT-PCR 结果表明,VvGID1A 在葡萄花序、老叶和卷须中表达水平高于茎尖和幼叶,而在GA 处理果实中的表达水平低于未处理的对照 样品。瞬时表达载体的构建及洋葱表皮细胞转化后,洋葱表皮细胞的瞬时表达结果显示,该基因的表达 产物定位在细胞核上。  相似文献   

尿素对葡萄5 个氮代谢相关基因表达的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

初建青  岳林旭  房经贵  刘洪  宋长年  张演义 《园艺学报》2013,40(2):221-230

 以‘藤稔’葡萄为试材,利用半定量RT-PCR 和荧光定量PCR 技术对5 个葡萄氮代谢基因 VvGHD（JF796045）、VvNiR（JF796046）、VvNR（JF796047）、VvGS（JF796048）和VvAS（JF796049） 在施用尿素后的表达情况进行了分析。5 个基因在葡萄叶面喷施尿素后不同时间段的表达量存在显著差 异,整体呈先升高后降低的趋势;VvGDH 最高表达水平发生在尿素喷施后48 h,VvNR 和VvNiR 最高表 达水平发生在24 h,VvGS 最高表达水平发生在6 h,VvAS 最高表达水平发生在2 h。叶面喷施比土壤施用 尿素叶中5 个基因表达高峰出现的时间早,且表达水平高;土壤施尿素后叶中5 个基因对尿素的响应时 间比根中延后,但响应强度明显高于根中。  相似文献   

DNA技术在农业上的应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

房经贵 《农业生物技术学报》2014,(12)

随着分子生物学的发展,基于DNA分子的多种技术在提高作物育种效率、保护种质资源、改善农产品品质、提高农产品产量和保护生态环境等方面都显示出很大潜力,在农业生产中的作用日趋重要。为更好地了解DNA技术在农业上的应用情况,并达到促进DNA技术为现代化农业服务的目的,本研究对DNA分子标记技术、转基因技术以及基因信息等在农业上的应用进行了较有特点的介绍,并对其发展前景作了进一步展望。  相似文献   

红叶葡萄品种叶片花色苷种类的鉴定与分析     

葛孟清  钟嵘  卢亚萍  黄超  肖鑫  房经贵 《核农学报》2022,36(11):2239-2248

为解决葡萄园中由葡萄修剪产生的大量叶片残留问题,提高修剪产生的叶片的利用价值,本试验以8612、玫瑰香、红鸡心3个红叶葡萄品种和葡萄园皇后、玫瑰露、秋红3个绿叶葡萄品种不同发育时期的叶片为研究对象,利用MATLAB软件对整张叶片的图像数据进行提取,计算色差值;利用超高效液相-质谱法(LC-MS)检测花色苷的成分和含量,探讨不同发育时期叶片中花色苷不同组分的变化规律。结果表明,不同发育时期的红色和绿色叶片色差指数L^*、a^*、b^*变化趋势明显不同,共检测到18种花色苷组分,包括花青素类(4种)、甲基花青素类(4种)、花翠素类(4种)、甲基花翠素类(2种)和二甲基花翠素类(4种)。以上5类花色苷在红色叶片中均被检测到,绿叶品种中未发现花翠素类和甲基花翠素类花色苷。花色苷定量结果显示,红色叶片不同发育时期花色苷含量为123.468~855.001 mg·100g^-1,绿色叶片花色苷含量为4.407~44.517 mg·100g^-1。甲基化类花色苷占比随叶片发育均逐渐增大。花色苷酰化修饰类型分析结果发现,香豆酰化类型花色苷含量高于其他酰化类型花色苷,在花色苷总含量中所占比例较高,而阿魏酰化和糖酰化类花色苷含量非常少。色差和不同类型花色苷成分的相关性分析结果表明,红色叶片的色差指数与更多类型的花色苷含量存在相关关系。红色葡萄叶片中花色苷种类丰富、含量较高,是花色苷类化合物的潜在来源,具有很大的利用价值。本研究通过对叶片中花色苷成分和含量进行了详细调查,为今后葡萄园中叶片的加工再利用提供了依据。  相似文献   

基于EST 数据库的葡萄成花途径的预测及分析     

刘丹  慕茜  李晓鹏  刘更森  李玉  张彦苹  房经贵 《园艺学报》2014,41(1):26-34

 以拟南芥成花途径相关基因序列为探针,对葡萄EST 数据库进行同源检索筛选,获得相应 的同源EST 序列,并以葡萄不同发育时期的不同器官cDNA 为模板,通过半定量RT-PCR 反应研究了葡 萄成花途径相关基因的存在与表达情况,对葡萄成花途径的进行了分析与判断。研究发现,葡萄成花途 径中的基因在不同器官中的不同时期的时空表达存在强弱的差异。  相似文献   

中国主栽葡萄芽变品种及其性状特点     

刘文  徐文清  付广清  上官凌飞  房经贵 《落叶果树》2024,(1):43-46

芽变选种是一种简便易行、经济有效、周期短和进程快的育种方法。中国通过芽变选种选育的葡萄品种较多,对夏黑、巨峰等主栽品种的芽变品种及其性状表现进行了总结分析。  相似文献   

葡萄重要性状基因定位及其应用     

裴丹  刘众杰  葛孟清  董天宇  任艳华  房经贵 《南京农业大学学报》2022,(2):205-213

葡萄是具有重要经济价值的果树之一,其遗传育种学广受研究者关注.由于葡萄童期长、遗传杂合度高,传统杂交育种选育新品种通常耗时长、效率低.因此,通过构建葡萄遗传连锁图谱、对数量性状位点(quantitative traits locus,QTL)进行定位能够解析葡萄杂交群体中分子标记与表型之间的关系,更有针对性地选择育种亲...  相似文献   

外源赤霉素诱导‘藤稔’葡萄果实差异表达基因的cDNA-RAPD分析     

王西成  宋长年  张彦苹  冷翔鹏  孙欣  房经贵 《果树学报》2012,(5):733-739

【目的】为鉴定葡萄果实赤霉素诱导响应基因,【方法】应用cDNA-RAPD技术,以鲜食葡萄品种‘藤稔’为研究对象,对赤霉素处理后果实发育过程中基因表达进行了mRNA指纹分析。【结果】通过16条随机引物的筛选,共分离得到61个差异表达的转录衍生片段(TDF),其中增强表达或赤霉素诱导下特异性表达TDF42条,抑制表达19条。对其中18个TDF进行了克隆、测序和序列分析发现,17个TDF与NCBI已有序列同源,其中10个为已知功能基因,另有1个TDF无同源序列。对选取的6个TDF进行半定量RT-PCR验证,结果表明3个基因片段在处理条件下均特异表达或上调表达,另外3个基因片段在处理条件下均未见表达或下调表达,这与cDNA-RAPD表达谱结果相一致。【结论】利用cDNA-RAPD技术成功分离了部分受赤霉素诱导的差异表达基因。  相似文献   

葡萄SA 和JA 信号转导重要基因克隆及其对外源信号应答分析   总被引：4，自引：0，他引：4  

王文艳  岳林许  张演义  初建青  张晓莹  房经贵 《园艺学报》2012,39(5):817-827

 以‘藤稔’葡萄（Vitis vinifera × V. labrusca‘Fujiminori’）的叶片为试材,克隆了水杨酸（SA）和茉莉酸（JA）信号转导途径中重要基因NPR1、PR1、COI1和LOX2,利用定量和半定量PCR法研究其在SA与JA处理后的表达情况,发现PR1特异地受到SA诱导,而施加JA后抑制其表达;LOX2特异地受到JA的诱导,SA处理抑制其表达。上、下游基因的表达情况说明,PR1和LOX2可作为葡萄SA和JA信号转导途径的标记基因,同时研究发现葡萄中NPR1、PR1、COI1和LOX2表达量的快速上升出现在SA和JA处理后6 ~ 24 h;SA与JA信号转导途径存在着协同或拮抗作用,它们之间的相对浓度决定着这种相互关系的变化。  相似文献   

铜胁迫下葡萄植株的生理响应和铜转运蛋白基因VvCTR1的克隆及分析     

刘众杰  李傲  崔梦杰  许瀛之  上官凌飞  贾海锋  王晨  房经贵 《南京农业大学学报》2018,(2)

[目的]本文旨在研究重金属铜对葡萄植物生长发育的影响,为揭示重金属铜对植物的伤害机制提供理论依据。[方法]采用过量的硫酸铜以及硫酸铜与其螯合剂混合液处理葡萄植株幼苗,以Hoagland溶液为对照,分析根和叶片的发育情况,叶绿素含量以及铜在植株中的分布情况;克隆了铜转运蛋白基因VvCTR1,分析其在果实发育过程中的表达量,并对其结构特征和物种间的同源性进行分析,同时分析铜胁迫下葡萄根、茎和叶中的VvCTR1表达情况。[结果]与对照相比,过量的硫酸铜、硫酸铜与柠檬酸或EDTA混合处理可以抑制葡萄植株新根的发育数量和长度,促进叶片叶绿素的降解和落叶速率,增加叶柄基部乙烯的产生以及多聚半乳糖醛酸酶和纤维素酶活性,尤其以硫酸铜和EDTA混合处理伤害更明显。Cu~(2+)在植株叶、茎、根中的含量从小到大分别依次为上部叶片、中部叶片、下部叶片,上部茎、中部茎、下部茎,老根、幼根;硫酸铜处理植株中的Cu~(2+)含量高于对照,并且随着处理时间的延长含量不断升高,尤其是硫酸铜与柠檬酸或者EDTA混合处理植株中Cu~(2+)含量更高。克隆的铜转运蛋白基因VvCTR1中无内含子,其编码的蛋白含有3个跨膜区TMD1~3,N端含有1个甲硫氨酸富含区。VvCTR1基因的表达量随着果实发育逐渐降低。无论在根中还是在不同部位的茎和叶中,VvCTR1都能被铜诱导。[结论]过量的铜会对葡萄植株造成伤害,尤其与Cu~(2+)的螯合剂柠檬酸或EDTA同时存在时,能使更多的Cu~(2+)进入植物体内,最终引起葡萄植株死亡。  相似文献