树体休眠期前苹果花芽对低温早期响应的转录组分析     

田玉珍  党兆霞  吕前前  毛娟  褚明宇  马宗桓  左存武  陈佰鸿 《果树学报》2020,(5):615-624

【目的】从总体上了解苹果花芽早期响应低温信号的基因表达情况,以期了解苹果休眠期花芽早期反应的分子网络,从而为苹果抗冷性研究提供理论依据。【方法】于树体休眠前收集花芽,低温(4℃)处理45 min(T1)、90 min(T2)和240 min(T3),常温处理为对照(T0),利用转录组技术分析了树体休眠前苹果花芽响应低温信号早期的基因表达情况,利用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)进行数据验证。【结果】与对照相比,T1、T2和T3分别获得237、508和990个差异表达基因(Differentially expressed genes,DEGs)。GO富集分析表明:处理前期的DEGs主要涉及碳水化合物有关的代谢、单体碳水化合物代谢过程,而后期主要涉及刺激反应、胁迫响应和DNA的转录等生物学过程。KEGG富集分析表明DEGs主要参与了"植物-病原菌互作","植物激素信号转导"等。其中,在响应低温信号后,参与钙调素/钙调素类蛋白(Ca2+–CaM/CML)代谢的基因MDP0000808334、MDP0000263349等及参与脱落酸(Abscisic acid,ABA)、油菜素内酯(Brassinosteroid,BR)和赤霉素(Gibberellin,GA)信号代谢的基因MDP0000189486、MDP0000122792和MDP0000287039等上调表达显著。【结论】Ca2+信号通路可能主要参与了苹果花芽的冷响应过程。此外,ABA、BR和GA等激素可能在苹果花芽响应低温信号中也起重要的调控作用。  相似文献   

葡萄NHX基因家族的鉴定和表达分析     

卢世雄  许春苗  何红红  梁国平  王萍  陈佰鸿  毛娟 《果树学报》2019,(3)

【目的】探究葡萄NHX基因家族生物信息学特性及在非生物胁迫下的表达情况,以期筛选出与非生物胁迫相关的家族成员,从而为葡萄抗逆性研究提供理论依据。【方法】以拟南芥、水稻及胡扬NHX基因序列为基础,对葡萄NHX基因进行同源克隆、染色体定位、氨基酸组成成分、理化性质、motif、蛋白质二级结构以及基因芯片表达等分析,同时利用qRT-PCR技术分析葡萄NHX基因家族表达情况。【结果】葡萄NHXs可分为2个亚族,主要分布在第1、5、7、14、15、19号染色体上,其外显子数为12～23个;VvNHX06的氨基酸数最少,有291个,VvNHX07的氨基酸数最多,有1141个。Motif分析发现,N端含有典型的锌指结构,蛋白质二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。亚细胞定位预测发现,葡萄NHX基因主要分布在细胞膜、内质网、线粒体、液泡和细胞质中。基因芯片表达显示,使用NaCl、ABA和PEG处理后,葡萄叶片中VvNHX02和VvNHX06基因表达量均呈上升趋势。qRT-PCR分析结果表明,在200 mmol·L~(-1)NaCl、100 mmol·L~(-1)ABA处理后的葡萄叶片中,VvNHX06表达量显著增加,分别是对照的30倍和60倍。用10%PEG处理实验材料6 h后,VvNHX05的表达量明显增加,是对照的5倍。【结论】VvNHX05和VvNHX06基因与植物耐盐和抗旱性有密切关系,可为葡萄的逆境胁迫机制研究提供参考。  相似文献   

园艺植物生物技术课程教学改革探索   总被引：2，自引：0，他引：2  

毛娟  陈佰鸿  杨宏羽  李作进 《草原与草坪》2015,(4):109-112

针对园艺植物生物技术课程教学中存在的理论教学内容繁多、学生相关理论基础薄弱、实验教学性质偏重验证性、理论教学与实践教学的同步性差以及考核体系单一等问题,从革新理论教学模式、推行开放性实验教学、突出教学与科研结合、建立多元化考核体系等方面进行了教学改革与探索,从激发学生兴趣和学习主动性为切入点,培养学生的创新精神与实践操作能力,提高课程教学的效果。  相似文献   

甜樱桃试管苗移栽过程中根系活力、叶片光合特性及超微结构的变化     

李福慧  毛娟  陈佰鸿  米宝琴  谢永东 《甘肃农业大学学报》2016,(1):77-83

【目的】阐明甜樱桃试管苗在炼苗移栽过程中发生的适应性变化.【方法】研究了甜樱桃试管苗闭瓶炼苗5d、开瓶炼苗10d、移栽10d、移栽25d、移栽80d时的叶片光合特征参数、叶绿素荧光特性及叶绿体超微结构,叶绿素含量、根系活力等生理特征的变化.【结果】甜樱桃幼苗在炼苗过程中叶片叶绿素含量、根系活力、最大净光合速率、以及PSⅡ的最大光化学效率不断升高,而在移栽后10d均出现了显著的下降;移栽过程中,初期由于对外界环境的不适应,出现缓苗等情况,使得根系活力下降,叶片光合能力降低,但移栽80d时叶绿体内淀粉粒和嗜饿小体体积变大,片层结构清晰、完整且有序,根系活力和叶绿素含量均在移栽80d时显著增大.【结论】甜樱桃试管苗在炼苗移栽过程中叶片光合特性、超微结构及根系活力随着移栽时间的延长,其叶片的光合效率明显提高,并有大量的光合产物积累;同时根系吸收水分、养分的能力及抗逆能力都明显增强,到移栽80d时试管苗已完全适应大田环境.  相似文献   

马铃薯3个StSnRK2基因启动子的克隆与序列分析     

范阿棋  毛娟  杨宏羽  张俊莲  王蒂  白江平 《甘肃农业大学学报》2016,(6)

【目的】克隆马铃薯StSnRK2.1、StSnRK2.2和StSnRK2.4基因的启动子片段,为马铃薯StSnRK2基因表达与功能研究奠定基础.【方法】以马铃薯(Solanum tuberosum L.)品种‘陇薯3号’为试材,采用PCR技术从马铃薯基因组DNA中分离得到了3个SnRK2基因启动子.通过PCR扩增,酶切鉴定,测序,利用PlantCARE和PLACE在线分析软件预测分析所得序列.【结果】获得与预期大小基本一致的目的片段,分别为StSnRK2.1基因启动子、StSnRK2.2基因启动子和StSnRK2.4基因启动子.分析软件预测分析表明,启动子调控序列中除含有典型的真核生物核心启动子外,还含有多个CAAT-box、TATA-box等启动子元件,以及相应的ABRE、DRE/CRT、LTRE等与激素应答、逆境胁迫相关的顺式作用元件.【结论】这些结果预示StSnRK2.1、StSnRK2.2和StSnRK2.4基因调控机制相对复杂,可能参与了ABA,干旱,盐等多种逆境胁迫信号的转导过程,在马铃薯逆境胁迫应答过程中具有重要的功能作用.  相似文献   

葡萄CIPK基因家族的鉴定表达分析     

路志浩  霍建强  马钰  胡炜  毛娟 《西北农业学报》2017,26(11):1619-1630

以水稻、玉米、拟南芥中已知CIPK基因注册序列为基础,从葡萄基因组数据库中电子克隆出16条CIPK基因。对其理化性质分析表明,除VvCIPK10编码的251个氨基酸数目外,其余氨基酸数目基本稳定为300~470。整个CIPK家族的理论等电点为6~9。基因结构分析表明,VvCIPK01、VvCIPK03、VvCIPK04、VvCIPK08、VvCIPK09、VvCIPK13包含外显子数都大于10;VvCIPK02、VvCIPK05、VvCIPK06、VvCIPK07、VvCIPK10、VvCIPK11、VvCIPK12、VvCIPK14、VvCIPK15、VvCIPK16包含外显子数都小于7。聚类分析表明,CIPK基因被分为4个亚族,且在每一个亚族中都包含葡萄和拟南芥的CIPK基因家族成员,说明它们具有很高的同源性。对CIPK蛋白质的二级结构分析表明,葡萄CIPK基因家族所编码的蛋白质均以α-螺旋和不规则卷曲为主,而β-转角最少。亚细胞定位后发现,VvCIPK基因在细胞质中表达最多。对葡萄CIPK基因家族上游2kb区域顺式作用元件分析表明,VvCIPK13对于ABA和脱水胁迫的响应最为明显,葡萄CIPK基因家族对于MYB转录因子和WRKY转录因子均有响应。荧光定量分析表明,VvCIPK15在根中表达量最多,在茎中表达量最少;在不同处理下该基因表达差异性显著。其中,受PEG、ABA、NaCl诱导后呈明显上调表达,其表达量依次为PEGNaClABA。同时该基因在受到高、低温胁迫时表达量也有明显上调,9个处理中只有在山梨糖中呈下调表达。推测该基因能够参与调控干旱、盐碱、低温等逆境过程。  相似文献   

不同砧木对‘赤霞珠'葡萄生长及果实品质的影响   总被引：5，自引：2，他引：3  

李新文  陈佰鸿  毛娟  左存武  苏静  陈韬 《甘肃农业大学学报》2018,(1):71-77

【目的】研究不同砧木对酿酒葡萄‘赤霞珠'生长发育和果实品质的影响.【材料】以4年生的‘赤霞珠/3309C'‘赤霞珠/5BB'‘赤霞珠/贝达'和‘赤霞珠/SO4'砧穗组合为处理,‘赤霞珠'自根苗为对照,测定不同砧木‘赤霞珠'的生长、光合性能、荧光参数和果实品质指标.【结果】以‘5BB'和‘3309C'为砧木能够显著增加‘赤霞珠'的新梢长度和粗度,但叶面积却显著减小,各处理间叶片干鲜比无显著差异;以‘3309C'、‘SO4'、‘5BB'和‘贝达'为砧木的‘赤霞珠'净光合速率(Pn)分别比自根苗高25.4%、23.2%、14.3%、3.8%;‘赤霞珠/3309C'的可溶性固形物和可溶性总糖含量均最高,分别达23.01%和21.48%,‘赤霞珠/5BB'次之.主成分分析显示:各处理在果实品质方面的综合排名由高到低的顺序为‘赤霞珠/3309C'、‘赤霞珠/5BB'、‘赤霞珠/SO4'、‘赤霞珠/贝达'、‘赤霞珠'自根苗.【结论】以‘3309C'和‘5BB'为砧木的‘赤霞珠'在光合特性和果实品质方面均表现均较好,更适宜在该地区推广种植.  相似文献   

不同类型清洁能源烤房对烤后烟叶香气成分的影响     

杨楠  顾建国  马文辉  林娟  毛娟  张凯  王晓强  许跃奇 《贵州农业科学》2018,(8)

为清洁能源烤房的推广应用提供科学依据,通过气相色谱-质谱联用仪对烤后烟叶的中性致香成分进行定性/定量分析,探究不同类型清洁能源烤房对烤后烟叶香气质量的影响。结果表明:不同类型清洁能源烤房较煤燃料烤房烤后烟叶中性致香成分的含量均有一定程度提高,但对不同香气成分的影响程度不同。其中,醇基燃料烤房对类西柏烷降解产物和其他类香气物质的影响最明显,热泵烤房对美拉德反应产物和芳香族氨基酸降解产物的影响最明显,太阳能辅助加热烤房对新植二烯的影响最明显,隧道式流水线烤房对类胡萝卜素降解产物的影响最明显。  相似文献   

pBI121-Lyz-GFP表达载体的构建及其在和田苜蓿愈伤组织中的转化   总被引：3，自引：0，他引：3  

柴燕文  马晖玲  谢小冬  毛娟  田晓玲  任振新 《农业生物技术学报》2008,16(5)

将绿色荧光蛋白(GFP)基因片段插入到pBIl21-Lyz多克隆区,构建了重组表达载体pBI121-Lyz-GFPo经Sma Ⅰ与BamH Ⅰ双酶切和PCR验证重组质粒,均能得到约750 bp的目的片段,通过进一步测序证明,GFP基因已成功地连接到pBI121-Lyz中,且重组质粒连接方向正确.利用冻融法将重组质粒导人根癌农杆菌(Agrobactcrium tumenfaciens)LBA4404,用叶盘法转化和田苜蓿(Medicago sativa L.cv.Xinjiang Daye),筛选出具有卡那霉素抗性的愈伤组织,经PCR扩增和荧光显微镜检测证明,重组基因已成功地转化到和田苜蓿愈伤组织中.  相似文献   

pBI121-LyrZ-GFP表达载体的构建及其在和田苜蓿愈伤组织中的转化     

柴燕文  马晖玲  谢小冬  毛娟  田晓玲  任振新 《农业生物技术学报》2008,16(5)

将绿色荧光蛋白（GFP）基因片段插入到pBI121-Lyz多克隆区,构建了重组表达载体pBIl21-Lyz-GFP。经SmaⅠ与BamHⅠ双酶切和PCR验证重组质粒,均能得到约750bp的目的片段,通过进一步测序证明,GFP基因已成功地连接到pBI121-Lyz中,且重组质粒连接方向正确。利用冻融法将重组质粒导入根癌农杆菌（Agrobacterium tumenfaciens ） LBA4404,,用叶盘法转化和田苜蓿（Medicago sativa L. cv. Xinjiang Daye）,筛选出具有卡那霉素抗性的愈伤组织,经PCR扩增和荧光显微镜检测证明,重组基因已成功地转化到和田苜蓿愈伤组织中。  相似文献