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11.
农杆菌浸润瞬时表达方法不仅在蛋白互作、鉴定基因沉默抑制子及基因功能研究方面得到广泛应用,目前还应用在小RNA的研究中.在对植物microRNA的研究中,农杆菌浸润方法通过将将转基因导入农杆菌浸润本生烟瞬时表达,可以快速、稳定地对植物microRNA进行检测和鉴定,样品在几天内就可分析完成,比获得稳定遗传的转基因有优势.笔者借鉴国外拟南芥microRNA瞬时表达分析的方法,克隆了番木瓜的miR62a前体序列连接到双元表达载体pSuper1300上构建成35S::cpa-miR162a质粒,导人农杆菌GV3101后浸润本生烟,浸润后48 h提取本生烟叶片总RNA后通过miRNA northern blot检测到miR162a,而本生烟和番木瓜自身则无法检测到低丰度的miR162a.本文介绍的农杆菌浸润瞬时表达方法能够在体外加工产生成熟的miRNA,该技术有助于对microRNA的结构-功能的相关性及靶标验证进一步研究. 相似文献
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14.
根据藜科植物的肌动蛋白(Actin)基因编码区保守序列设计一对简并引物,提取盐生草(Halogeton glomeratus)叶片的总RNA,运用RT-PCR技术扩增出Actin基因的核心序列并连接到pMD19-T载体,阳性克隆经PCR检测后进行测序。序列分析表明,盐生草Actin基因核心序列长度为598bp,编码198个氨基酸,并在GenBank中注册,登录号为KF699314,由盐生草Actin基因推导的氨基酸序列与其他几种耐盐植物的同源性均在94%以上,具有高度的保守性。采用荧光定量RT-PCR技术分析其Actin基因在盐生草不同器官的表达情况,结果显示其表达量恒定无差异,表明克隆的Actin基因可作为盐生草内参基因来研究其相关耐盐基因的表达。 相似文献
15.
为了探究液体酸化剂富酸宝对水质以及母猪繁殖性能的影响,实验选取体况相近,2~4胎长大二元杂母猪36头,随机分成2组,每组18头。在妊娠107天时,在试验组母猪饮用水中添加0.05%液体酸化剂-“富酸宝”调节饮用水的pH值为3.6,而对照组饮用普通水,试验持续32d。结果表明:当“富酸宝”与水的比例由1:100~1:10000时,水的pH值为2.5~4.0;对照组与试验组水塔中水的微生物含量分别为51个和49个相对光单位(约相当于800cfu/mL),水塔水质达到畜禽饮用水水质要求,而对照组哺乳母猪栏舍内水中微生物含量达到1000个相对光单位(相当于30000cfu/mL),污染相当严重;与对照组相比,试验组中哺乳母猪栏舍内水中微生物含量仅为3个相对光单位(约相当于20cfu/mL),水中99.7%微生物被杀灭。与对照组相比,试验组仔猪25日龄断奶均重、断奶活仔数、仔猪平均日增重与仔猪成活率分别提高了11.96%、7.49%、15.49%、4.41%;此外,与对照组相比,试验组仔猪腹泻率为0,腹泻率下降了100%。与对照组相比,试验组哺乳母猪平均采食量、断奶时母猪背膘厚与母猪断奶7d再发情率分别提高了32.43%、7.34%、10.08%;与对照组相比,试验组母猪背膘损失下降、背膘损失率分别下降了27.52%与26.45%。可见,“富酸宝”可以有效降低饮水pH值,降低饮水中微生物总数,刺激母猪采食,缩短母猪发情间隔,提高仔猪断奶重,并降低仔猪腹泻率。 相似文献
16.
为探究大麦对条纹病菌侵染的生理响应机制,以高感品种Alexis为试验材料,测定接种大麦条纹病病菌后0、3、6、9和12 d不同时间点的大麦叶片内防御酶及叶绿素相对含量的变化。结果表明:随着侵染时间的延长,超氧化物歧化酶活性、脯氨酸含量和过氧化氢酶的活性先上升后下降,与对照相比,平均增幅分别为27.58%、70.55%、32.71%;过氧化物酶在接种后第6天略有下降,但整体呈上升趋势,平均增幅为39.38%;丙二醛和叶绿素相对含量呈下降趋势,且均低于对照,平均降幅为11.21%、46.39%,病害越重,叶绿素下降的幅度越大,最大降幅为84.34%。综上所述,高感品种Alexis在不同时间段应答大麦条纹病病菌胁迫的生理生化反应不同。 相似文献
17.
以活菌数为检测指标,通过单因子和正交试验对淡紫拟青霉 E16液体发酵工艺进行优化。结果表明,淡紫拟青霉E16发酵最佳液体培养基配方为:白砂糖1.5%(质量分数,下同),大豆粉1%,磷酸二氢钾0.1%,硫酸锌0.01%;最佳发酵条件为:起始 pH 值6,500 mL 三角瓶装液量30%,接菌量5%,培养温度30℃,摇床转速150 r/min,培养时间4 d。在最佳发酵培养基和发酵条件下,淡紫拟青霉E16产生的活菌数为9.80×109 cfu/mL,较优化前提高近1个数量级。 相似文献
18.
作者利用会宁县新窑水库除险加固工程设计中因拟定水库采用不同的运行方式:方案一“空库迎洪”方式,方案二“蓄清排洪”方式,经兴利调节计算、调洪演算确定采用相应的除险加固措施,通过经济比较、分析工程施工及运行安全,推荐采用方案一“空库迎洪”方式。 相似文献
19.
20.
啤酒大麦品种甘啤4号成熟胚再生体系的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
建立啤酒大麦品种甘啤4号成熟胚再生体系可为其遗传转化奠定基础。本研究以甘啤4号成熟胚为材料,研究不同诱导培养基对其愈伤组织诱导及分化的影响,并通过添加不同浓度梯度的Ag NO3(0,2.5 mg/L,5.0 mg/L,7.5 mg/L,10.0 mg/L,15.0 mg/L)和ABA(0,0.1 mg/L,0.3 mg/L,0.5 mg/L,0.7 mg/L,1.0 mg/L),观察其愈伤组织形态变化,统计出愈率、绿点率,探索适宜甘啤4号成熟胚组织培养的条件。同时在0、7 d、14 d、21 d和二叶期分别测定成熟胚再生过程中SOD、POD、CAT活性、MAD、可溶性蛋白及内源激素(IAA,ABA,GA3)的含量,为优化成熟胚再生体系准备条件。研究结果表明:培养基NMB较适宜甘啤4号成熟胚再生培养,发现添加适量Ag NO3和ABA有助于愈伤组织的诱导及分化,但Ag NO3处理的效果较ABA明显,其诱导甘啤4号愈伤组织的最适浓度分别为7.5 mg/L和0.5 mg/L;观察到不同时期酶活性大致均呈现先上升后下降的趋势,内源激素含量也随着培养时期的不同有所差异。研究结果可为添加外源激素、进一步优化培养条件奠定了基础。 相似文献