海南胡椒中黄瓜花叶病毒分离物的分子鉴定   总被引：2，自引：0，他引：2  

牛立霞  王健华  冯团诚  刘志昕 《热带作物学报》2008,29(4):510-513

通过间接酶联免疫法,从海南罹病胡椒植株中检测到黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV).从病叶中提取总RNA,用巢式RT-PCR方法扩增获得657 bp的CMV CP基因片段,并与pMDl8-T载体连接和转入大肠杆菌克隆,然后进行测序.序列分析结果表明,该分离物与CMV亚组I、亚组II之间的核苷酸序列同源性分别为92.54%～99.09%和76.97%～77.42%,推导氨基酸序列同源性分别为98.17%～100%和81.74%～82.65%.该分离物CP基因与印度胡椒分离物同源性相对较低,应属不同株系.  相似文献   

三亚、东方、乐东三市县香蕉种植情况调查分析     

王健华  唐跃东 《华南热带农业大学学报》2000,6(1):29-30,28

对三亚、东方、乐东三市县香蕉生产和销售情况进行了实地考察,分析该区域香蕉分布概况和存在问题,提出在该区域大规模发展香蕉种植业的四大优势及有关建议.  相似文献   

植物病毒检测技术研究进展   总被引：7，自引：0，他引：7  

王健华  王运勤  吉训聪  刘志昕  郑服丛 《热带农业科学》2005,25(3):71-75

综述了植物病毒鉴定与检测技术的研究进展,介绍了生物学、电子显微镜观察、免疫学、分子生物学技术（PCR、NASH、FISH、ds-RNA、芯片检测等）方面的植物病毒检测方法的特点、发展应用方向等。  相似文献   

海南省黄灯笼辣椒病毒病的初步调查   总被引：3，自引：0，他引：3  

王运勤  王健华  吉训聪  肖敏  陈绵才 《热带农业科学》2005,25(4):1-3,33

2003～2004年,对海南文昌、万宁、陵水、乐东以及儋州等地的黄灯笼辣椒病毒病进行初步调查,结果表明,海南黄灯笼辣椒病毒病的症状可归纳为4种类型,即斑驳花叶型、顶死型、黄化型和矮缩型,其中以斑驳花叶型发生最为普遍;不同种植区域的黄灯笼辣椒病毒病的病情差异明显,其中文昌的黄灯笼辣椒病毒病发病最严重;遮荫和覆盖地膜能显著减轻辣椒病毒病危害.  相似文献   

海南黄灯笼辣椒顶死病病原病毒的分离鉴定   总被引：3，自引：0，他引：3  

王健华  刘志昕  王运勤  吉训聪  肖敏  郑服丛 《热带作物学报》2005,26(3):96-102

从海南省黄灯笼辣椒顶死病株上分离纯化得到一个病毒分离物.研究结果表明,该病毒分离物能通过汁液磨擦接种侵染供试植物中的4科11种植物,可由桃蚜传播;提纯病毒粒子呈球形,直径28～30 nm,外壳蛋白分子量约为28 ku;分离物与CMV抗血清在ELISA测定中呈阳性反应;提取病毒分离物RNA,应用RT-PCR方法克隆了病毒外壳蛋白（CP）基因.CP基因675 bp,编码218个氨基酸.对CP基因序列分析表明,该病毒分离物的CP基因核苷酸序列与黄瓜花叶病毒亚组Ⅰ分离物的同源性均在92.1%以上,所推导的氨基酸序列同源性在96.3%以上,而与亚组Ⅱ分离物的核苷酸序列同源性均低于77.3%,所推导的氨基酸序列同源性均低于80.7%.据此将该病毒分离物鉴定为黄瓜花叶病毒,归属于亚组Ⅰ.  相似文献   

168水产养殖新模式介绍     

刘猛  王健华 《科学养鱼》2019,(11)

<正>按照创新、协调、绿色、开放、共享的新发展理念,推行绿色渔业生产技术,促进主要水产养殖废弃物全量利用,做到水产养殖业绿色环保型生产,提供健康水产品。2018年郑州市水产技术推广站设计建造了1000米2漏斗型生态循环养殖系统,5月20日投放草鱼种1007.5千克,至11月26日,出鱼18175千克,投喂饲料18500千克,饲料系数1.08,整个生产季节无鱼病发生,效果显  相似文献   

柑橘黄龙病菌亚洲种菌毛装配蛋白基因(PAP)序列分析、原核表达及抗血清制备     

李宾宾  余乃通  杨毅  王健华  张秀春  刘志昕 《植物保护》2019,45(5):214-220

菌毛装配蛋白(Flp pilus assembly protein, PAP)是一种分泌蛋白,参与细菌菌毛的组装,表达量高。本研究以感染柑橘黄龙病的海南琼海市绿橙叶片为材料提取总DNA,用其菌毛装配蛋白基因(PAP)的特异引物进行PCR扩增,获得该基因的目的片段,序列分析表明海南琼海柑橘黄龙病菌PAP基因与柑橘黄龙病菌亚洲种(GenBank登录号:CP001677.5)PAP基因序列一致。功能预测表明它含有两个与分泌功能相关的CpaC和Secretin结构域。PCR产物通过EcoRⅤ和XhoⅠ双酶切构建重组载体pET32a-PAP。将pET32a-PAP载体转化BL21(DE3)大肠杆菌,经终浓度为1 mmoL/L IPTG诱导,目的蛋白主要以包涵体形式表达。目的蛋白经Ni~(2+)-NTA层析柱纯化,并作为抗原腹腔免疫小白鼠,获得效价在1∶500～1∶1 000的多克隆抗血清。Western blot分析表明,PAP多克隆抗血清特异性强;以田间样品总蛋白做抗原时,能特异性检测染病样品。本研究为PAP蛋白功能研究和开发柑橘黄龙病菌的蛋白检测产品提供研究基础。  相似文献   

海南黄灯笼辣椒2种病毒病的电镜诊断   总被引：7，自引：2，他引：5  

王健华  吉训聪 《热带农业科学》2003,23(6):11-14

应用电子显微镜观察了黄灯笼辣椒(Capsicum chinense Jacq．)病毒病寄主细胞的超微结构。结果发现：坏死顶枯样品中有球形病毒粒子和短杆形病毒粒子；花叶畸形样品中则观察到略弯曲线状病毒粒子。初步确定，这2种症状的病毒病分别由某种球形病毒和某种线形病毒引起。  相似文献   

香蕉条斑病毒ORFⅠ、ORFⅡ在大肠杆菌中的原核表达和自激活特性的鉴定     

林湛松  王健华  张雨良  江林  杨文君  余乃通  刘志昕 《广西农业生物科学》2010,(6):1072-1077

目前,香蕉条斑病毒所有3个ORF表达产物功能均不明确,通过双杂技术研究病毒未知蛋白与宿主蛋白的互作,可以初步推断未知蛋白的功能。本实验旨在构建香蕉条斑病毒ORFⅠ和ORFⅡ在细菌双杂系统中的诱饵质粒。首先以课题组保存的连接有香蕉条斑病毒河口分离物全基因组的pMD-18T载体DNA为模板,经过PCR扩增,切胶回收,并通过与带有λcI基因的pBT载体共同双酶切及T4连接酶连接后,得到与λcI基因融合表达的重组载体pBT-ORF1和pBT-ORF2。转化大肠杆菌XL1-BlueMRF＇报告菌株,用IPTG（0.1mmol/L）诱导目的基因片段表达。Westernblotting结果表明,ORF1-λcI和ORF1-λcI两种融合蛋白均成功表达,且大小与预期一致。之后,pBT-ORF1及pBT-ORF2分别与空质粒pTRG共转化XL1-BlueMRF＇报告菌株,pBT空质粒和pTRG-Gal11p共转化作为阴性对照。结果显示pBT-ORF1及pBT-ORF2均无自激活现象,可以进行后续的细菌双杂工作。本实验为BSV与宿主的细菌双杂系统的建立及蛋白组学的研究奠定了基础。  相似文献   

黄颡鱼集约化养殖技术   总被引：1，自引：0，他引：1  

张晓影  刘猛  秦涛  王健华 《河南水产》2010,(1):10-11

近几年来,虽然郑州市水产品总产量不断提高,但是由于养殖品种单一,养殖效益也在逐年下降,目前急需引进新品种进行养殖结构调整。随着人民生活水平的不断提高,人们对水产品的需求也在不断提高,不仅要求数量充足,而且品种也要多样化,来丰富市民的“菜篮子”，向市场提供味鲜物美、营养价值高的名、特、优养殖新品种。  相似文献