Nsp9基因在Marc-145细胞上对猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的影响     

赵孟孟  冯松林  王文佳  邢星  冯嘉萍  张桂红 《中国畜牧兽医》2016,43(12):3114-3120

试验旨在验证Nsp9基因是否影响猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）的复制。构建含有Nsp9全长基因的质粒pIRES2-EGFP-Nsp9,并转染到Marc-145细胞中,接毒之后分别通过实时荧光定量PCR和Western blotting方法测定PRRSV N蛋白在mRNA和蛋白水平的表达。结果显示,转染Nsp9基因的Marc-145细胞上PRRSV的N蛋白在mRNA水平上显著高于未转染Nsp9基因的对照组（P<0.05）,是对照组的1.5倍,同时转染Nsp9基因后的Marc-145上PRRSV N蛋白水平也明显高于对照组。随着剂量的增加,N蛋白的表达量在mRNA和蛋白水平都有所增加。由以上结果初步可知,Nsp9基因可以在Marc-145细胞上促进PRRSV的复制,Nsp9基因与其复制密切相关。  相似文献   

Nsp9基因实时荧光定量PCR检测方法的建立及其在感染细胞过程中表达量的变化     

赵孟孟  冯松林  王文佳  邢星  冯嘉萍  张桂红 《中国畜牧兽医》2016,43(10):2534-2540

试验旨在建立猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）Nsp9基因的实时荧光定量PCR检测方法,并探究其在感染细胞过程中表达量的变化。根据PPRSVNsp9基因序列设计引物,建立基于SYBR Green Ⅰ检测模式的实时荧光定量PCR。结果显示,PRRSV Nsp9基因在1×10⁴~1×10⁸拷贝/μL范围内有很好的线性关系,扩增产物的熔解曲线只有1个单特异峰,无引物二聚体。该方法与猪戊肝病毒（HEV）、猪流感病毒（SIV）、伪狂犬病病毒（PRV）基因组均无交叉反应,可重复性好,组内变异系数小,可用于临床PRRSV检测。在病毒感染细胞过程中,Nsp9基因表达量逐步升高,36 h达到最高。本研究为探究病毒复制规律与临床疫苗生产奠定了理论基础。  相似文献   

牛诺如病毒及牛嵴病毒双重PCR检测方法的建立及初步应用     

师志海  徐照学  兰亚莉  王文佳 《中国动物传染病学报》2020,(1):28-32

本研究根据BNoV和BKoV基因组的保守区域设计2对特异性引物,建立了能同时检测牛诺如病毒(Bovine norovirus,BNo V)和牛嵴病毒(Bovine kobuvirus,BKo V)的双重PCR检测方法。该方法能特异性扩增BNo V和BKo V的目的条带,且未扩增出其他犊牛腹泻病毒性病原;BNoV和BKoV的最低检测限分别为5.39×105 copies/μL和2.23×106 copies/μL;对临床采集的127份犊牛腹泻样品检测结果显示,BNoV的阳性率为6.30%(8/127),BKoV的阳性率为4.72%(6/127),两者与单一PCR检测结果相一致,符合率为100%。本研究建立的双重PCR方法具有良好的敏感性、特异性、重复性,可用于BNoV和BKoV的快速检测和流行病学调查。  相似文献   

钙通道阻滞剂中毒的诊治     

王然  王文佳  佘利旋  师志海 《动物保健》2010,(4):64-65

随着兽医诊疗水平的不断提高,钙通道阻滞剂（CCB）逐渐被用于治疗宠物的心脏疾病、心律不齐、高血压,最近也用于急性肾衰竭。CCB过量的发病率尚不清楚,但Holder T（2000）报道在1995-2000年期间CCB过量病例超过390例,这可能低于实际病例数。CCB过量可通过影响心率、血管紧张度和肺功能而威胁生命。因此,兽医应该熟悉该情况的临床征象、诊断异常和治疗选择等,本文就这些方面作一介绍。  相似文献   

牛疱疹病毒糖蛋白D的结构特点及其在疫苗研发中的应用     

马小静  李梦莹  张凯  王文佳  程成  李继东  许立华 《动物医学进展》2019,(7):111-115

来自牛疱疹病毒1和5型(BoHV-1和BoHV-5)的病毒囊膜糖蛋白D(gD)是病毒的主要组成成分,并且在疱疹病毒的致病机理中起到关键作用。gD对于病毒侵入细胞是必不可少的,是病毒感染细胞期间中和抗体的主要靶标。鉴于其在诱导保护性免疫方面的作用,已使用该糖蛋白作为主要抗原开发出亚单位疫苗、DNA疫苗和载体疫苗候选物,证明gD具有在宿主中诱导较强病毒中和抗体和细胞介导的免疫应答以及对宿主进行免疫保护的能力。论文着重介绍了BoHV-1、BoHV-5和一些人类疱疹病毒gD的结构和功能特征,阐述了gD与宿主免疫系统的反应及gD在新型疫苗设计中的应用,为全面了解gD结构特点及其在疫苗研发中的作用提供借鉴。  相似文献   

葛根芩连汤对小鼠血清及粪便代谢的影响     

刘茜明  李慧  杨光勇  何光志  田维毅  蔡琨  王平  黄高  王文佳  梁建东 《黑龙江畜牧兽医》2018,(12)

为了探索葛根芩连汤对小鼠血清色氨酸及主要代谢产物和粪便中部分短链脂肪酸的影响,试验通过葛根芩连汤灌胃小鼠,分别在干预7 d和14 d后采集样本,运用高效液相色谱-紫外检测器(HPLC-UVD)法测定小鼠血清中犬尿氨酸(Kyn)、色氨酸(Trp)与5-羟色胺(5-HT)浓度,气相色谱(GC)法测定小鼠粪便中乙酸、丙酸和丁酸含量。结果表明:与空白组相比,用药组小鼠血清Kyn和5-HT浓度明显升高(P0.05),Trp无明显变化(P0.05);给药7 d后粪便中丙酸浓度上升(P0.05),用药14 d后乙酸、丙酸和丁酸浓度极显著升高(P0.01)。说明葛根芩连汤对小鼠血清Trp及主要代谢产物和粪便中部分短链脂肪酸存在一定的影响。  相似文献   

衣原体毒力因子研究进展     

张凯  李凡飞  何小丽  王文佳  程成  张超  许立华 《动物医学进展》2018,(5)

衣原体(Chlamydia)是一类专性细胞内寄生、具有独特的双相型发育周期的原核微生物,对人和多种畜禽有致病性。研究表明,衣原体的致病性是其毒力因子与宿主细胞的相互作用导致。论文通过对国内外许多学者关于衣原体致病机制和毒力因子的研究进行总结梳理,阐述主要外膜蛋白(MOMP)、多形态膜蛋白(Pmps)、Ⅲ型分泌系统(T3SS)、脂多糖(LPS)、热休克蛋白(HSP)、质粒和蛋白酶样活性因子(CPAF)在衣原体的致病性方面发挥的主要作用。  相似文献   

入世后商务英语人才培养模式改革   总被引：1，自引：0，他引：1  

葛萍  王文佳 《河南农业》2007,(6):8

中国加入WTO,给商务英语人才带来了机遇和挑战。为培养符合社会需求、能够从容面对中国入世挑战的商务英语人才,本文提出了树立培养复合型、创新型人才的观念及教学内容与手段的改革并进、应用能力与综合素质的培养并重的商务英语人才培养模式的改革方案  相似文献   

鼓粒期干旱对春大豆品质和产量的影响   总被引：1，自引：1，他引：0  

江英泽  董宇辰  王文佳  马泽众  刘丽君  董守坤 《中国农学通报》2019,35(22):14-18

为了给大豆生育后期合理灌溉提供一定的参考依据。试验在2016—2017年采用8个春大豆品种为材料，于收获后用Foss1241测定蛋白质和脂肪含量，并进行产量计算，以此探讨鼓粒期干旱对春大豆品质和产量的影响。结果表明，在鼓粒期干旱条件下，‘黑农37’蛋白质含量下降最为明显，而‘合丰46’变化最小；‘黑农61’脂肪含量升高最为明显，‘绥农29’脂肪含量升高幅度最小；‘黑农65’百粒重下降最为明显，‘黑农45’百粒重下降幅度最小；‘黑农65’产量降低幅度最大，而‘黑农44’、‘黑农37’和‘黑农45’产量降低幅度均较小。本试验表明，鼓粒期干旱会使大豆蛋白质含量下降，脂肪含量升高，百粒重下降，产量明显降低。  相似文献   

成年贵州小型猪脾脏的组织形态学观察及免疫组化研究     

王平  田维毅  王文佳  巫霞  刘霞 《黑龙江畜牧兽医》2012,(15):8-10,174,175

为了给人类免疫相关疾病模型的建立提供参考,试验分别取24头贵州小型猪脾脏组织进行组织形态观察,用免疫组化SP法检测CD3、CD4、CD8及CD20阳性细胞的比例和分布。结果表明:12头雌性小型猪脾脏指数为18.91±1.59,12头雄性小型猪脾脏指数为17.26±2.44,无显著差异(P>0.05)。CD3+、CD4+、CD8+细胞主要分布在动脉周围淋巴鞘,CD20+细胞主要分布在脾小体,12头雌性小型猪CD3+、CD4+、CD8+、CD20+细胞比例(46.67±6.56,24.25±5.04,25.33±4.52,52.83±6.60)与雄性小型猪(43.17±7.58,23.33±3.58,23.58±5.91,54.42±9.27)比较无显著差异(P>0.05),CD4+/CD8+比值在0.7～1.5之间波动;雌性小型猪和雄性小型猪脾脏中CD20+细胞比例均较CD3+细胞多,差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。  相似文献