单核细胞增生李斯特菌核糖核酸酶RNaseⅢ RncS的表达及其生物学活性研究     

王立霞  孟庆玲  蔡扩军  王登峰  伍晔晖  王熙凤  郭晶  乔军  才学鹏 《中国预防兽医学报》2018,(7)

为了解单增李斯特菌(LM)核糖核酸酶RNaseⅢRncS的生物学活性,本研究通过PCR方法对该菌LM-SB5野毒株中编码RNaseⅢ的rncS基因进行扩增、克隆及测序并对其进行生物信息学分析;将rncS基因克隆至表达载体p ET-32a(+),转化至大肠杆菌中进行诱导表达。通过体外酶活实验研究目的蛋白对RNA的降解活性。序列分析结果显示,rncS基因全长690 bp,编码229个氨基酸;生物信息学分析结果显示,该基因编码的蛋白含有由9个保守氨基酸(ERLEFLGDA)组成的基序,2个N-酰基化位点、3个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、2个蛋白激酶C磷酸化位点,提示该酶蛋白活性受磷酸化的调控。同源性分析显示,LM-SB5 rncS基因编码的蛋白氨基酸序列与LM标准株CAC99883.1的同源性为99.13%。SDS-PAGE检测结果显示,表达的RncS蛋白相对分子量约为42.5 ku,与理论值相符;western blot分析表明重组RncS蛋白具有较强的反应原性。体外酶活实验表明,RncS是一种依赖于二价金属离子的核酸酶,且二价金属离子浓度不同其RNaseⅢ的切割活性则不同。本研究为进一步研究RncS在LM中调控ncRNAs的分子机制奠定前期基础。  相似文献   

沈阳地区韭菜蛾生物学特性的研究     

王立霞  张永军  蒋玉文 《植物保护》1999,25(2):4-7

１９９５～１９９７年,通过对韭菜蛾室内外观察研究,发现韭菜蛾在沈阳一年发生４～５代,世代重叠严重。无滞育虫态,以成虫和蛹越冬,翌年４月中旬越冬成虫开始活动,第１代成虫发生在６月中旬。以幼虫在田间危害,幼虫发育最适温度为１９～２３℃,种群消长周年出现两个高峰。防治该虫应以初夏、秋季防治为主,重点防治秋季第４、５代;每代防治关键时期为幼虫孵化盛期,在幼虫未蛀入茎内危害之前,选用菊酯类杀虫剂喷雾防治。  相似文献