中国野生葡萄醛脱氢酶基因在拟南芥中的过量表达     

雷龑  王跃进  徐伟荣  张方方  余皓  王西平 《果树学报》2009,26(1)

将质粒pWR306中包含ED35s启动子、Omega元件及TNOS终止子的一段核苷酸序列定向克隆到质粒pCAMBIA1300,构建了植物中间表达载体pWR-II;将重组质粒pGEM-T-ALDH的醛脱氢酶(ALDH)基因片段定向克隆到pWR-II,构建了葡萄ALDH基因的植物过量表达载体pWR-II-ALDH。采用改进冻融法将其导入农杆菌EHA105,采用花序浸蘸法转化拟南芥,获得了潮霉素抗性的转化拟南芥植株。PCR检测证明外源基因已整合进拟南芥基因组,Real-timePCR结果表明ALDH基因在转化植株的表达量远高于野生种。转化植株和野生植株在形态上有一定的差异,说明葡萄ALDH基因在拟南芥中表达对其生长发育有一定影响。  相似文献   

PP_(333)对温室葡萄枝条次生木质部细胞解剖结构的影响     

秦国新  张国强  翟秋喜  张燕  王跃进 《果树学报》2004,21(5):480-481

为了研究设施栽培条件下葡萄木质部细胞的特征性结构及其受PP_(333)的影响,试验通过对温室葡萄喷施PP_(333)后的枝条次生木质部细胞的解离、观察,经统计分析,结果表明:(1)不同浓度PP333处理对各类型细胞的X形态结构没有明显影响;(2)浓度不同对各类细胞的长度和直径抑制作用不同,喷施1500mg/L浓度的PP_(333)对其营养生长的抑制效果最好。通过该试验的研究,为更好地探索设施栽培条件下果树的生理生态特征和化学调控技术提供了依据。  相似文献   

中国野生毛葡萄芪合酶基因表达及对葡萄抗白粉病的影响     

丁茜  赵凯茜  王跃进 《中国农业科学》2021,54(2):310-323

【目的】克隆中国野生毛葡萄（Vitis quinquangularis）‘丹凤-2’芪合酶（stilbene synthase）基因（STS）并研究其功能,为提高欧洲葡萄（V. vinifera）的白粉病抗性及品质提供依据。【方法】利用同源克隆法获得中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合酶基因VqSTS9和VqSTS21,构建植物过表达载体;用无核白单芽茎段诱导出分生愈伤组织,作为农杆菌介导法遗传转化的受体材料,获得抗性植株,经过不同水平检测,确定转基因植株;对野生型和转基因植株叶片人工接种葡萄白粉病菌（Uncinula necator）,通过显微技术观察叶片受白粉病菌侵染后的情况,比较两者对白粉病的抗性;利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）分析野生型和转基因植株在自然条件和接种白粉病菌后STS及其相关基因的表达,用高效液相色谱法（HPLC）检测转基因植株中芪类物质的种类与含量。【结果】同源序列克隆得到VqSTS9（JQ868689）与VqSTS21（JQ868677）的cDNA序列,长度为1 179 bp。经PCR和Western blot检测,鉴定出过表达VqSTS9无核白植株4株和过表达VqSTS21无核白植株3株。显微观察发现,与野生型植株相比,转VqSTS9 和VqSTS21植株叶片上的菌丝生长较慢,表现出对白粉病的抗性。qRT-PCR结果表明,自然生长条件下,与野生型植株相比,转VqSTS9和VqSTS21植株STS的表达量提高,STS上游苯丙氨酸裂解酶基因（PAL）、下游白藜芦醇糖基转移酶基因（RSGT）、转录因子基因（MYB14、MYB15）的表达量均不同程度上升,而查尔酮合成酶基因（CHS）表达量降低;人工接种白粉病菌后,与野生型植株相比,转基因植株STS表达量显著上调。高效液相色谱分析表明,自然条件下,芪类物质主要以反式云杉新苷形式存在,转基因植株芪类物质的含量高于野生型植株;在接种白粉病菌诱导表达后,除了反式云杉新苷,还产生了反式白藜芦醇和葡萄素,即转基因植株体内芪类物质的种类和含量均有所增加。【结论】将VqSTS9、VqSTS21转入无核白后,转基因植株STS的表达量增高,芪类物质的含量与种类增加,并抑制白粉病菌的生长。因此,中国野生毛葡萄‘丹凤-2’携带的VqSTS9和VqSTS21能够增强欧洲葡萄对白粉病的抗性,‘丹凤-2’可用作葡萄抗病性育种的种质资源。  相似文献   

早酥梨病程相关基因非表达子1基因（NPR1）克隆及原核表达     

张范  张朝红  徐炎  王跃进 《农业生物技术学报》2010,18(1):18-23

本研究以成年早酥梨(Pyrus bretschneideri cv.Zaosu)叶片为材料,通过RT-PCR克隆早酥梨病程相关基因非表达子1基因(NPR1)并获得其全长序列1771 bp,开放阅读框为1761 bp,编码586个氨基酸(GenBank登录号:FJ769372).利用NCBI/Blastp和ClustalX软件进行相似性分析表明,目的基因编码蛋白质序列与日本梨(p.pyrifolia)、秋子梨(P.ussuriensis)、苹果(Malus xdomestica)、烟草(Nicotiana tabacum)和拟南芥(Arabidopsis thaliana)的NPR1蛋白相似性分别为99%、98%、98%、67%和59%.将其连接pGEX-4T-1原核表达载体并转化大肠杆菌(EScherichia coli)BL21,经IPTG诱导表达获得大小约为91 kD的目的融合蛋白,融合蛋白主要以包涵体形式表达,表达量约占总蛋白17%.  相似文献   

日本设施果树的树形结构与光能利用研究进展   总被引：4，自引：0，他引：4  

王跃进  杨晓盆 《山西农业大学学报(自然科学版)》2001,21(2):200-202

通过留学期间对日本设施果树树形结构与光能利用特性的调查分析与研究 ,结果表明 :日本设施果树的树形结构研究始终是围绕高光效、高质量、易管理这三个中心 ,生产上重点在推广单层薄叶幕结构的平棚树形 ,X形、H形、Y形和三主肋骨形及其改良形等高效优产树形已在不同果树上广泛应用。其中Y形非常适合乔木果树的集约化矮密植栽培 ,符合优质、高产、高效农业的发展方向 ,有广泛普及价值 ,未来可能成为除葡萄外多种果树的的通用树形。此类树形结构的突出特点是 :枝叶单层水平分布 ,叶幕薄 ,离地高 ,生态环境优越 ,通风透光好 ,病虫害少。结果均匀整齐 ,下垂果多。果实形正、色佳、味甜、质量好 ,商品档次高。树冠覆盖率和有效生产区高达10 0 %。枝叶生长缓和 ,树势容易控制 ,枝梢夏季管理省工。各器官生长发育状态与节奏好 ,长停交替按次有序 ,营养分配协调合理。而且作业空间大 ,机械行走方便。建议我国因地制宜研究选用  相似文献   

基于表达序列标签（EST）的基因克隆和基因表达分析研究进展   总被引：7，自引：0，他引：7  

杨克强  王跃进  张今今 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2002,30(4):141-145

表达序列标签 (expressed sequence tag,EST)是在生物体特定时空表达基因的一段 c DNA序列。随着生物信息学的发展 ,EST已成为基因定位、基因克隆、基因表达分析的有力工具。文章对应用 EST克隆基因和分析基因表达的研究进展进行了综述 ,并讨论了利用 EST进行基因克隆和表达分析时应注意的问题和发展趋势  相似文献   

防渗节水 势在必行     

荣昌旭  王跃进 《农业工程技术:农产品加工》1987,(3)

一富水区变成贫水区山西太谷侯城乡早在六十年代初期就基本上实现了水利化,农业发展较快,1963年比全县提前一年超“纲要”,1979年以前粮食亩产一直居全县榜首。可是到1986年,这个乡已由富水区变成了贫水区,抵御天旱的能力明显减退。粮食产量出现了低而不稳的现象。二用水不当影响农业后劲总结这个乡水利条件劣化的原因有:1.盲目打深井,水资源遭到破坏,上层水枯竭,中层水减少。2.开采过量,水位下降。3.水利设施老化失修,提水效率下降,水、电费增加。4.渠道渗漏,浪费严重。  相似文献   

夏播玉米的田间管理   总被引：1，自引：0，他引：1  

王跃进 《山西农业:致富科技版》2007,(8):20-20

今年小麦生产经历了特殊的气象条件，冬前旺长，开春冻害，中后期又经历了严重的旱灾和风灾，造成小麦减产。希望广大农民朋友一定要重视以秋补夏，搞好夏播玉米的田间管理。  相似文献   

用RAPD分析鉴定葡萄属远缘杂种   总被引：27，自引：1，他引：27  

王跃进 Lamik.  O 《西北农业大学学报》1997,25(3):16-20

用随机扩增多态型ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术，在幼苗期鉴定了圆叶葡萄和真葡萄亚属杂交的杂种。结果表明，以两个杂交组合后代及其亲本ＤＮＡ作模板，用随机引物ＵＢＣ２５０－ＵＢＣ－２６６和ＵＢＣ－２７２可以分别扩增出１４００，１４００，３５０６ ５００ｂｐ的多态性片段，作为来自无核亲本的分子标记。  相似文献   

中国野生葡萄果实抗炭疽病基因的RAPD标记   总被引：9，自引：1，他引：9  

王跃进  徐炎  张剑侠  周鹏 《中国农业科学》2002,35(5):536-540

以葡萄种间杂交组合88-110[毛葡萄83-4-96(♀)×欧洲葡萄粉红玫瑰]的F1群体为试材,运用RAPD技术,采用集群分离分析(bulked segregant analysis,BSA)法进行中国野生葡萄抗炭疽病基因连锁的分子标记研究.获得了与抗炭疽病基因相连锁的RAPD标记OPC15-1300,并在50株杂种后代、中国野生葡萄8种32个株系、14个欧洲葡萄品种中证明了该标记是可以遗传的.  相似文献