同源重组快速构建百合LCHS2基因RNAi表达载体及其鉴定   总被引：1，自引：1，他引：0  

化占勇  刘雅莉  徐伟荣  王跃进  张雄飞 《中国农学通报》2010,26(2):38-44

为探讨CHS基因的下调表达对花朵着色的影响以及为百合观赏性状遗传改良提供技术支持,利用基于同源重组原理的Gateway技术,根据课题组从东方百合‘索邦’分离的LCHS2基因序列(Genbank登录号:GQ483376)和pENTR/D-TOPO载体要求,设计上游5'端添加'CACC'的一对特异引物,PCR扩增获得636 bp的干扰片段。通过TOPO克隆,将该片段克隆入载体pENTR/D-TOPO构建入门克隆载体pENTR/D-CHS,测序结果显示,与原序列同源性为100%。再经过LR反应使pENTR/D-CHS上的干扰片段替换掉目标载体pHellsgate12上的ccdB片段,快速构建了包含LCHS2基因干扰片段的RNAi表达载体pH12-CHSi,经限制性内切酶XhoI、XbaI酶切鉴定获得724 bp和722 bp的片段,与预期结果一致。pH12-CHSi电击法转化农杆菌GV3101,菌液PCR鉴定,出现636 bp的目的条带,表明RNAi表达载体pH12-CHSi已成功转入农杆菌。  相似文献   

美国优质抗病制汁葡萄品种引种及加工性能研究试验初报   总被引：2，自引：0，他引：2  

陆平波  高奇超  王跃进  刘楠  吴行昶 《中国农学通报》2010,26(11):245-249

摘要：为丰富我国的葡萄制汁品种,本研究以在陕西杨凌种植的从美国引进的五种优质抗病制汁葡萄品种为研究对象,采用田间调查、果实品质测定,抗病性鉴定,加工性能分析等方法对康可(Concord)、康拜尔(Campbell）、玫瑰露(Delaware）、卡托巴(Catawba)、黄金玫瑰(Golden Muscat)等五个引进制汁葡萄品种的引种表现及加工性能进行了一年的研究。结果表明：引进的制汁葡萄品种都表现出很强的抗病性, 康可,康拜尔和黄金玫瑰的果实及果汁品质优良,具有较好的加工性能,其中黄金玫瑰的产量较高,初次结果平均单株产量为4.5kg;康拜尔的粗出汁率较高,达70%;康可的Vc含量、糖酸比、总酚含量均较高。  相似文献   

白粉菌对葡萄叶片生理特性的影响     

王伟  张军科  王跃进  杜敬  张玉洁  李爽 《北方园艺》2010,(9):14-17

以欧洲葡萄F1代株系15-1-9为试验材料,在叶片上接种葡萄白粉菌后,分别在0、5、10、15、20、25、30 d取样,测定叶片的过氧化物酶(POD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、多酚氧化酶(PPO)活性、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性、可溶性蛋白质含量、丙二醛和木质素含量等生理特性的动态变化,为葡萄白粉病的防治和葡萄抗白粉病育种提供基础参考资料。结果表明:葡萄叶片感染白粉菌后,POD、CAT、PAL的酶活性均高于未接种的健康叶片(CK),呈上升趋势,而PPO活性则呈下降趋势,并且在后期略有回升。接种后叶片的可溶性蛋白质含量降低,丙二醛、木质素的含量有不同程度上升。由此可见,葡萄白粉菌的侵染对叶片内的生理特性的动态变化有较大影响。  相似文献   

不同叶面肥对无核白葡萄产量和品质的影响   总被引：6，自引：1，他引：5  

车俊峰  苏婷  张乐  郭春会  孙锋  王跃进 《北方园艺》2010,(12):1-5

在无核白葡萄开花前、幼果膨大期、浆果始熟期分别用不同营养液进行叶面喷施,探讨其对无核白葡萄产量与品质的影响,为提高无核白葡萄的商品性,以获得较高的经济效益。结果表明:喷施腐殖酸液肥和平衡营养肥不仅能够提高无核白葡萄的产量(比对照增产18.93%~20.20%),而且能够提高无核白葡萄叶片的叶绿素含量及净光合速率,提高果实硬度、可溶性固形物含量、糖酸比、还原性VC,降低可滴定酸含量,使果实品质得到明显改善。其中喷施平衡营养肥的效果最优。  相似文献   

温宿红葡萄生物学特性及果实性状多样性研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

张宗勤  王跃进  张剑侠  王晶晶  田贝贝  于建娜  高疆生 《中国农学通报》2010,26(5):146-151

摘要：【研究目的】温宿红是新疆温宿县地方优异葡萄品种,当地长期栽培中形成了丰富的葡萄种质资源多样性,本文通过对温宿红葡萄果实与形态性状多样性的研究,以期为筛选出适合当地条件的温宿红葡萄系列新品种（系）提供材料基础。【方法】通过田间观察,以果实特性为主要指标,植株形态特征为辅,研究温宿红葡萄品种多样性。【结果】温宿红葡萄植株生长势强,晚熟、丰产,果穗松紧适中、穗梗粗壮,果粒圆、大小一致,果肉硬脆,味甜,果皮红色鲜丽,符合人们的消费习惯, 有一定的耐贮运性,是较为理想的鲜食品种。温宿红自然群体中存在诸多变异类型,初步筛选出的7个形态与果实性状多样性植株在果穗、果粒形态,果实耐压力、耐拉力、可溶性固形物含量和种子数等方面均存在显著性差异。【结论】温宿红葡萄自然群体中存在变异类型,对该品种的深入研究及初选的多样性植株具有一定育种及利用价值。  相似文献   

葡萄活性赤霉素合成关键基因VvGA3ox家族的克隆和表达分析     

刘炳臣  王茜  王跃进  张朝红 《园艺学报》2016,43(12):2293-2303

在植物赤霉素合成代谢中,GA3ox可将几种非活性赤霉素转化为具生理活性的赤霉素。以葡萄有核品种‘黑比诺’和无核品种‘无核白’为材料,克隆葡萄的VvGA3ox基因家族成员,分析基因结构、进行染色体定位和系统发育树构建,检测其组织器官表达特性和在胚珠（幼种子）发育过程的表达变化。结果表明,葡萄基因组VvGA3ox家族有3个成员,cDNA长度分别为1 313、1 225和1 480 bp,都包含2个外显子和1个内含子结构。组织器官特异性表达分析表明,VvGA3ox1在胚珠中的表达很低,在根中高表达;VvGA3ox2和VvGA3ox3在花和胚珠中的表达较高。在受精后胚珠（幼种子）发育过程中,VvGA3ox家族基因的表达趋势存在差异,其中VvGA3ox1在‘黑比诺’与‘无核白’中均是在盛花后30 d时上调之后下降;VvGA3ox2在‘黑比诺’中20 ~ 30 d极速上调之后下降,相应地‘无核白’中是先缓慢下降之后上升;VvGA3ox3在‘黑比诺’中逐渐下降,对应地‘无核白’中是在10 ~ 15 d先上升后在20 ~ 45 d呈下降趋势并逐渐与‘黑比诺’中的表达持平。VvGA3ox在有核和无核葡萄品种中表现较大差异表达,与葡萄无核性状有一定关系。  相似文献   

辐照对落叶松八齿小蠹发育和繁殖的影响     

詹国平  周景清  王新  王跃进  徐亮  李柏树 《核农学报》2011,25(6):1200-1205

在室内采用华北落叶松新鲜木段饲养落叶松八齿小蠹（Ips subelongatus Mots.）,木段中的幼虫、蛹采用60Coγ射线,成虫采用9MeV X射线进行辐照处理。辐照后在华北落叶松木段上发育和繁殖的结果表明,幼虫经20～60Gyγ射线辐照后,能发育为成虫并繁殖F1代幼虫,80～120Gy处理后能发育为成虫,但成...  相似文献   

葡萄无核基因RAPD标记的序列分析   总被引：8，自引：1，他引：8  

王跃进 Lamik.  O 《西北农业大学学报》1997,25(4):1-5

报道了用Ｑｉａｇｅｎ Ｋｉｔ纯化ＲＡＰＤ遗传标记，用细菌质粒ｍ１３克隆ＲＡＰＤ标记的ＤＮＡ片段，采用自动荧光ＤＮＡ测序仪（型号３７３Ａ）测定了该ＤＮＡ片段的核苷酸组成及其排列顺序。无核白ＲＡＰＤ标记由５１９对核苷酸及其特定序列组成。因为无核白是无核基因的原始供体，作者认主所获无核白ＲＡＰＤ标记的ＤＮＡ序列，可以作为合成探针的基础，用于检测无核葡萄育种和无核品种的无核性。  相似文献   

无核葡萄胚挽救试管苗驯化移栽体系优化     

王刚  李桂荣  王跃进 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2015,43(8):153-158

【目的】研究炼苗移栽过程中生根粉溶液浸根时间、营养液处理、开始通风时间及遮阴处理对无核葡萄胚挽救苗炼苗及移栽的影响,探索胚挽救试管苗炼苗移栽技术。【方法】以2011年与2012年无核葡萄胚挽救杂交育种后代试管苗为材料,研究生根粉溶液浸根时间、炼苗过程中是否添加营养液、揭开保湿罩时间以及移栽大田过程中遮阴对胚挽救苗炼苗及移栽的影响。【结果】1.0mg/L生根粉溶液浸泡根系3min时植株各项生理指标较好且成活率最高;移栽过程中添加1/8 MS营养液一定程度上抑制了植株的长势;炼苗初期保湿时间为4d时炼苗成活率最高;移栽至温室或大田中时一定程度的遮阴处理有利于移栽成活率的提高与植株的生长发育。【结论】无核葡萄胚挽救试管苗炼苗前生根粉浸根处理3min、炼苗时添加1/8MS营养液、炼苗后4d开始通风以及移栽时进行遮阴能提高胚挽救试管苗的生物积累量和成活率。  相似文献   

葡萄β型液泡加工酶基因(VvβVPE)的原核表达、纯化与多克隆抗体制备     

巩培杰  张朝红  魏蓉  李树秀  王跃进 《农业生物技术学报》2013,21(6)

液泡加工酶(VPE)基因是植物内启动和执行细胞程序性死亡的关键基因,β型VPE是种子特异表达并且为种子蛋白成熟所必须的基因.本研究以黑比诺葡萄(Vitis vinifera cv.Pinot Noir)花后8个不同时期胚珠的cDNA混合样为模板,通过RT-PCR扩增得到葡萄β型液泡加工酶基因(暂命名VvβVPE,GenBank登录号:KC136352),开放阅读框1 485 bp.进一步将VvβVPE克隆到pGEX-6P-1原核表达载体并转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中,经IPTG诱导,获得约81.3 kD的包涵体融合蛋白GST-VvβVPE.将诱导条件优化后,在37℃、0.05 mmol/L IPTG诱导5h后融合蛋白GST-VvβVPE的表达量最大,采用电透析与盐酸胍处理后透析复性两种方法获得纯化包涵体蛋白,电透析纯化法获得纯化包涵体蛋白的浓度可达到免疫要求.使用纯化蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗血清,经Western blot检测,该抗血清(稀释到1∶10 000)与GST-VvβVPE融合蛋白识别反应良好,获得的抗血清可用于以后的VvβVPE的酶活性分析、免疫亚细胞定位分析以及转基因植株蛋白水平的鉴定等,为进一步明确VvβVPE在葡萄胚珠发育中的作用提供基础数据.  相似文献