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瓜州蜜瓜春大棚栽培技术 总被引:1,自引:1,他引:0
瓜州蜜瓜是指在瓜州县特定的人文、地理、气候等环境条件下种植的厚皮甜瓜总称。瓜州县种植蜜瓜历史比较悠久,所产白兰瓜、黄河蜜等在20世纪60、70年代就走俏市场。瓜州蜜瓜有4个系列30多个品种,质脆汁多,香甜可口,清爽宜人,含糖量达14%~19%,是消暑止渴的佳品,2011年被列为中国农产品地理标志保护产品。近年来,瓜州县积极引进先进种植技术,全力做大“甜蜜产业”,在传统大田种植的基础上,推行蜜瓜大棚高效安全种植技术,拉长蜜瓜的市场供应期,抢占市场份额,实现了效益最大化。 相似文献
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本研究旨在应用实时荧光定量PCR技术,建立半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)线粒体DNA(mtDNA)含量测定方法并进行优化.通过质粒标准品的线性化处理、模板DNA的酶切和超声处理、mtDNA和核DNA(nDNA)基因引物的筛选实验,建立半滑舌鳎mtDNA含量测定方法.结果表明,质粒标准品的构象对荧光定量PCR标准曲线影响较大,线性化的质粒更适合用作标准品;酚-氯仿方法提取的模板DNA适用于mtDNA含量测定,无需进行预处理;用D-loop和ND1这2对引物所得的拷贝数较小且结果一致,适用于mtDNA拷贝数的测定;以不同核基因为参照所得的mtDNA含量可能存在差异,当以单拷贝核基因ENC1和MYH6为参照时,可以计算出单个细胞中mtDNA含量,若以多拷贝基因GAPDH为参照,mtDNA含量测定值则较小.采用本方法分别对半滑舌鳎肝、肾、脾和肌肉组织的mtDNA含量进行重复性检测实验,结果表明,相同组织的mtDNA含量显示出良好的重复性(P>0.05),而不同组织中mtDNA含量具有差异性,可见该方法稳定可靠,能为海洋鱼类mtDNA含量检测提供借鉴. 相似文献
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为实现海洋源金属硫蛋白的高效表达。将酵母表达载体pPICZαA-SUMO-OpMT通过电转化法转入毕赤酵母菌GS115中,利用博来霉素质量浓度梯度筛选,在耐受高质量浓度(4. 0 mg/mL)博来霉素的YPD平板上筛选得到阳性高拷贝GST115/pPICZαA-SUMO-OpMT重组酵母菌株,进一步通过MMH和MDH平板筛选得到2株甲醛利用型(Mut+型)重组酵母菌株。SDS–PAGE电泳和Western blotting显示诱导表达的融合蛋白SUMOOpMT分子量约23 kD,与预期一致,说明可溶性融合蛋白SUMO-OpMT在重组酵母菌中得到了表达。同时,HPLC检测重组毕赤酵母菌发酵液,结果也表明重组毕赤酵母菌成功表达了可溶性目的蛋白OpMT。通过对重组工程菌中MT活性检测发现,其对重金属镉耐受力增强,说明重组工程菌成功表达出有活性的金属硫蛋白。为天然高效重金属生物解毒剂的成功开发和推广提供理论依据。 相似文献
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为构建安全高效表达海洋源金属硫蛋白的益生菌重组菌株,以海洋源褶牡蛎内脏团为模板,PCR克隆得到褶牡蛎金属硫蛋白基因(Op-MT),大小为324 bp,经pMD19-T载体亚克隆到融合表达载体pHT43-SUMO中,然后通过电转化法将重组质粒转入八种蛋白酶缺陷的宿主枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WB800N中。SDS-PAGE电泳显示诱导表达的融合蛋白SUMO-Op-MT分子量约为23 kD,与预期一致,说明可溶性融合蛋白SUMO-Op-MT在宿主菌中得到了表达,且通过Western blotting进一步得到验证。同时,HPLC检测重组枯草芽孢杆菌发酵液,结果也表明重组枯草芽孢杆菌成功表达了可溶性目的蛋白Op-MT。通过对重组工程菌中MT活性检测发现,其对重金属镉耐受力增强,说明重组工程菌成功表达出有活性的金属硫蛋白。这为以后开发天然、高效海洋源重金属解毒剂提供理论基础。 相似文献
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真蛸热休克蛋白90基因(HSP90)的克隆及表达 总被引:1,自引:0,他引:1
为深入了解真蛸热应激响应机制,实验以真蛸的应激蛋白为研究对象,借助同源扩增和cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术获得真蛸热休克蛋白90(HSP90)的cDNA全序列(2 709 bp),它包含119 bp的5’非编码区(untranslated regions,UTR)、454 bp的3’UTR和2 136 bp的开放阅读框(opening reading frame,ORF),ORF共编码711个氨基酸,推算其分子量为81.5 ku,理论等电点为5.09。同源分析显示,所推导的氨基酸序列高度保守,并且含有HSP90家族特有的5个保守信号序列区域。实时荧光定量PCR分析表明,该基因在所有选取的组织中均有表达,肝组织中表达量最高。 相似文献
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