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【目的】克隆猪的Microrchidia家族CW锌指蛋白2(Microrchidia family CW-type zinc finger 2,MORC2)基因,利用生物信息学手段分析其序列特征,并检测MORC2基因在猪不同组织中的表达情况和卵巢中的定位。【方法】以猪卵巢cDNA为模板扩增和克隆MORC2基因完整CDS区,并进行相似性比对及系统发育树构建;利用生物信息学软件对猪MORC2蛋白序列进行预测;使用实时荧光定量PCR检测MORC2基因在猪不同组织中的表达情况;利用免疫组化方法检测猪MORC2蛋白在猪卵巢中的定位情况。【结果】猪MORC2基因CDS区序列全长3 102 bp,编码1 033个氨基酸。猪MORC2蛋白氨基酸序列与人、黑猩猩、恒河猴、小鼠、牛、绵羊、鸡和斑马鱼的相似性分别为94.8%、94.6%、94.9%、91.9%、93.8%、93.9%、80.8%和64.3%。系统进化树表明,猪与灵长类亲缘关系最近,与反刍动物和啮齿类次之,与斑马鱼(鱼类)亲缘关系最远。猪MORC2蛋白分子质量为117.44 ku,理论等电点为8.16,半衰期为30 h,属于不稳定蛋白。MORC2蛋白的平均疏水性为―0.736,为亲水性蛋白,不含跨膜结构和信号肽。猪MORC2蛋白有174个磷酸化位点、81个糖基化位点;亚细胞定位属于核蛋白,细胞质次之,线粒体中有少量表达;含有经典的MORC蛋白家族结构:GHKL-ATPase、zf-CW和CC结构域。组织表达谱结果显示,MORC2基因在猪各组织中广泛表达,其中在肝脏中表达量最多,显著高于其他组织(P<0.05),在心脏、肺脏和肌肉中表达量较少,显著低于其他组织(P<0.05)。免疫组化结果显示,MORC2蛋白在健康猪卵泡颗粒细胞和膜细胞中均有表达且表达量较高,在闭锁的卵泡颗粒细胞和膜细胞中表达量较少。【结论】试验成功获得猪MORC2基因完整CDS区序列,该基因在猪各组织中广泛表达,MORC2蛋白主要在健康猪的卵泡颗粒细胞和膜细胞中表达。研究结果为进一步研究MORC2蛋白调控猪卵巢发育和卵泡闭锁的分子机制提供理论依据。 相似文献
994.
DREB类蛋白属于AP2/ERF转录因子家族的一个亚家族,在植物非生物胁迫抗性调控中具有重要功能。为了挖掘花生逆境胁迫相关功能基因AhDREB3,从已公布的花生基因中找到干旱应答元件结合蛋白3(AhDREB3)的编码基因全序列,做编码蛋白的进化分析。根据已知序列设计引物,通过荧光定量PCR检测了该基因在低温、高盐和干旱胁迫下及对外源ABA响应和表达。荧光定量PCR结果显示,AhDREB3基因在花生的叶片和根中对低温没有响应,对高盐(叶片和根)和干旱(根)胁迫有较大响应,说明它可能参与了花生对高盐和干旱胁迫的适应性调控。此外,AhDREB3基因的表达在花生叶片和根中对外源ABA响应变化小,暗示了该基因在花生中可能通过不依赖于ABA的方式起作用。 相似文献
995.
气缸套处于柴油机的心脏部位,如果气缸套出现破损,发动机在进气行程时会吸入冷却液,而在压缩行程和做功行程时高压气体又会从破损处进入冷却水道.无论出现哪一种情况,都将妨碍可燃混合气的形成和燃烧,甚至使发动机无法正常工作.
1.气缸套破裂的几种诊断方法
如果柴油机的气缸套出现裂纹,会有种种特殊的征象,根据这些征象可以推断气缸套是否破裂及其产生的部位. 相似文献
996.
【目的】开展云南盘鮈人工繁育技术研究,为有效保护和开发利用云南盘鮈资源提供依据。【方法】对野生云南盘鮈采用混养驯化和单养培育方法,对比筛选4种催产剂组合,统计分析批量繁殖效果,并观察产卵行为和仔稚鱼发育情况。【结果】云南盘鮈卵大、数量少,繁殖力低,绝对怀卵量(F)与体质量(W)呈线性关系,拟合关系式为F=15.336W+103.01(R2=0.6267)。亲鱼培育的适宜温度为年水温7~25℃,注射催产剂(LHRH-A2+HCG+DOM)可使亲鱼自然产卵受精,11批次催产云南盘鮈929组,产卵201 866粒,孵化出鱼苗96 049尾,人工繁殖的催产率、受精率和孵化率分别为68.47%、76.86%和53.1%;效应时间8~14 h;最适催产水温15~19℃。【结论】人工驯养条件下,云南盘鮈性腺可自然发育至成熟,人工繁殖增殖是云南盘鮈资源保护的重要措施。 相似文献
997.
<正> 前言保持瘦肉型猪种的优良生产性能,不仅要给它提供足够量的各种营养成份,还必须使各种养分含量保持适宜比例关系。在各种养分的相互关系中,蛋白质与能量的比例(简称蛋能比P/E,单位为克/兆卡)又居首位。因为这个比例是否恰当,将直接影响瘦肉的增长和胴体品质,就是说,它关系着能否充分发挥瘦肉型猪的生长潜力。 1985年以来,杂交瘦肉型商品猪饲料中的能量、蛋白质水平的研究,国内已有过不少报导,但对纯种杜洛克的育肥特点及在我国饲料条件下适宜的蛋能比营养配方的研究 相似文献
998.
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1000.