伪狂犬病病毒在NF-κB家族p65基因敲除细胞系的复制规律研究     

常雯茹  段利芳  杨乐  马英先  王棋  翟云云  周鲁豫  张爽  明胜利  杨国宇  王江  褚贝贝 《中国畜牧兽医》2021,48(1):83-92

试验旨在研究伪狂犬病病毒（PRV）在NF-κB家族p65基因敲除细胞系中的复制规律。利用慢病毒介导的CRISPR/Cas9基因定点修饰技术构建猪肺泡巨噬细胞（3D4/21）p65基因稳定敲除细胞系。通过构建p65-sgRNA重组质粒,转染至HEK293T/17细胞,收取慢病毒,感染3D4/21细胞后利用嘌呤霉素筛选获得多克隆细胞系,T7核酸酶检测敲除效率,再通过有限稀释法获得3D4/21-p65^-/-的稳定细胞系。CCK-8试剂盒检测3D4/21细胞中敲除p65基因后对细胞增殖的影响;流式细胞术检测PRV-GFP感染3D4/21及3D4/21-p65^-/-细胞后病毒增殖的差异;实时定量PCR检测PRV感染3D4/21及3D4/21-p65^-/-细胞后PRV gB、TK基因mRNA表达水平及PRV感染细胞诱导的IL-1β和IL-6基因mRNA水平表达的变化;Western blotting检测PRV-QXX感染3D4/21及3D4/21-p65^-/-细胞后PRV gB、gE蛋白的表达;滴度测定检测PRV-QXX感染3D4/21及3D4/21-p65^-/-细胞后子代病毒滴度。结果表明,sgRNA2和sgRNA3的基因编辑效率较高,对其进行克隆化培养进而获得敲除p65基因的稳定表达细胞系;CCK-8试剂盒检测细胞活力表明,p65基因敲除对细胞活力无影响;流式细胞仪检测表明,同一时间点PRV-GFP在3D4/21-p65^-/-中的增殖显著高于对照细胞;实时荧光定量PCR表明在3D4/21细胞中敲除p65基因促进了PRV gB、TK基因的mRNA表达水平,而抑制了IL-1β、IL-6基因的mRNA表达;Western blotting结果表明,在3D4/21细胞中敲除p65基因促进了PRV gB、gE蛋白的表达;滴度测定结果表明,同一时间点PRV-QXX在3D4/21-p65^-/-细胞中子代病毒的复制显著高于对照细胞。以上结果均表明,p65基因敲除可促进PRV在3D4/21细胞中复制。  相似文献   

干旱胁迫对3种冷季型草坪草光谱反射率及生理特征的影响     

赵志军  单贵莲  段新慧  姜华  任健  陈功  初晓辉 《草原与草坪》2016,(6):23-29

为探讨高光谱分析技术在草坪草水分监测上的应用,以草地早熟禾、高羊茅、多年生黑麦草为试验材料,测定了干旱胁迫下3种冷季型草坪草生理指标及光谱反射率。结果表明:随着干旱胁迫程度的加深,供试草坪草叶片相对含水量和叶绿素含量显著下降(P0.05),丙二醛含量、脯氨酸含量及敏感波段的(550和760 nm)的光谱反射率显著上升(P0.05),3种草坪草抗旱性能的强弱顺序为:高羊茅多年生黑麦草草地早熟禾。3种草坪草敏感波段光谱反射率(R_(550 nm),R_(760 nm))及高光谱参数(Rg,R0,GNDVI)与生理指标间呈显著或极显著相关,以R_(550 nm)与生理指标间的相关系数绝对值最大。同时R_(550 nm)构建了供试草坪草生理指标的估测模型,经检验,模型估测值与实测值相关性达显著或极显著水平。  相似文献   

热水处理对鲜切石榴籽粒贮藏品质、抗氧化能力及微生物变化的影响     

王琼  初丽君  王敏  寇莉萍 《北方园艺》2016,(1):106-110

以石榴为试材,采用热处理法,研究了不同处理条件对保鲜期间鲜切石榴籽粒贮藏品质、抗氧化能力及微生物变化的影响。结果表明:鲜切石榴籽粒经过40℃10min、45℃6min、50℃4min的热处理,其中50℃4min的热处理能够提高石榴籽粒可溶性固形物含量,减轻石榴籽粒贮藏期间的质量损失,提高石榴籽粒的抗氧化活性,抑制霉菌酵母的生长繁殖,使得石榴籽粒保持较好的感官品质,延缓石榴籽粒的衰老进程。  相似文献   

荷电喷雾电晕电极诱导电场数值计算与分析     

陈志刚  杨超珍  孙英琨  储金宇 《排灌机械》2007,25(4):57-60

为深入研究电晕荷电喷雾产生电场的分布情况,针对电晕荷电喷雾中常用的多针组合式电极,采用电荷模拟法,运用matlab软件编程,对电极诱导电场进行数值计算,得出了电场中任意点的电势、场强值及其分布图。通过计算分析发现,电晕放电产生的静电场是极不均匀的;场强由电极结构参数-极径、电极尖端曲率半径、电极电压、针状电极的个数以及电极环中心距地面的垂直高度决定;雾滴从喷嘴到靶标的输运过程中,电晕电极产生的电场仅在输运初始阶段对雾滴的运动起主导作用。  相似文献   

红外光电开关在杨树对靶喷雾机中的应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

焦俊生  储金宇  马国斌 《农机化研究》2005,(3):216-217

环境保护和可持续发展是21世纪农业发展优先考虑的问题,对作物的病虫害进行化学防治是植物保护的主要手段。截止目前,我国已有常用农药品种180种以上,但有关植保的研究大多集中在农药本身,对施药机械的研究开发进行得很少,这是我国农药应用效率不高的一个重要因素。由此而造成的环境污染也越来越严重,对农作物对靶喷药是植保机械的重要研究方向。为此,设计了远距离红外光电开关应用于杨树对靶喷雾中,实验结果达到了设计要求,减少了施药成本,降低了对环境的污染程度。  相似文献   

机械设备更新决策专家系统的设计     

陈步英  褚建立 《拖拉机与农用运输车》2007,34(3):90-91

着重论述了机械设备更新决策专家系统的设计过程,包括知识库的设计、推理机的推理方向和方法、知识获取方法的介绍、综合数据库的规划、人机接口等内容。  相似文献   

农业"三新技术"农机化配套项目的应用     

梁中华  华桥申  徐胜利  王吉善  俞党 《中国农机化》2006,(2):38-39

为进一步提高粮食生产科技含量,稳定粮食生产能力,近几年来浙江省确定在全省667khm2商品粮基地中实施以农业新品种、新技术和新农机为主要内容的“三新技术”配套项目。上虞市于2002年度获得了该项目的建设计划,并按照省定要求,联系本地实际,及时制定了项目实施方案,落实地方配套资金,签订项目承包合同,加强项目的管理,确保了项目的建设质量,产生了良好的社会和经济效益。该项目的实施既促进了农业龙头企业的生产发展,又起到了较好的示范和带动作用,也为提高上虞市部分农产品的经济效益提供了较好的条件,有着广阔的市场发展前景。  相似文献   

机动车排放净化技术研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

陈松玲  路淼  储金宇  叶丽华 《中国农机化》2005,(1):53-55

机动车排放污染严重，本文简要介绍了净化机动车排放的方法．探讨了低温等离子体净化尾气的反应机理，阐述了两种低温等离子体发生器。  相似文献   

关于球墨铸铁曲轴硬度与抗拉强度关系的研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

杨胜斌  邸晓竹  温力  储开荣 《拖拉机与农用运输车》2006,33(6):88-89

通过对球墨铸铁曲轴样本检测数据的统计分析,建立了曲轴硬度和抗拉强度线性相关的数学模型,探讨了以硬度检测值预测抗拉强度结果,从而可节约检测资源。  相似文献   

2BQ系列气吸式精密播种机的改进     

黄丙申  朱向东  初旭宏 《农机化研究》2007,(6):247-248

气吸式播种机作为精量播种技术的主要机型,在我国已有20年的发展历史,但是该项技术目前还存在诸多问题没有得到更好的解决,从而使其推广应用受到了影响.为此,分析了2BQ系列气吸式精密播种机在使用中存在的问题和不足之处,并提出了具体改进措施.  相似文献