绵羊KAP11.1基因克隆、原核表达及皮肤毛囊表达研究     

宫淑娟  史瑞军  吴庭辉  李树伟 《中国畜牧兽医》2022,49(3):876-886

【目的】 对毛囊角蛋白关联蛋白11.1（keratin associated protein 11.1,KAP11.1）基因进行克隆及原核表达,并对KAP11.1基因在不同品种绵羊皮肤毛囊中表达量进行比较,探究KAP11.1基因在南疆地方绵羊品种间表达差异及其对羊毛品质的影响。【方法】 以平原型和田羊、山区型和田羊和卡拉库尔羊体侧皮肤毛囊为研究材料,以GenBank中绵羊KAP11.1基因序列（登录号：HQ595347.1）为参照设计引物,对KAP11.1基因进行PCR扩增,构建pMD19-T-KAP11.1克隆质粒,双酶切鉴定后构建pET-28a （+）-KAP11.1原核重组表达质粒,经PCR和双酶切鉴定后测序并进行序列分析,转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞中表达,采用SDS-PAGE和Western blotting检测;利用实时荧光定量PCR技术检测KAP11.1基因在不同绵羊皮肤毛囊中的表达情况。【结果】 3种绵羊KAP11.1基因CDS区序列为480 bp,编码159个氨基酸,为不稳定的疏水蛋白。相似性比对结果发现,与参照基因相比,2种类型和田羊基因序列相似性均为99.79％,均在423 bp处发生突变,由C变为T,卡拉库尔羊基因序列相似性为99.38％,其69 bp处G变为T、93 bp处C变为T、423 bp处C变为T。系统进化树分析发现,3种绵羊和山羊亲缘关系最近,和瘤牛亲缘关系最远。KAP11.1蛋白二级结构主要由无规则卷曲组成。试验成功构建了pET-28a （+）-KAP11.1原核重组表达质粒,并纯化得到19 ku的KAP11.1蛋白。KAP11.1基因在山区型和田羊和卡拉库尔羊皮肤毛囊中的表达量均显著高于平原型和田羊（P<0.05）,在山区型和田羊和卡拉库尔羊中差异不显著（P>0.05）。【结论】 克隆获得480 bp的绵羊KAP11.1基因CDS区序列,成功构建了pET-28a （+）-KAP11.1原核重组表达质粒,并获得19 ku的KAP11.1蛋白,且KAP11.1基因在3个品种绵羊皮肤毛囊中均有表达。  相似文献   

催乳素对内蒙古绒山羊毛囊体外培养影响的研究     

包跃先  赵飞飞  宫文典  卢泽宇  穆卿  刘俊阳  特日格乐  赵艳红 《中国畜牧兽医》2022,49(6):2072-2078

【目的】 研究催乳素（PRL）对内蒙古绒山羊初级毛囊和次级毛囊体外生长及形态变化的影响。【方法】 机械法结合切割法分离内蒙古绒山羊的初级毛囊和次级毛囊,在初级毛囊培养液中分别添加0、5、10、50、100 ng/mL催乳素进行体外培养,每组24根,共培养5 d,每天在显微镜下观察其形态并拍照,统计其生长长度、生长速度和存活率,筛选出最适催乳素处理浓度。然后将初级毛囊与次级毛囊分别分为初级毛囊对照组（PF-K）、初级毛囊试验组（PF-PRL）、次级毛囊对照组（SF-K）、次级毛囊试验组（SF-PRL）,每组24根,对照组用基础培养液培养,试验组在基础培养液中添加最适浓度的催乳素,培养5 d,每天观察毛囊的形态并拍照,同时测量各组毛囊的生长长度。【结果】 10 ng/mL催乳素组毛囊的平均日生长长度均极显著高于其他浓度组（P<0.01）,最终生长长度和存活率均最高,因此,后续试验选择10 ng/mL催乳素处理毛囊。试验组和对照组初/次级毛囊的毛干与根鞘部位同时伸长,随着培养时间的增加均出现不同程度的弯曲。PF-PRL、SF-PRL组毛囊在2~5 d的总长度分别极显著高于PF-K、SF-K组（P<0.01）。PF-K组除第1天与第0天差异不显著外,1~5 d毛囊的总长度依次显著增加（P<0.05）;PF-PRL组0~5 d毛囊的总长度依次显著增加（P<0.05）。SF-K组毛囊第5天的总长度显著高于0~4 d （P<0.05）;SF-PRL组第4、5天毛囊的总长度均显著高于0~3 d （P<0.05）,第3天毛囊的总长度显著高于0~2 d （P<0.05）。PF-PRL、SF-PRL组毛囊在2~5 d的平均日生长长度分别极显著高于PF-K、SF-K组（P<0.01）。【结论】 10 ng/mL催乳素是体外促进毛囊生长的最适浓度,10 ng/mL催乳素对体外培养的内蒙古绒山羊的初级毛囊和次级毛囊均有极显著的促生长作用。  相似文献   

"一带一路"背景下蚕丝文化在对外汉语教学中的应用     

苏玲玲  杜国良  苏茂科  龚大刚  杜鸿 《蚕学通讯》2022,42(2):54-58

  相似文献   

油茶优良无性系嫁接苗真假判别技巧   总被引：1，自引：0，他引：1  

左继林  龚春  刘胜  幸伟年  敖婉初  徐林初 《江西林业科技》2007,(2):57-57

油茶(Camellia oleifera Abel)是我国特有的木本油料树种,也是世界四大食用木本油料树种之一。茶油的特性与橄榄油特性相似,其不饱和脂肪酸高达85%,长期食用可以降低血液中的胆固醇含量,有利于预防心血管疾病,并且对于糖尿病等疾病也有一定的预防治疗作用[1],因此日渐成为市场上深受人们喜爱的木本食用油和国家南方退耕还林工程中首选的经济林树种。  相似文献   

松茸菌株对6种松树幼苗的感染及其菌根解剖学研究   总被引：6，自引：2，他引：6       下载免费PDF全文

弓明钦  王凤珍  陈羽  陈应龙 《林业科学研究》2001,14(4):356-361

利用我国滇产松茸9924菌株及日产松茸99606菌株，分别对云南松、华山松、马尾松、火炬松、湿地松及加勒比松6种松树幼苗实施人工菌根接种。研究结果表明，接种后90d的云南松和湿地松分别有75％和78．1％的幼苗受感染并形成菌根；接种后180d,6种松树幼苗分部都可形成菌根，菌根感染率分别达90．63％－100％，感染指数达50．00－84．68；菌根形态主要有棒状、二叉分枝状及多叉分枝状3种；随树种的不同，各类菌根形态所占比例也不同；不同树种根系上形成菌根的长度也有差异，以马尾松根系上的菌根最长，华山松的菌根最短；此外，各种组合之间在菌套厚度，哈蒂氏网结构上也略有差别。  相似文献   

巨尾桉瓶内菌根化组培苗的造林效应   总被引：4，自引：2，他引：4       下载免费PDF全文

仲崇禄  弓明钦  徐大平  陈羽  王凤珍  陈霞 《林业科学研究》2002,15(2):190-196

1993～ 1994年 ,在广东省开平市国营镇海林场建立了 2个巨尾桉组培苗瓶内接种外生菌根菌的野外造林试验。 2个试验中 ,共采用 17个外生菌根菌菌株。造林后定期观测了 12或 2 4个月树高、地径和胸径等生长指标。试验结果表明 :除试验 2造林初期的树高外 ,其他所有生长指标在菌根菌处理间均有极显著差异或显著差异 ,菌根菌间对巨尾桉生长有不同的影响 ;从多重比较和接种效果分析看 ,菌株E4 0 70、H4 5 0 9、E4 2 4 0、H6 177、H4 339、E4 72 6、C930 1、C92 13和C92 0 3,在造林后 6个月开始可明显地促进巨尾桉树木生长 ,说明组培苗瓶内菌根化技术是完全可行的 ,有关菌株对巨尾桉幼树生长具有促进作用  相似文献   

经济林跨越式发展之管见   总被引：4，自引：4，他引：4  

吕芳德  黄菁  和红晓  龚洪恩 《经济林研究》2007,25(2):106-109

就我国经济林发展的历史和现状以及林业的跨越式发展进行了分析,并从科技创新、结杓调整、品种改良、安全生产和高效栽培等方面探讨了我国经济林跨越式发展的思路．  相似文献   

萃取大红袍花椒挥发油的研究   总被引：5，自引：1，他引：5  

龚祝南  弭向辉  梁侨丽  廖学巍  张卫明 《林产化学与工业》2005,25(2):83-86

利用超临界CO2萃取装置，采用动态萃取的方法，研究了压力、温度、萃取时间等因子对花椒挥发油萃取的影响，为规模化生产及其相关研究提供了科学依据。研究表明，样品200g粒度40目，最佳的萃取条件为：压力33MPa，温度55℃，时间1．0h，花椒挥发油萃取率为10．2％。气-质联用分析花椒挥发油结果表明，挥发油为3-甲基-2氮杂芴、γ-萜品烯、3-蒈烯等31种化舍物组成。其中3-甲基-2-氮杂芴含量最高，达到18．63％。  相似文献   

壳聚糖对长白落叶松和侧柏种子萌发的影响   总被引：7，自引：2，他引：7       下载免费PDF全文

李庆梅  付增娟  张洪燕 《林业科学研究》2007,20(4):524-527

用0.5、1.0、1.5、2.0 g·L-14种浓度的壳聚糖溶液分别对长白落叶松和侧柏种子浸种处理18、24 h,对照为始温45℃清水浸种24 h、恒温25℃培养21、28 d.结果表明:经不同浓度的壳聚糖溶液处理后,长白落叶松种子发芽率、发芽势、平均发芽速率和发芽指数都有显著提高,以1.0 g·L-1壳聚糖浸种24 h效果最佳;侧柏种子发芽率、发芽速率以2.0 g·L-1壳聚糖浸种24 h后效果最好.  相似文献   

Effects of Fencing and Ground Preparation on Natural Regeneration of Native Pinewood over 12 years in Glen Tanar, Aberdeenshire   总被引：2，自引：0，他引：2  

GONG  Y.L.; SWAINE  M.D.; MILLER  H.G. 《Forestry》1991,64(2):157-168

An enumeration was carried out in 1989 to assess the effectsof fencing and ground treatment 11 years previously on survivaland growth of naturally disseminated Scots pine seedlings inthe native pinewood at Glen Tanar, Aberdeenshire. Results showeda significant difference between unfenced and fenced plots onpine seedling density and height in 1989. Initial effects ofseedbed treatment on Scots pine seedling density, 2 years afterthe experiment began had largely disappeared by 1989. If removalof ground cover is used to enhance pine seed germination, theexposed seedlings may need to be protected from browsing byfencing. Received 19 March 1990.  相似文献