PCR-RFLP定量检测川贝母真伪的研究     

赵仲麟  常志远  袁超  李瑞歌  王成  王永  兰青阔 《河南农业大学学报》2018,(2)

建立了一个适合中药材川贝母的聚合酶链式反应-限制性内切酶(PCR-RFLP)的分子鉴定方法。以提取的DNA为模板进行PCR扩增和酶切反应,真品川贝母扩增产物含有Sam I酶切位点,在100~250 bp之间存在明确的2条酶切条带,而伪品贝母扩增序列中没有Sam I酶切位点不能被切出。此外,还基于PCR-RFLP技术针对川贝母真伪性进行了相对定量分析研究。结果表明,含量10%及以上的真品川贝母能被稳定检测出。  相似文献   

转基因大豆‘ZH 10-6’数字PCR精准定量检测方法的建立     

刘双  赵新  李瑞环  刘娜  兰青阔  檀建新  王永 《中国农业大学学报》2021,26(11):49-58

为实现转基因耐除草剂大豆品种‘ZH 10-6’转化体成分的精准定量检测，以转基因大豆‘ZH 10-6’的5′端边界序列为靶序列，设计PCR扩增引物和TaqMan探针，并对引物探针浓度进行优化，经特异性测试，建立了耐除草剂大豆品种‘ZH 10-6’的微滴式数字PCR检测方法。结果表明:1)特异性良好:只有以转基因耐除草剂大豆品种‘ZH 10-6’基因组为模板才有扩增信号；2)灵敏度高:在相对标准偏差≤25%的情况下，方法的检出限(LOD)为13.0个拷贝；定量限(LOQ)为66.0个拷贝；3)PCR扩增反应模板含量与样品拷贝数之间线性相关系数R²>0.99，DNA含量线性范围为0.08%~100.00%。综上，本研究建立的转基因耐除草剂大豆‘ZH 10-6’转化体定量方法特异性强、稳定性好、准确度和灵敏度高，可用于对转基因大豆品种‘ZH 10-6’的定量检测。  相似文献   

转基因检测技术与标准物质研究概述     

陈锐  朱珠  兰青阔  赵新  王永 《天津农业科学》2014,(3):10-14,31

转基因技术在农业领域的应用与发展十分迅猛,相应的检测技术体系也在不断更新与进步。本文从检测技术与标准物质两个方面对当前转基因检测技术体系的研究现状和发展趋势进行了概述。  相似文献   

寿阳旱作区高产、高效用水玉米品种引选研究     

兰青阔  马兴林  陈杰  张立军 《作物杂志》2006,(1):11-13

在寿阳旱作区对引自热量资源相近地区的优良玉米杂交种，以高产和高效用水为目标，进行了品种筛选试验。结果表明：东农250、龙单23和四早113在寿阳旱作区具有很好的适应性，3个杂交种平均产量比寿阳旱作区的主栽品种烟单14高17．1％，比四单19高18．6％，比中单2号高43．5％；水分利用效率比烟单14略高（1．5％），比四单19高12．2％，比中单2号高53．6％，表现出高产、高效用水的显著特点。但寿阳早作区目前生产中应用的玉米品种粒重较低，已成为产量进一步提高的主要制约因素。因此，今后玉米品种的选择和栽培措施的运筹，重点应放在牡重的提高上。  相似文献   

花椰菜杂交种科润F1代种子纯度的EST-SSR鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

赵新  文正华  王永  江汉民  兰青阔  陈锐  余景会 《种子》2012,31(5):119-122

以花椰菜(Brassicaoleraceavar.botrytis)杂交种科润F1代种子及其亲本为试验材料,通过GeneBank数据库上公布的202条花椰菜EST序列,利用CMDSSRServer在线引物设计,合成了36对EST-SSR引物.对花椰菜样本进行DNA提取用于杂交种纯度鉴定,通过36对SSR引物筛选,得到1对杂交一代品种带型为亲本的互补带型引物,经田间试验验证与田间形态铭察结果较为吻合,可用于花椰菜杂交种科润F1代纯度的鉴定.  相似文献   

基于Special-Base模型检测转基因作物nos/plamid构建特异性   总被引：1，自引：1，他引：0  

兰青阔  王永  赵新  陈锐  朱珠  李欧静  余景会  郭永泽  程奕 《中国农业大学学报》2012,17(2):8-12

以转基因作物中常见的nos/plamid构建特异性序列为研究对象,通过同源性比较和焦磷酸测序dispensation order设计,建立Special-Base焦磷酸测序检测模型;利用转基因大豆Roundup Ready Soybean和转基因玉米Bt11、GA21、NK603等4种转基因作物为试验材料,针对nos/plamid构建特异性序列设计引物,经复合PCR扩增及焦磷酸测序,验证Special-Base焦磷酸测序检测模型有效性。结果表明:本研究建立的Special-Base焦磷酸测序模型能检测出样品中单一或多种转基因作物成分,提高了转基因作物检测的精确性、检测通量和自动化程度。  相似文献   

转基因玉米LAMP检测体系的建立及应用   总被引：4，自引：0，他引：4  

兰青阔  王永  赵新  朱珠  景海春  程奕 《华北农学报》2010,25(4)

以转基因抗虫和耐除草剂玉米Bt11为研究材料,建立Bt11环状等温扩增快速检测技术方法.利用一种具有链置换活性的Bst DNA聚合酶,针对Bt11中玉米基因组与外源基因结合处序列,设计4条特异引物,并对反应温度、时间、灵敏度、结果判断方法等参数进行初步探索.结果显示,LAMP检测方法最适反应温度及反应时间分别为65℃和60 min,其灵敏度为常规定性PCR的20倍.LAMP技术检测转基因玉米品系Bt11具有特异性高、快速、简便等优点,具有广阔的应用前景.  相似文献   

LAMP在检测转基因抗草甘膦大豆cp4-epsps基因的应用     

兰青阔  王永  赵新  朱珠  程奕 《安徽农业科学》2008,36(24)

以转基因抗草甘膦大豆为主要研究对象,利用环介导等温扩增技术（Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP）,针对cp4-epsps合成酶基因（5-enolpymvlshimimate-3-phosphate synthase）的6个区域设计4条特异性引物,利用一种链置换DNA聚合酶（Bst DNA polymerase）,在65℃保温30Igm,通过荧光显色即可完成对转基因的检测工作。结果显示,该LAMP方法能够特异性检测cp4-epsps基因,其检测灵敏度是常规定性PCR方法的10倍。建立了针对转基因大豆cp4-epsps基因的LAMP检测方法,其具有高度的特异性及稳定性,结果可靠,适合转基因抗草甘膦大豆的快速检测。  相似文献   

天津市转基因食品标识现状调查   总被引：1，自引：0，他引：1  

王永  程奕  兰青阔  赵新  朱珠 《天津农业科学》2008,14(5)

为了解天津市市售食品转基因生物产品标识的基本情况,按照农业部第一批实施标识管理的农业转基因生物目录,对天津市14家大型超市的114种产品的转基因标识情况进行了专项调查,结果显示在被调查的食品中有24种进行了转基因标识,9种进行了非转基因标识,转基因产品标识率为21.05%,非转基因标识率7.89%。同时调查中还发现,转基因标识方法存在很大差异,而进行非转基因标识的生产企业大多未经过非转基因IP认证。今后国家应加大对转基因和非转基因食品标识的监察力度,提高转基因和非转基因食品的标识率,维护消费者对转基因食品的知情权和选择权。  相似文献   

抗虫转CpTI基因植物定性PCR检测技术的建立     

朱珠  王永  兰青阔  赵新  余景会  郭永泽  程奕 《河南农业科学》2012,41(5):56-60

为建立CpTI基因定性PCR检测方法,通过数据库查询和测序获得CpTI基因序列,设计特异性定性PCR引物,对引物、PCR反应条件和反应体系进行优化,并对检测方法的特异性、灵敏度等进行分析试验。结果表明,CpTI基因特异性定性PCR检测方法选择退火温度为58℃,引物浓度为0.4μmol/L较好,该方法能够特异性检测样品中CpTI基因,检测灵敏度达0.05%(质量比)。该方法符合农业转基因生物产品成分检测标准对特异性、灵敏度、重复性的要求,可为抗虫转CpTI基因植物生物安全管理提供技术支撑。  相似文献