猪肺脏气道上皮干细胞的特异抗体筛选与抗原表达研究     

杨佳丽  石娟  马凌洁  包少文  郝秀静  曾瑾  李勇  刘晓明 《动物医学进展》2013,34(9)

猪肺脏气道上皮主要由基底细胞,克拉拉细胞,纤毛细胞,杯状细胞等上皮细胞类型组成,筛选猪气道上皮干细胞的相关特异性抗体,观察其特异抗原的表达,将有助于对猪气道上皮干细胞的分离、鉴定和生物学特性的研究.试验中,制备远端气道上皮细胞的冰冻切片与细胞爬片,利用免疫荧光染色法,分析不同物种来源的抗体对猪气道上皮细胞的免疫染色反应;同时利用Oct3/4、Sox2、CD133和SSEA-1等10种上皮干细胞相关抗体分析猪气道上皮干细胞表面抗原表达情况.通过试验,筛选出在猪气道上皮干细胞相关抗体,并发现气道组织冰冻切片未检测到这10种抗体相关的阳性细胞,而在细胞爬片中观察到CD49f和CD117阳性细胞数量较多.免疫荧光共染发现这些CD49f和CD117阳性细胞同时也表达基底细胞表面标记Keratin 14.这可能是正常情况下猪气道上皮干细胞数量极为稀少,表面抗原表达量低而不易检测到,在肺脏气道上皮受到外环境刺激时(如消化),上皮干细胞开始增殖以完成损伤修复作用发生数量上的增殖.综上所述,利用Keratin 14和CD49f或CD117(c-kit)双标染色法可以鉴定猪肺脏气道上皮干细胞的候选亚群来用于其生物学特性与功能的研究.  相似文献   

重组绿脓杆菌外毒素A受体结构区蛋白的初步复性及细胞生物学？…   总被引：1，自引：1，他引：0  

刘晓明  王瑾琪 《中国兽医学报》1998,18(5):469-472

用逐步稀释透析法将将纯化的大肠杆菌表达的重组绿脓杆菌外毒素Ａ（ＰＥＡ）受体结合区蛋白初步复性,复性后的可溶性蛋白用于竞争抑制ＰＥＡ的细胞毒性实验。将１０μｇ／Ｌ的ＰＥＡ与其敏感细胞１．９２９共孵育,３６ｈ左右可见细胞发生病变死亡,而同时加入复性的重组ＰＥＡ受体结合区蛋白的培养细胞也与未加ＰＥＡ阴性对照培养细胞一样仍分裂增殖,这种ＰＥＡ细胞毒性抑制人作用可持续到所有培养细胞老化死亡,结果表明,重组Ｐ  相似文献   

纤维素酶产生菌黑曲霉X-15的选育及其产酶条件   总被引：16，自引：0，他引：16  

王景林  刘晓明  吴东林  蒋兴村 《中国兽医学报》2000,20(1):97-99

突变型黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｒｓ ｎｉｇｅｒ）Ｍ００１分别经紫外线（ＵＶ）、亚消基胍（ＮＴＧ）、ＴＤＰ辐射仪及空间微重力辐射（ＳＣ）等因素的多级循环处理，得到１株形态发生改变的变异菌株Ｘ－１５。其固体培养纤维素酶的滤纸分解酶活力（ＦＰＡ）为１９Ｕ／g，羟甲基纤维素酶（ＣＭＣａｓｅ）活力为４５３Ｕ／g，β－葡萄糖苷酶（β－ｇｌｕａｓｅ）活力为１５４Ｕ／g，与出发菌株Ｍ００１相比，分别为其２．８倍、  相似文献   

我国发展现代风险导向审计的对策与建议     

刘晓明 《湖南农机》2007,(7):140-142

本文研究了现代风险导向审计在我国的运用前景,分析了依托我国最新的审计风险准则,发展现代风险导向审计的方法,提出了在我国推行现代风险导向审计的几条政策建议。  相似文献   

不同剂量双氢埃托啡对大鼠血浆、下丘脑和垂体β—内啡肽的影响     

信文君  刘晓明等 《内蒙古畜牧科学》2000,21(4):6-8,18

用放免的方法探讨了不同剂量的DHE对大鼠血液、垂体和下丘脑β－EP含量的影响。结果表明：在不同剂量DHE的实验组中，总体上呈剂量依赖性，随着DHE剂量的增加，血浆、下丘脑β－EP含量上升，最高可达到239．0pg/mL和185．4pg/mg；垂体β－EP含量下降，最低可达27．2pg/mg。值得注意的是低剂量时（低于无效剂量）可使痛阈降低，血浆β－EP含量下降；高剂量则表现为镇痛效应。结果提示：DHE为纯阿片受体激动剂，对大鼠内源性镇痛系统中β－EP的含量呈剂量依赖性。  相似文献   

家兔冬养冬繁技术     

李庆国  刘晓明 《农村百事通》1998,(1):41-41

  相似文献   

沼液灌根对西瓜生长发育及产量的影响     

刘晓明 《农业科技与信息》2008,(15):17-17

运用沼液对西瓜进行灌根，西瓜叶片增绿，与不用沼液对比，果实明显增大，预计增产15％～20％，是一项值得推广的新技术。  相似文献   

砖混结构设计与预防裂缝分析     

刘晓明  王建磊 《山东饲料》2008,(24)

从实际工作中总结出的砖混结构的设计内容、难点和注意事项,尝试找到理论和实际相结合的一个切入点。  相似文献   

斑点金标免疫渗滤法诊断家畜血吸虫病的效果     

汪承相  舒诚芬  游继红  刘晓明  赵艳华 《中国兽医杂志》2007,43(5):26-28

我县从2005-2006年推广应用斑点金标免疫渗滤法(DIGFA)诊断家畜血吸虫病新技术,该项新技术具有快速、简便、准确、省时、省力等优点,使阳性病畜得到及时治疗,取得了满意的效果。1材料与方法1.1诊断试剂DIGFA诊断试剂及Dot-ELISA诊断试剂均由浙江省农业科学院畜牧兽医研究所提供  相似文献   

表达产肠毒素性大肠埃希菌STa-K99融合蛋白重组腺病毒的免疫学特性研究     

包少文  庄佩佩  石娟  杨佳丽  曾瑾  李武  刘晓明  邓光存 《中国预防兽医学报》2014,36(12)

为研究表达产肠毒素性大肠埃希菌(ETEC)耐热性肠毒素STa与粘附素K99融合蛋白重组腺病毒rAd.STa-K99的免疫学特性,本实验将rAd.STa-K99经肌肉注射免疫小鼠,采用ELISA法分别检测了特异性IgG、SIgA、脾脏淋巴细胞增殖活性水平及CD4+、CD8+T淋巴细胞分型比值;并通过攻毒保护试验对其免疫效果进行评价.结果表明,免疫后小鼠特异性IgG、SIgA及脾脏淋巴细胞增殖活性水平显著升高;CD4+/CD8+值显著增大;动物攻毒保护率达到70％.结果表明rAd.STa-K99可以刺激小鼠机体产生较高水平的体液免疫、特异性细胞免疫和肠道粘膜免疫反应,并对小鼠提供有效保护.本实验为研制预防由ETEC引起的新生动物腹泻重组腺病毒疫苗奠定了基础.  相似文献