烟草靶斑病菌内切多聚半乳糖醛酸酶基因endoPGs的克隆及表达特征分析   总被引：1，自引：1，他引：0  

赵艳琴  吴元华  赵秀香  陈建光  伏颖  安梦楠 《中国农业科学》2014,47(10):1939-1946

【目的】内切多聚半乳糖醛酸酶（endo polygalacturonases,endoPGs）是重要的致病因子之一。论文从烟草靶斑病菌（Rhizoctonia solani）强致病力菌株YC-9和弱致病菌株LF-2中克隆该致病基因,分析比较该基因的序列特征、进化关系和表达特性,研究其在与烟草互作过程的致病作用。【方法】通过比较GenBank中不同植物病原真菌的endoPGs序列设计简并引物,首先获得菌株YC-9及LF-2的endoPGs基因片段,再采用RACE技术克隆获得其cDNA全长序列;生物信息学分析比较其保守结构域及序列特征;采用MEGA 4.0软件构建endoPGs的系统进化树;通过real-time RT-PCR技术对强致病力菌株YC-9及弱致病力菌株LF-2的endoPGs与烟草K326互作的表达特性进行研究。【结果】克隆获得了烟草靶斑病菌强致病力菌株YC-9和弱致病力菌株LF-2的endoPGs的cDNA全长序列,分别命名为endoPG1和endoPG2,开放阅读框（ORF）长度均为1 086 bp,编码361个氨基酸;比较分析表明endoPG1和endoPG2的推测蛋白均具有PLNO3003基因家族保守结构域,其跨膜结构间存在差异;成功构建了该基因系统进化树,结果表明来自烟草靶斑病菌的endoPGs构成独立分支,且烟草靶斑病菌endoPG1及endoPG2同源关系最近;real-time RT-PCR表达特性分析结果显示,靶斑病菌endoPG1和endoPG2与烟草互作（接种）之后该基因的表达与未互作（不接种）的对照样品相比均呈明显上调趋势,同时endoPG1表达迅速且高于endoPG2。【结论】 烟草靶斑病菌强致病力菌株YC-9及弱致病力菌株LF-2的内切多聚半乳糖醛酸酶基因均具有PLNO3003基因家族的保守结构域,其推测蛋白的跨膜结构间存在差异,该推测蛋白与烟草靶斑病菌同源关系最近,且endoPG1和endoPG2的推测蛋白的同源性最高;内切多聚半乳糖醛酸酶基因的表达受与烟草互作的诱导,在不同致病力菌株中存在明显差异。  相似文献   

西南烟区主栽烟草品种叶片发生及生长模拟模型建立     

孙延国  董建新  吴元华  王程栋  冯长春  凌爱芬  马兴华 《中国农业科技导报》2018,20(8):29-38

为明确西南烟区烟草叶片发育动态规律,实现烟叶精准可控生产,采用田间对比试验,研究了K326、NC89、云烟85、红花大金元4个主栽品种叶片发生及生长规律,并分别建立Richards生长动态模型。结果表明：所有生长模型R2值均在0.980以上,表明模型准确度很高;4个品种叶片发生模型均是只有缓增期和快增期的非典型“S”型生长曲线,而叶片生长模型均是典型“S”型生长曲线;不同品种叶片数目基本一致,均是38~40片,但叶片发生进程差异明显,红花大金元移栽后35 d达到最大叶片数目,其他三个品种均在移栽后42 d达到最大叶片数目;不同品种中部叶最大叶面积大小顺序为红花大金元＞K326＞云烟85＞NC89,但其生长过程基本一致,缓增期12~14 d,快增期16~17 d,稳增期30~31 d。  相似文献   

在大白菜上获得烟草花叶病毒     

韦石泉  吴元华 《中国农业科学》1988,21(6):92-92

作者于1985—1987在辽南的瓦房店菜地大白菜上获得一个分离物,经常规鉴定证实它是烟草花叶病毒大白菜分离株(TMV_((B_p)))。尔后对其奇主范围、症状及病毒特点等进行了研究,现简报如下。 TMV_((B_p))接种大白菜(福山包头、山东早熟)  相似文献   

农用抗生素TS99的分离纯化     

文才艺  赵玉华  吴元华 《河南农业科学》2009,(1)

TS99是由杀真菌链霉菌产生的一种新型抗真菌农用抗生素。为了明确其适宜的分离纯化工艺,研究了大孔树脂吸附、硅胶柱层析和薄层层析等色谱法分离纯化农抗TS99的条件和效果,结果表明,中等极性的大孔树脂和硅胶是吸附法和色谱法分离纯化TS99的适宜填充剂,其最佳洗脱剂分别为70%甲醇、乙醇∶氨水∶水(8∶1∶1,V/V/V)和展层剂氯仿∶乙醇∶水(2∶3∶1,V/V/V)。发酵液经过预处理后,依次用大孔树脂吸附,硅胶柱吸附层析和薄层层析等分离方法即可获得农用抗生素TS99纯品。  相似文献   

硫酸镁对烟草感染PVYN后病情及防御酶系活性的影响     

顾晶晶  李鑫  赵秀香  吴元华 《沈阳农业大学学报》2009,40(3)

对叶面喷施240mg·L-1硫酸镁溶液后,烟草幼苗感染烟草马铃薯Y病毒脉坏死株系(Potato Virus Y-vein necrosis.PVYN)的发病情况、病毒含量及防御酶系活性进行研究.结果表明:烟草幼苗经240 mg·L-1MgSO4处理,再接种PVYN后其发病程度减轻,病情指数及幼苗叶片中病毒含量均低于未喷施MgSO4的对照.叶面单独喷施MgSO4处理和喷施后接种PVYN处理,对苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)的活性均有较强的促进作用.烟草幼苗接种PVYN后,PAL在处理第6天时达到酶活高峰(2.63U·g-1FW),POD、PPO的活性在接种PVYN后第15天时产生高于对照处理的酶活高峰,峰值分别为55.76U·g-1FW和10.62U·g-1FW;但喷施MgSO4对过氧化氢酶(CAT)活性影响较小.本研究证实,MgSO4具有较强的诱导植物产生抗病毒的能力,可明显提高植株的抗病性.  相似文献   

大豆不同外植体组织培养及再生研究   总被引：12，自引：0，他引：12  

王升吉  吴元华 《沈阳农业大学学报》1999,30(3):255-259

利用不同大豆品种的顶芽、胚轴、子叶节、子叶、叶片等做为外植体,进行组织培养再生研究。结果表明：不同大豆品种诱导分化芽的能力差别较大,供试品种中,辽豆11号和辽豆10号的再生能力较强,诱芽率分别为39．8％和36．0％。对诱芽率的影响,经L_（16）（4）~5正交实验可知外植体＞品种＞培养基。外值体对诱芽率影响依次为：子叶节＞顶芽＞子叶＞下胚轴。6－BA对不同外植体诱导芽发生的适宜浓度不同,顶芽、下胚轴为0．5mg·l~（－1）,子叶为1．0mg·1~（－1）,成熟子叶为4．0mg·L~（－1）。  相似文献   

烟草野火病的研究进展   总被引：9，自引：0，他引：9  

刘秋  吴元华 《沈阳农业大学学报》1999,30(3):354-360

对世界普遍发生的烟草野火病,从病害分布和为害、病原细菌、烟草抗源及抗病性遗传、病害流行规律及其综合防治策略等几方面进行了论述,并介绍了目前存在的主要问题和展望。  相似文献   

株距对烟苗生长发育的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

许娜  王大海  杜传印  杜沙沙  王晓萌  张彦  张玉琴  吴元华  管恩森  石屹 《浙江农业学报》2020,32(8):1342

为明确不同株距对烟苗生长发育的影响,以烤烟K326为试验材料,研究了试验托盘根际空间一致(90 cm³)的条件下,不同株距(3、6、9 cm)处理对烤烟苗期根、茎、叶发育和相关生理指标的影响。结果表明,不同株距对烟苗群体结构、新生叶发生速度、叶片数量、各部位叶面积、光合特性、茎高、节距、茎半径、茎木质化程度、根系构型和根系活力均有显著影响,但烟苗株型和伸长量最大的节位不随株距变化而改变。不同株距影响了烟苗群体结构、表型和相关生理指标,根际空间90 cm³、株距6 cm更有助于烟苗的生长发育。  相似文献   

不同根际空间育苗方式对烟苗生长发育的影响     

许娜  王大海  杜传印  杜沙沙  王晓萌  张彦  吴元华  管恩森  郭冬冬  石屹 《江苏农业科学》2020,48(19):87-92

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草莓伪温和黄边病毒抗血清制备及血清学检测技术研究     

吴元华  韦石泉 《沈阳农业大学学报》1994,25(1):51-55

将提纯的草莓伪温和黄边病毒（ＳｔｒａｗｂｅｒｒｙｐｓｅｕｄｏｍｉｌｄｙｅｌｌｏｗｅｄｇｅｖｉｒｕｓＳＰＭＹＥＶ）作抗原免疫家兔，获得效价较高的抗血清，经ＳＤＳ－对流免疫电泳测其效价为１：１２８．四点疫吸附固定法检测ＳＰＭＹＥＶ效果甚理想，可检测到微量病素，提纯病毒浓度低至０．０５μｇ／ｍｌ仍有效果．酶联免疫吸附测定法检出灵敏度也相当高，当病毒浓度为０．１μｇ／ｍｌ时及病叶汁液稀释至１０２４倍时，仍呈阳性反应．免疫电镜技术检视，ＳＰＭＹＥＶ抗血清能清晰地”捕获”同源病毒，并且有装饰作用，抗血清以稀释为１：５００时“捕获”病毒粒子最多．  相似文献