黄瓜花叶病毒M株系引致烟草症状恢复的初步研究     

陈明胜  李桂芬  朱水芳  陈红运  安德荣  李明福 《植物病理学报》2007,37(2):164-168

 黄瓜花叶病毒M株系在白肋烟上具有典型的症状恢复现象,本研究用提纯病毒和DAS-ELISA建立了CMV-M病毒定量检测方法。研究发现,症状严重程度与叶片中的病毒浓度呈正相关:最早发病的黄化叶每克病组织中病毒可高达790 μg,而恢复叶片上部再发病的花叶症状病叶中每克病组织中病毒也可高达508 μg,恢复叶片中病毒含量很低,每克叶片中最高也没有超过6 μg,仅为发病叶片病毒浓度的1/85~1/135,远低于根和茎中的病毒浓度。RT-PCR和生物学检测结果表明恢复叶片中确实存在具侵染活性的病毒,而且病毒在长达半个月以上一直保持很低浓度。结果表明恢复叶中可能存在有效的病毒防御机制,其具体机理有待进一步研究。  相似文献   

亚洲梨枯死病研究概况     

商明清  赵文军  朱水芳  张乐  李志红 《植物检疫》2007,21(4):219-221

本文概述了亚洲梨枯死病的发生分布、危害症状、寄主范围以及病原菌（Erwinia pyrifoliae）的培养性状、生理生化特性、分子生物学特点等,并分析了与梨火疫病菌的关系,指出了对我国的潜在危险性及检疫重要性.  相似文献   

我国木本植物致病性土壤杆菌的分子检测和比较鉴定     

田国忠  李永  朱水芳  贾瑞祥  王慧敏 《林业科学》2006,42(2):63-72

根据根癌土壤杆菌Ti质粒的保守序列设计了2对引物,对我国不同木本植物上分离鉴定的10株致病性根癌土壤杆菌进行PCR,致瘤性根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)扩增出427 bp和338 bp的特异性DNA片段,而发根土壤杆菌(A.rhizogenes)仅扩增出338 bp片段,放线土壤杆菌(A.radiobacter)、丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)和泡桐丛枝病植原体(phytoplasma)皆未有特异扩增带.用CYT/CYT'引物对也可鉴定T-DNA遗传转化瘤组织,而VirD2A/VirD2E可用于工程土壤杆菌株侵染能力鉴定.从北京通州杨树苗圃和河北廊坊桃园的病树冠瘿组织和土壤中经选择培养基分离菌株,然后PCR筛选出6个致病性根癌土壤杆菌菌株,而未能从施用过抗根癌生防制剂的北京玉渊潭公园樱花根癌病园中分离和鉴定出典型的致病根癌土壤杆菌株.将杨树根癌土壤杆菌菌株(CFCC1001)异戊烯基转移酶基因(ipt)片段克隆和序列测定结果显示与A.tumefaciens Ti15955菌株的ipt基因序列同源性为83.64%.用此片段制备的ipt cRNA基因探针进行斑点杂交和Northern blot,结果显示此探针与杨树根癌土壤杆菌以及玫瑰、樱花、海棠、桃树等木本植物上分离鉴定的致病土壤杆菌菌株所扩增出的427 bp片段都有明显杂交信号,但与引起泡桐丛枝病植原体染色质和染色质外DNA均未有明显杂交信号.  相似文献   

PCR-DHPLC技术快速检测玉米细菌性枯萎病菌   总被引：1，自引：0，他引：1  

朱金国  莫瑾  彭梓  朱水芳  赵文军  刘红霞  钟文英 《植物检疫》2009,23(5)

本研究成功建立了玉米细菌性枯萎病菌的PCR检测方法.该方法根据细菌ITS序列的特异性,设计了对玉米细菌性枯萎病菌具有稳定性点突变的特异性引物及探针,并对5株玉米细菌性枯萎病菌及18种植物原性细菌的DNA进行了PCR、实时荧光PCR及PCR结合变性高效液相色谱技术(PCR-DHPLC)检测.结果表明,几种方法特异性强,检测灵敏度均为菌液浓度102 cfu/mL,PCR-DHPLC技术具有检测成本较低、高通量、自动化程度高、污染风险小及鉴定结果准确等特点,能够满足快速、准确诊断玉米细菌性枯萎病菌的要求.  相似文献   

亚洲梨火疫病菌入侵中国的风险分析     

商明清  赵文军  李志红  杨伟东  朱水芳 《植物检疫》2009,23(6)

亚洲梨火疫病(Erwinia pyrifoliae)是一种严重为害梨树的毁灭性病害,本文从其分布状况、寄主、危害及经济重要性、寄主植物经济重要性、传入与定殖可能性和风险管理难度等方面进行了综合分析评估,其综合风险值R为2.52,属于特别危险的有害生物,并据此提出了防止其入侵为害的风险管理措施.  相似文献   

辽中地区西瓜花叶病病原的分子鉴定   总被引：21，自引：1，他引：20  

陈红运  赵文军  程毅  李明福  朱水芳 《植物病理学报》2006,36(4):306-309

 利用ELISA和RT-PCR方法对采自我国辽中地区的西瓜花叶病样品进行检测,表明其病原为黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)。将此分离物(CGMMV-Wcn)的外壳蛋白基因克隆后进行序列分析,结果表明其cp基因由486个碱基组成,编码161个氨基酸,与已报道的其它分离物一致;CGMMV-Wcn所致症状与西瓜株系(CGMMV-W)相同,且二者cp基因的氨基酸序列完全一致,因此该分离物应为CGMMV-W。  相似文献   

马铃薯卷叶病毒分离株外壳蛋白基因和17k蛋白基因的克隆及序列分析   总被引：2，自引：1，他引：2  

吴志明  朱水芳  田文会  张成良 《河北农业大学学报》2002,25(4):62-66,72

从典型的马铃薯卷叶病毒病株中直接提出植物总RNA，根据PLRV外壳蛋白基因序列，设计合成了一对寡核苷酸引物，经RT－PCR法扩增出全长的cDNA片段，将其克隆到质粒pGEM-3Zf( )上，并进行了序列分析。结果表明，克隆的cDNA片段由627个核苷酸组成，编码208个氨基酸组成的理论分子量为23k的蛋白，与PLRV外壳蛋白的大小一致；此外克隆片段还含有一个不同于外壳蛋白基因的阅读框架，该框架由465个核苷酸组成，编码155个氨基酸组成的理论分子量为17k的蛋白，与PLRV的17k蛋白大小一致，与国外报道的几个株系相比，PLRV分离和的外壳蛋白基因及17k蛋白基因的核苷酸同源率分别高达97.5%-99.7%和96.5%-99.6%，由此推测的氨基酸同源率高达97.6%－99.5%和96.1%-99.4%，说明所克隆的PLRV外壳蛋白基因和17k蛋白基因具有高度的保守性，本研究克隆了PLRV分离物外壳蛋白和17k蛋白基因的序列，为进一步进行抗PLRV基因工程研究奠定基础。  相似文献   

黄瓜花叶病毒紫松果菊分离物外壳蛋白特性分析     

张永江  李桂芬  朱水芳  施宗伟  李明福 《江西农业大学学报》2007,29(1):34-37

以紫松果菊上分离的黄瓜花叶病毒2-1-2的RNA为模板,采用RT-PCR(反转录聚合酶链式反应,下同)技术对2-1-2的外壳蛋白(coat prote in,CP)基因进行了克隆和序列测定。该CP基因全长657个碱基,编码218个氨基酸。其核苷酸序列和推导的氨基酸序列与亚组I代表株系Fny的同源性分别为94.5%和98.1%,与亚组II代表株系Q的同源性分别为77.7%和82.5%。对包括该分离物在内的20个CP序列与地域之间的关系进行了分析,结果表明CMV不同分离物的亚组类型与地域无明显关系。  相似文献   

葡萄卷叶伴随病毒ⅢCP基因在E.coli中的表达     

赵冬兰  朱水芳等 《西北农业大学学报》2001,29(1):88-90

将葡萄卷叶伴随病毒Ⅲ的CP基因克降到表达载体pET-30a中，转化大肠杆菌BL21，筛选得到阳性克隆GB－1，用IPTG诱导使其表达。SDS－PAGE电泳分析表明，该CP基因在大肠杆菌BL21中得到大量表达。用该病毒的CP抗血清通过间接ELISA证明所表达的蛋白具有很好的抗原性。  相似文献   

核rDNA ITS序列在植物种质资源鉴定中的应用   总被引：7，自引：0，他引：7  

赵玥  赵文军  朱水芳  吕国忠 《辽宁农业科学》2005,(5):26-28

核rDNA 的内转录间隔区ITS序列包含被5.8S rDNA所分隔的ITS1和ITS2两个片段.在裸子植物中,ITS序列长度变异较大,不利于扩增和测序,但长度的变异可以作为一个性状用于裸子植物的鉴定与系统学研究.在被子植物中,ITS序列的长度稳定,而且序列变异较快,可以提供丰富的信息位点,是被子植物鉴定中的重要分子标记.文中对ITS在植物物种鉴定中的应用进行了介绍.  相似文献