不同转染方法转染牛体细胞效率的比较     

李松  丁方荣  戴蕴平  朱士恩 《农业生物技术学报》2011,19(6)

为了从新转染方法与传统转染方法的比较中找出更为高效的转染方法,本研究以绿色荧光蛋白(GFP)质粒DNA为外源基因,分别采用核转染法、电穿孔法和脂质体法转染牛的3种常用核移植供体细胞(胎儿成纤维细胞、胎儿输卵管上皮细胞、卵丘颗粒细胞).针对不同类型的细胞,实验首先对核转染法和电穿孔法的转染参数进行了系统的摸索和优化,然后将优化后的核转染法、电穿孔法与脂质体法在可控实验条件完全一致的情况下进行了转染对比实验,分析比较了转染48 h后的绿色荧光比率和细胞存活率.结果显示,核转染法转染胎儿成纤维细胞、胎儿输卵管上皮细胞和卵丘颗粒细胞的优化程序分别是V013、T023和U023;在电穿孔法中,当电场强度为90 V/mm,脉冲时间为10 ms时,胎儿成纤维细胞和卵丘颗粒细胞的转染效率最高,胎儿输卵管上皮细胞则在电场强度为80 V/mm,脉冲时间为5 ms时获得了最佳转染效率;最后通过转染对比实验得出,核转染法在3种细胞中都获得了最高的转染效率,分别为(98.78±0.30)％、(88.43±2.10)％和(71.31±0.77)％,均显著高于电穿孔法和脂质体法;转染后的存活率则为脂质体法最高,电穿孔法最低.研究结果说明,核转染法可以成为一种结合牛体细胞克隆技术生产转基因牛更有效的转染方法.  相似文献   

土壤酶和养分流失的关系研究   总被引：7，自引：3，他引：7  

李松 《水土保持学报》1990,4(2):70-74

  相似文献   

山坡地苹果丰产示范研究     

李松  宫春旺  刘文宏 《中国水土保持》2001,(8):28-30

采用试验与调查相结合的方法 ,系统地探讨了在黄土高原沟壑区山坡地苹果园应用新技术的效果 ,以及在同类立地条件下苹果与冬小麦的经济和生态效益。结果表明 :山坡地苹果园应用新技术能大幅度提高产量、产值和降低生产成本 ;山坡地苹果园年纯收入是冬小麦的 7倍 ,果园产量和产值的年际递增率绝大部分超过 0 0 5 ,而冬小麦大部分为减产或减效 ,果园产量和产值的平均相对变动率为冬小麦的 40 %左右 ,绝对变动率均低于冬小麦 ;山坡地果园主要养分比冬小麦地高 17 7%～ 85 .0 7% ,孔隙度增加 1.6%～ 6.7% ,土壤转化酶活性提高 80 %  相似文献   

黄土高原山坡地果园建设示范研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

李松  宫春旺  蔡小春  刘立斌  刘文红  李学勇  王福林 《水土保持学报》2003,17(5):138-141

在黄土高原沟壑区、丘陵第一付区和丘陵第三付区的山坡地分别布置苹果、梨和枣 进行试验研究,研究得到果园应用新技术能显著增加果树的生长量和提高产量,土壤肥力不 断提高,各肥力指标较同类的农作物地分别提高3%～121%,纯经济收入增加2.8～7倍,产量 和产值的逐年递增率高于农作物地,其相对变动率、绝对变动率和变异系数均低于农作物, 果园生产具有较高的稳定性和恢复弹性的能力.表明黄土高原山坡地建果园是土地资源高效利用的重要途径.  相似文献   

奶牛乳房炎及其防制(一) 奶牛链球菌性乳房炎及其防制     

张深固  李松彪  徐荣军 《养殖技术顾问》2006,(1):38-39

从本期起将连载由河南科技大学资深教授、郑州后羿企团技术总监张深固撰写的关于“奶牛乳房爽及其防制”系列技术文章，对奶牛乳房炎的发病原因、特点、防制措施等做系统、全面的论述，以供各地基层畜牧兽医人员和广大奶牛饲养户参考与借鉴。  相似文献   

我国发展能源甘蔗研究生产的现实意义   总被引：12，自引：0，他引：12  

李松杨荣仲  谭裕模莫磊兴 谭芳 《广西蔗糖》2003,(3):44-45,32

本文根据我国石油资源短缺情况，提出借鉴巴西经验发展能源甘蔗生产，开发燃料酒精代替部分石油产品，促进我国甘蔗产区农作物种植结构调整，实现我国蔗糖产业经济、社会、生态三效益的提高。  相似文献   

小鼠胚胎干细胞密度梯度离心去核法     

李相运  窦忠英  李松  华进联 《畜牧兽医学报》2003,34(1):40-43

在细胞松弛素B的参与下，通过Ficoll密度梯度离心法可有效制备小鼠无核ES细胞，在适宜条件下，悬液培养中40％的小鼠ES细胞可发生去核作用，经Hoechst染色和形态观察确定：80％的去核ES细胞在30min内可恢复其原有形态，但其生活力不会超过48h，这为研究ES细胞的胞质功能及核质互作效应提供了一种可行的细胞去核方法。  相似文献   

熊消化道寄生虫调查及驱虫试验     

姜昌武  李松雄  车大山  金仁淑  张守发 《延边大学农学学报》1989,(2)

1988年10～11月,对延边几个人工养熊场进行了消化道寄生虫调查及驱虫试验。共查出4种虫体,分属2门、2纲、3科、4属,并以盐酸左旋咪唑按5～6mg/kg 进行驱虫,收到了较好的效果。  相似文献   

烟台市日光温室厚皮甜瓜秋延迟栽培技术     

孙丰宝  孙振军  李松 《中国瓜菜》2003,(5):22-23

日光温室厚皮甜瓜秋延迟栽培,在烟台市播种期一般安排在8月上、中旬,11月下旬至12月上旬收获。苗期正值高温、强光、多雨季节,膨瓜期及成熟期又处于气温下降、天气日渐寒冷的季节。而厚皮甜瓜膨瓜期和成熟期要求较高的温度、较强的光照和较大的昼夜温差。因此,生产上有一定的难度,管理不当会造成多病、畸形果多、果实着色不良、减产甚至绝产。1品种选择日光温室秋延迟栽培厚皮甜瓜,应选择较抗病毒病,且在较低温度和较弱光照下果实能正常膨大、成熟的品种;这茬瓜供应期以“元旦”和“春节”为主,故还要求有良好的耐贮性。本市多选用状元、伊…  相似文献   

手术取出黑熊胃内异物     

金河变  韩哲  朴正学  李松  崔寿德  樊志仁  尹斗岩  钟源  郑基天  伟契 《吉林畜牧兽医》1995,(4)

自从人工养熊以来,在人工繁殖和取胆手术中,由于种种原因常常发现偷吃异物现象,其症状较复杂,不易诊断,手术治疗也较难。笔者在养熊实践中,在有60只的延边××养熊场中,已做胃内异物取出手术6例,其中死亡1例,成功5例,均恢复健康,其效果良好。对黑熊胃内异物取出手术成功实例尚未见报导。为发展养熊业,现将其诊治过程报告如下,以供同道们做参考。  相似文献