猪Utx慢病毒过表达/干扰载体的构建和病毒包装          下载免费PDF全文

闫海龙  陈晓旭  朱晋生  张鹏飞  李爽  曾文先 《家畜生态学报》2017,38(8):7-13

UTX(ubiquitously transcribed TPR gene on the X chromosome)作为H3K27me2/3的去甲基酶,能够调控动物发育过程,并有着重要的生物学作用。根据猪Utx预测序列,扩增Utx的CDS区全长序列。利用Utx的CDS区序列信息,构建pCD513B-CMV-Utx过表达载体,设计并合成干扰shRNA和阴性对照寡核苷酸片段。其中干扰shRNA及阴性对照通过退火形成双链DNA,并插入pCD513B-U6慢病毒干扰载体。采用双酶切的方法和DNA测序鉴定重组载体。通过干扰和过表达载体质粒共转293T细胞,利用qRT-PCR筛选出最有效的干扰序列。重组质粒与其他3种慢病毒辅助包装质粒(pRsv-Rev、pGag-Pol、pVSV-G)共转染293T细胞包装慢病毒。结果表明,本试验成功扩增Utx基因的全长序列,且成功构建了Utx的过表达和干扰载体。qRT-PCR筛选出pCD513B-U6-Utx-shRNA-3干扰效率最显著,干扰效率为70%。本试验成功包装出慢病毒Lenti-Utx-shRNA、Lenti-NC和Lenti-Utx,测定的病毒滴度分别为6.1×107 TU/mL、4.8×107 TU/mL和3.9×105 TU/mL。此试验为进一步在猪源细胞中进行Utx基因的研究奠定基础。  相似文献   

新疆呼图壁县基层兽医社会化服务探索与实践     

李威  李爽  马丽梅  玛依拉&#;艾尼瓦 《兽医导刊》2017,(19)

<正>近年来,由于动物防疫任务越来越重,加上基层动物防疫人员待遇普遍偏低,出现基层防疫队伍不稳定、防疫效果不扎实的情况。兽医社会化服务是兽医公益性服务的重要内容,并将逐步成为兽医服务市场化的主导力量和畜牧业发展的重要推动力。本文通过调研呼图壁县大丰镇动物疫病防控工作实际,详细介绍合作社运作模式,将重大动物疫病免疫注射等技术服务职能,以政府购买公共服务或开展有偿服务的方式,交由大丰镇动物防疫专业合作社完成,从而初步形成基层兽医社会化服务体系。  相似文献   

对《电磁波衰减系数特性分析》结果的猜想     

钟乙源  张岩  陈兴生  李爽 《长江大学学报》2017,14(19)

对陈清礼等提出的"利用超过阈值频率的电磁波进行大深度勘探"的观点进行了深入分析,并提出质疑。主要对陈清礼等观察到的衰减系数高频振荡现象进行了模拟,然后对该现象进行分析,将该现象解释为数值误差造成的假象。给出了一种数值稳定的计算方法,用变换后的方法计算电磁波衰减系数,结果显示电磁波的衰减系数随频率始终递增,并在高频段趋向于稳定值,表明陈清礼等计算的高频衰减现象实际是由数值误差的放大造成的假象;最后,在数学上严格证明了衰减系数的极限随频率增加而收敛于一个正数。  相似文献   

黑龙江集贤县民间药用植物的应用现状     

王长宝  杨娜  李爽  王西方  张洪波  金盈鑫 《安徽农业科学》2017,45(17)

[目的]掌握集贤县当前民间药用植物的使用现状。[方法]通过走访调查、实地考察及文献考证。[结果]整理出主要药用植物27种,包括大宗药材5种、常用药材8种、不常用药材14种。当地药用植物具有一定的特殊疗效,但常用种类减少;大宗药材主要外销,在当地使用率不高;用药单一,方法粗糙,且存在同名异物的混淆现象。[结论]该研究为中药材的挖掘开发提供科学证据。  相似文献   

类黄酮参与调控中亚滨藜幼苗对盐胁迫的耐受性     

李爽  孙亮亮  白丽丽  王文颖  万金鹏  刘小京  马金虎  徐进 《中国生态农业学报》2017,25(9):1345-1350

中亚滨藜是一种典型的盐生植物,广泛分布在我国盐碱地区。前期研究中,我们发现盐胁迫显著诱导了中亚滨藜幼苗根尖类黄酮的累积,但其中的生理机理尚不完全清楚。在不同盐浓度(50 mmol·L~(-1)、100 mmol·L~(-1)、250mmol·L~(-1)、500 mmol·L~(-1)、600 mmol·L~(-1) NaCl)处理下,通过添加KNO_3(25 mmol·L~(-1)、35 mmol·L~(-1))和外源槲皮素(100 nmol·L-1 quercetin),采用植物生理学和生物化学等研究方法,分析了盐诱导的类黄酮累积在调节中亚滨藜幼苗耐盐性中的生理机理。研究结果表明,使用外源类黄酮类物质——槲皮素进行处理,一方面更加抑制了盐胁迫下幼苗主根的生长,同时还显著降低了根部H_2O_2的累积和幼苗在盐胁迫下的MDA水平,但使可溶性糖含量显著升高。这些结果表明,槲皮素通过抑制主根生长,影响了中亚滨藜根系结构;通过降低氧化伤害,提高了中亚滨藜幼苗对盐胁迫的耐受性。盐胁迫还显著诱导了中亚滨藜幼苗对硝酸盐(NO3-)的累积,使用25mmol·L~(-1)和35 mmol·L~(-1) KNO3处理,可显著诱导其幼苗根尖类黄酮的累积。这些结果表明,硝态氮可能通过影响类黄酮途径,从而参与调控了中亚滨藜幼苗的耐盐性。本研究为进一步揭示中亚滨藜耐盐的生理与分子机制,以及类黄酮参与调控中亚滨藜耐盐性的生理与分子机理提供了理论基础;同时为使用现代生物技术和农艺措施提高作物耐盐性、改良盐碱地提供了理论依据和技术支持。  相似文献   

非光滑动力系统¹     

李爽  贺群 《勤云标准版测试》2011,31(2)

分析了图胞映射方法在处理非光滑动力系统过程中遇到的关键问题——胞流扩张。为了有效减小胞流扩张,基于迭代图胞映射方法,通过引入人工顶点集的概念,构建了非光滑系统迭代图胞映射具体实施方案,讨论了在此过程中值得注意的事项。结合典型实例分析,证实了该方法的有效性。  相似文献   

基于灰色关联分析法的耕地系统协调度研究     

梁辰  袁春  周伟  李爽 《安徽农业科学》2010,38(16):8606-8608

将协调度定义引入耕地系统,构建耕地系统集约指标评价体系,引入12个评价因子,应用灰色关联分析法获得各评价因子的影响频度。依据2004-2008年兰州市相关数据,利用评价因子影响频度进行耕地系统协调度分析,得到兰州市下属三县耕地系统的协调系数。结合各县区实际情况,分别提出提升耕地系统协调度的方法。结果表明,基于灰色关联度分析法的耕地系统协调度研究可以在众多评价因子中筛选出对整体系统影响频度最大或较大的因子,可为系统未来的协调发展给出合理的建议。  相似文献   

白粉菌诱导的华东葡萄环化cDNA文库中抗病基因筛选     

张军科  杜敬  李爽  朱自果  王跃进 《中国农业科学》2010,43(14):2944-2952

【目的】从环化的中国华东葡萄白河35-1经白粉菌接种诱导后的叶片所构建的cDNA文库中,筛选抗病相关基因序列。【方法】根据植物抗病基因在氨基酸水平上的保守结构域NBS的P-loop区和LRR设计特异引物,采用三维文库筛选法,对环化的葡萄白粉菌接种诱导后的叶片cDNA文库进行PCR筛选。【结果】共建组池24个,每个组池中含有单菌落768个,包含18432个克隆。从中筛选出具有抗病基因保守序列的阳性克隆585个,其中具有NBS保守序列引物筛选出330个,LRR保守序列引物筛选出255个。对获得的阳性克隆中的插入片段进行了测序,经生物信息学分析去除重复序列后,获得422条具有抗病基因保守结构域的基因序列,其中具有NBS保守序列的250条,具有LRR保守序列的172条,共有NBS和LRR保守序列的25条。【结论】经翻译分析,其中8条编码产物包含NBS的P-loop结构域(GW787739—787742、GW787746、GW787747、GW787749、GW787758),5条编码产物包含LRR结构(GW787743、GW787744、GW787750、GW787751、GW787753),1条华东葡萄特有基因(GW787754)。从中选出具有不同抗病结构域的10条基因进行病源侵染过程中的基因实时定量表达分析,发现其中5条抗病相关基因的表达可被白粉菌接种所诱导,可能与白粉病侵染过程有关。  相似文献   

冀北沙漠化土地黄柳生物沙障防风阻沙与土壤改良效益分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

李爽  纪晓林  黄选瑞  李玉灵  吕海燕  LV Hai-yan 《河北农业大学学报》2010,33(1)

流沙固定及土壤改良是冀北沙漠化土地植被恢复与重建技术体系的关键环节之一。本研究通过对冀北沙漠化土地黄柳生物沙障内与裸露沙地的风速、积沙量及土壤理化性质的观测分析,研究了黄柳生物沙障的防风阻沙效益及土壤改良效益。结果表明:黄柳沙障后1 m,0.5 m高度处的防风效能为28.69%,黄柳沙障内下垫面粗糙度为裸露沙地的4.5倍,黄柳基部积沙量为0.09 m3。黄柳沙障内0~10 cm、10~20 cm、20~40 cm土壤极粗砂粒(1.0 mm)含量分别比裸露沙地减少了92.84%、95.38%、82.85%,细砂粒(0.25~0.1 mm)含量则分别比裸露沙地增加了57.09%、44.93%、46.37%,土壤非毛管孔隙度较裸露沙地提高了24.85%、41.30%、22.86%。黄柳沙障内表层土壤有机质含量、微生物总量分别比裸露沙地高出30.93%、54.54%,沙障内土壤酶活性亦有增强,其中过氧化氢酶活性变化明显,其活性在0~40 cm土层比裸露沙地高出37.69%。  相似文献   

覆盖层的抗剪强度与土洞型岩溶塌陷高度关系的数值分析研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

李万有  陈立龙  李爽 《林业科技情报》2010,42(1):102-104

通过三雏快速拉格朗日有限差分法分析了阳春市大河水库移民河西安置典型土洞的塑性区分布情况。数值分析结果表明研究区典型土洞覆盖层在自重作用下所引起的塑性区已发展至地面,因此存在较大的塌陷可能。作者以此为基础,通过数值分析的方法,研究了在自重及其与均布外载联合作用下土洞型岩溶塌陷区的高度与覆盖层抗剪强度之间的关系。  相似文献