复合侵染甘蔗的病原病毒RT-PCR检测   总被引：1，自引：1，他引：0  

秦碧霞蔡健和  魏源文莫磊兴陆秀红  刘志明 《中国农学通报》2011,27(25):219-223

根据甘蔗花叶病毒（sugarcane mosaic virus,SCMV）、高粱花叶病毒（sorghum mosaic virus,SrMV）和甘蔗黄叶病毒（sugarcane yellow leaf virus,SCYLV）外壳蛋白（CP）基因序列分别设计合成3对特异引物SCMV–F/R、SrMV-F/R和SCYLV-F/R,以表现花叶和黄叶复合症状的甘蔗叶片总RNA为模板,分别进行3种病毒单一RT-PCR检测,在SrMV和SCYLV特异引物RT-PCR反应体系中分别扩增到约850 bp和630 bp特异性片段。序列测定及同源性比对结果显示,850 bp片段测序所得序列与浙江象山、临平和余杭SrMV分离物（GenBank登录号分别为AJ310194、AJ310195和AJ310198）对应序列同源性95%,630 bp片段测序所得序列与广东、广西、福建SCYLV分离物（GenBank登录号分别为GU190165、GU190162、GU190159）对应序列同源性99%,表明该样品同时感染SrMV和SCYLV。在此基础上建立同时检测SrMV和SCYLV的一步双重RT-PCR体系,可检测10-6 g病叶组织中的病毒,田间样品检测效果良好。  相似文献   

普通野生稻对南方水稻黑条矮缩病的抗性机制分析及主效QTL定位     

农保选  郭辉  张宗琼  夏秀忠  杨行海  曾宇  崔丽贤  梁云涛  秦碧霞  李丹婷 《分子植物育种》2024,(9):2930-2937

南方水稻黑条矮缩病给水稻生产带来巨大的产量损失,开展水稻对该病的抗性机制分析及抗性基因定位,将为抗病品种培育提供材料基础和理论依据。本研究利用QTL-seq技术结合连锁分析定位抗病野生稻材料Y11的抗性主效QTL。结果表明,Y11对南方水稻黑条矮缩病的抗性源于对病毒的抗性而非抗虫性,属于数量性状。此外,在第6染色体上SSR标记RM20148和RM20297之间检测到一个新的南方水稻黑条矮缩病抗性主效QTL qSRBSDV6。本研究初步阐明了普通野生稻对南方水稻黑条矮缩病的抗性机制,定位到一个新的南方水稻黑条矮缩病抗性主效QTL。研究结果将为南方水稻黑条矮缩病的分子育种奠定基础。  相似文献   

番茄抗黄化曲叶病毒病品种在广西南宁的自然抗病性表现     

徐鹏超  #  李战彪#  秦碧霞  谢慧婷  崔丽贤  蔡健和 《植物保护》2015,41(2):191-194

近年来,广西番茄黄化曲叶病毒病(TYLCD)发生较为严重,病原也比较复杂(发现4种病毒且存在复合侵染现象),对广西的番茄生产造成了很大威胁,种植抗病品种是防治该病的关键措施。本研究对中国农科院蔬菜花卉所、上海市农科院园艺所、浙江省农科院蔬菜所、江苏省农科院蔬菜所、北京市农林科学院蔬菜研究中心和广西大学提供的43份抗TYLCD番茄品种在广西南宁的自然抗病性进行了评价。采用自然诱发的方法,病圃的番茄混合感染中国番茄曲叶病毒与中国番木瓜曲叶病毒。试验结果表明,表现高抗的品种有‘浙红3号’、‘浙红4号’、‘K22’、‘K64’等8个番茄品种,表现抗病和中抗的品种有‘红贝贝’、‘春展56’等25个品种,表现感病的品种有‘樱红1号’、‘K6’等5个品种,表现高感的品种有‘金陵佳玉’、‘苏粉11号’等5个品种。本试验结果为抗病番茄品种在广西乃至全国的推广和布局提供参考。  相似文献   

番茄晚疫病菌对甲霜灵、霜脲氰和烯酰吗啉的敏感性检测   总被引：5，自引：0，他引：5  

朱桂宁  黄福新  冯兰香  秦碧霞  杨宇红  陈永惠  陆秀红 《中国农业科学》2008,41(5):1355-1365

 【目的】研究广西番茄晚疫病菌对甲霜灵、霜脲氰和烯酰吗啉的敏感性,以期为该病的综合治理提供科学依据。【方法】用菌落生长直径法测定病菌对甲霜灵、霜脲氰和烯酰吗啉的敏感性,并用叶盘漂浮法加以比较。【结果】2000～2006年,从广西8个冬春植番茄区采集分离了239个菌株,测定结果表明,对甲霜灵表现为敏感型、中间型和抗性型的频率分别为42.26%、35.98%和23.53%,不同地区和年份的菌株对甲霜灵的敏感性差异很大。来自田林县、武宣县的菌株均为甲霜灵敏感性菌株,但在田阳县,抗甲霜灵菌株占优势,抗性频率高达51.35%,一些菌株的EC50值在500 µg•ml-1以上,抗性水平超过105倍。虽然霜脲氰在广西使用了近10年,烯酰吗啉也已应用了5～6年,但并未检测到番茄晚疫病菌对它们的敏感性下降的抗药性亚群体,病菌的敏感性接近正态分布,因此可以采用它们的平均EC50值（霜脲氰0.1647±0.0255 µg•ml-1,烯酰吗啉0.0970±0.0052 µg•ml-1）作为抗药性监测的敏感性基线。叶盘漂浮法测定结果与菌落生长直径法一致。【结论】广西田林县、武宣县和南宁市番茄晚疫病菌尚未出现抗甲霜灵菌株,仍可用甲霜灵来防治该病,而其它地区则应减少或不使用甲霜灵,改用霜脲氰或烯酰吗啉。  相似文献   

甘蔗线条花叶病毒 RT-LAMP 检测方法的建立及应用     

李战彪  谢慧婷  崔丽贤  蔡健和  秦碧霞 《广东农业科学》2020,47(4):92-98

【目的】建立甘蔗线条花叶病毒（Sugarcane streak mosaic virus,SCSMV）的 RT-LAMP 检测方法,为 SCSMV 的检测提供技术支持。【方法】根据甘蔗线条花叶病毒外壳蛋白基因的保守序列设计特异引物,优化 RT-LAMP 的反应条件,对比分析 RT-LAMP 的检测灵敏度和特异性;并在 RT-LAMP 反应产物中加入 SYBR GREEN I 进行可视化检测,方便快速判定结果。【结果】成功建立了一种用于检测 SCSMV 的 RT-LAMP 方法,可在 60 ~ 63 ℃下 60 min 完成对 SCSMV 的检测,且具有较高的灵敏度,比传统 RT-PCR 高 100 倍,最低检测RNA 浓度为 167.9×10-5 ng。此外,该方法具有较高的特异性,可特异检测 SCSMV。【结论】建立了一种灵敏、简便、快速的 SCSMV RT-LAMP 检测方法并用于田间甘蔗样品的检测。  相似文献   

黄瓜绿斑驳花叶病毒抗血清制备及应用     

秦碧霞  蔡健和  黄金玲  胡冬梅  陆秀红  刘志明 《广西农业科学》2010,41(2):130-132

用葫芦[Lagenaria siceraria（Molina）Stand．]作为黄瓜绿斑驳花叶病毒（Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV）的繁殖寄主,通过差速离心和PEG二次沉淀法进行病毒提纯,用提纯病毒液免疫新西兰兔制备CGMMV抗血清。制备的CGMMV抗血清经间接ELISA法测定效价为1：5120;利用制备的抗血清检测田间样品,证明其可以用于CGMMV的血清学及免疫捕获RT—PCR检测。研究结果对今后开展葫芦科作物CGMMV检测,及时发现疫情以便采取防控措施,避免病毒扩散为害,确保葫芦科作物的安全生产具有重要意义。  相似文献   

番茄种质材料对南方根结线虫抗性鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

陆秀红  刘志明  黄金玲  秦碧霞  李国栋  乔丽娅 《广西农业科学》2010,41(2):133-135

采用盆栽接种2龄幼虫法,对4份番茄种质材料进行抗南方根结线虫鉴定,并对其有关生理生化指标进行观测。结果显示,番茄种质材料无限生长（红色）和Bss368对南方根结线虫表现为抗性,红吉星和大明星表现为感病,具体表现为抗性材料根际线虫量及根结数比感病材料少,根际线虫高峰期比感病材料晚;感病材料地上部分生长受抑制明显,根冠比高于抗病材料;抗病材料过氧化物酶（POD）活性高,积累量大,能及时阻止线虫的侵染。  相似文献   

侵染广西甘蔗的高粱花叶病毒分子鉴定初报   总被引：1，自引：1，他引：1  

秦碧霞  蔡健和  刘志明  魏源文  莫磊兴  陈永惠  谢玲 《中国糖料》2007,(4):29-31

  相似文献   

罗汉果叶病毒（WMV—2—Luo）抗血清制备及ELISA检测技术研究   总被引：6，自引：0，他引：6  

秦碧霞  蔡健和  刘志明  余玉冰 《西南农业学报》2001,14(4):14-16

用西葫芦作为罗汉果花叶病毒（WMV－2－Luo)的繁殖寄主，通过差速离心和PEG二次沉淀法得到WMV－2－Luo的提纯液，用该病毒提纯液免疫日本大白兔，获得了WMV－2－Luo兔抗血清。经ELISA测定，其效价为1／5 120，以0．1mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.8，含1．5％NaDIECA)作为样品制备缓冲液，用间接ELISA法检测WMV－2－Luo的灵敏度为1／3 200。用此方法检测罗汉果组培苗带毒情况和田间株均获得成功。  相似文献   

葫芦种子传黄瓜绿斑驳花叶病毒的检测*   总被引：1，自引：0，他引：1  

秦碧霞  蔡健和  陆秀红  林林  廖富荣  刘志明 《植物保护》2011,37(3):109-112

从感染黄瓜绿斑驳花叶病毒（Cucumber green mottle mosaic virus, CGMMV）的葫芦植株上收取种子,通过苗期症状观察法、双抗体夹心酶联免疫吸附法（DAS-ELISA）、免疫捕获反转录PCR（IC-RT-PCR）法测定葫芦种子的带毒情况,并用生物学接种方法测定葫芦种子携带病毒的侵染活性。苗期症状观察法结果表明,199株幼苗有2株表现花叶斑驳症状,种子传毒率为1.01%;而利用DAS-ELISA和IC-RT-PCR法随机检测30粒葫芦病株种子,CGMMV检出率为100%。种子各部位携带的CGMMV接种葫芦表现典型的花叶斑驳症状,表明葫芦种子携带的CGMMV具有侵染活性。DAS-ELISA检测葫芦种子CGMMV的灵敏度为1/5120种子研磨液。  相似文献