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根据番茄褐色皱果病毒（tomato brown rugose fruit virus,ToBRFV）外壳蛋白（coat protein,CP）的保守基因序列设计1对特异性引物,建立了基于SYBR Green I的ToBRFV实时荧光RT-PCR检测方法,并对其进行了特异性、灵敏度检测,对自然感染ToBRFV的番茄、辣椒种子进行了检测验证。结果表明,构建的实时荧光RT-PCR检测ToBRFV阳性的番茄种子总RNA和重组质粒标准品的检测低限分别为0.2 ng/μL和50.0拷贝/μL,均为普通RT-PCR检测灵敏度的100倍;对番茄花叶病毒（tomato mosaic virus,ToMV）、番茄环斑病毒（tomato ringspot virus,ToRSV）、番茄黑环病毒（tomato black ring virus,TBRV）、番茄斑萎病毒（tomato spotted wilt virus,TSWV）、辣椒轻斑驳病毒（pepper mild mottle virus,PMMoV）、烟草花叶病毒（tobacco mosaic virus,TMV）和烟草环斑病毒（tobacco ri... 相似文献
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以进境的菠菜种子为试验材料,采用特异性引物逆转录PCR(RT-PCR)检测鉴定菠菜潜隐病毒(SpLV),并对扩增得到的特异性片段进行进一步测序验证。结果表明,采用的3对引物分别扩增得到了3种不同大小的特异性片段,其中引物对SpLV-RNA2-F/R扩增的RNA2组分产物量最大,条带清晰,最适合日常SpLV的检测鉴定,目的条带测序结果与GenBank发布的菠菜潜隐病毒分离物的同源性为97.87%～100.00%,进一步说明进境菠菜种子感染了菠菜潜隐病毒。这是我国首次从进境菠菜种子上截获菠菜潜隐病毒。 相似文献
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