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罗布麻基因文库的构建 总被引：2，自引：0，他引：2
本文从罗布麻（Ａｐｏｃｙｎｕｍｖｅｎｅｔｕｍ）幼苗中提取了大分子量ＤＮＡ，经Ｓａｕ３Ａ部分酶解，从琼脂糖凝胶中回收１２－２２ｋｂ的＂目的＂ＤＮＡ片段，用ＢａｍＨＩ／ＥｃｏＲＩ双酶切入ＥＭＢＬ３ＤＮＡ制备克隆载体。＂目的＂ＤＮＡ片段与载体连接，体外包装，所得重组子数为３．７４×１０６ｐｆｕ，达到了建库要求的理论值。以番茄１，５－二磷酸核酮糖羧化酶／加氧酶（Ｒｕｂｉｓｃｏ）小亚基基因（ｒｂｃＳ）的ｃＤＮＡ为探针，用噬菌斑原位杂交法，斑点杂交法，从基因文库中选出４个含罗布麻ｒｂｃＳ基因的阳性克隆。 相似文献
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利用合成的寡聚核苷酸引物及 PCR 扩增技术对 B.t.k-δ-内毒素基因进行了克隆和修饰。在大肠杆菌中表达的抗虫试验表明该修饰过的 B.t.k-δ-内毒素基因对鳞翅目昆虫如烟青虫和棉铃虫有较强的毒杀作用。随后,通过农杆菌介导将该基因转入烟草,RNA 点杂交及抗虫试验表明 Bt 基因在烟草中得到表达,其表达水平足以防治烟青虫的为害。 相似文献